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J.‐J. Luo H.‐W. Song B. Zhang L.‐L. Li Y.‐G. Chen Y. Peng L.‐Z. Wu J.‐X. Fan J.‐S. Zhan 《Journal of animal physiology and animal nutrition》2014,98(3):517-521
To clone adiponectin (ADPN) gene from Shaziling porcine adipocyte and construct its eukaryotic expression vector, total RNA was extracted from subcutaneous fatty tissue. One pair of specific primers was designed by Primer 5.0 software according to the sequence of ADPN gene of porcine available in GenBank. The ADPN gene was amplified by PCR from cDNA and cloned into pMD18‐T vector to construct recombinant clonal vector pMD‐ADPN, sequenced and analysed. A recombinant expression plasmid pPICZaA‐ADPN was constructed by subcloning the cloned ADPN gene into the linearized pPICZaA vector. Then, the plasmid pPICZaA‐ADPN was expressed in Pichia pastoris (GS115) by electrotransformation. Western blot and Bradford analysis were used to determine the target protein induced by methanol. Results showed that the genome size of ADPN was 732 bp and encoded 244 amino acid, the nucleotide sequence of ADPN shared 100% identity with that of porcine available in GenBank. Western blot and Bradford analysis showed that the recombinant ADPN was expressed in GS115 correctly and has certain immune activity. The expression level of ADPN was 28.5 μg/ml. In conclusion, the recombinant ADPN could express in eukaryotic expression vector pPICZaA‐ADPN constructed in this study effectively. 相似文献
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Kjelgaard-Hansen M Wiinberg B Aalbaek B Olsen L Harris D Romaschin A Kristensen AT Jensen AL 《Comparative immunology, microbiology and infectious diseases》2008,31(6):477-485
The dog is widely used as a translational experimental model studying the host response and new treatments for human endotoxemia. The present study evaluated the applicability of a novel patient-near neutrophil chemiluminescence assay for the measurement of endotoxin activity in human blood when applied to canine blood samples. The assay was observed to be analytically sensitive and specific to endotoxin when tested in vitro, spiked with purified Escherichia coli lipopolysaccharide and live E. coli. The diagnostic sensitivity was sustained during Gram-positive contamination. Finally, it also demonstrated diagnostic potential when able to discriminate dogs with spontaneously occurring endotoxemia from both healthy dogs and diseased dogs without endotoxemia. The rapid patient-near assessment of endotoxin activity in canine blood should facilitate future studies on endotoxemia in both spontaneous disease and in experimental settings. 相似文献
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本研究旨在比较HIF-1α和IL-17在不同牛睾丸组织中的差异性表达,进一步探究HIF-1α与IL-17在牛睾丸组织中发挥调控功能的关联性。以成年牦牛、犏牛和黄牛的睾丸作为研究对象,采用Western-blot、实时荧光定量PCR法检测HIF-1α及IL-17蛋白和基因在3种牛睾丸组织的表达差异。结果显示,3种牛睾丸组织中HIF-1α与IL-17基因和蛋白表达都存在显著性差异,且在犏牛睾丸组织中的表达均极显著高于牦牛和黄牛(P<0.01);此外,牦牛HIF-1α与IL-17蛋白水平表达显著高于黄牛(P<0.05,P<0.01),而牦牛IL-17基因水平表达与黄牛差异不显著(P>0.05)。HIF-1α和IL-17基因和蛋白在不同牛睾丸组织中的表达差异说明其具有种属特异性;而牦牛和犏牛睾丸组织中显著性高表达提示HIF-1α和IL-17对适应低氧环境具有重要的调节作用。 相似文献
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兽药的不合理使用可导致动物产品及环境中兽药残留超标,从而对公共卫生安全构成威胁。QuEChERS法是一类快速、简便、经济、高效、耐用和安全的样品前处理方法,常用于植物产品农药检测。通过持续优化,目前该方法开始在动物产品兽药残留检测中得到应用。本文综述了QuEChERS法的特点,探讨了该方法在畜禽产品或样品兽药残留检测中的优化与应用。与植物样品相比,动物相关样品基质复杂,脂肪含量较高,因此需要对QuEChERS法进行优化。常用的优化方式包括提取液优化、脱水盐优化和吸附剂优化。目前QuEChERS法在畜禽肌肉、内脏、鸡蛋、牛奶及相关产品以及尿液、粪便等环境样品兽药残留萃取中得到应用。随着与其他提取净化方法的连用以及自动化提取装置的不断更新,未来QuEChERS法会得到持续优化与发展,其提取效率和净化效果将进一步得到提高,并将在动物产品残留检测中发挥重要作用。 相似文献
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剖析警犬侦破命案的成功案例,笔者发现带犬民警在命案现场的勘查工作至关重要。现场勘查工作仔细、有成效,警犬技术就能快速发挥作用;反之,警犬技术则无 相似文献
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ZD制剂为治疗马非开放性软组织损伤的经典验方,为探索其作用机制,通过建立马前肢急性软组织损伤模型,对其进行组织形态学观察,评价ZD制剂对马急性软组织损伤的作用效果,采用免疫组织化学方法检测ZD制剂对VEGF、bFGF在肌肉中表达的影响。用20匹蒙古马随机分为4组,选取左前肢肩部臂部肌肉,制造急性软组织损伤模型。于造模前、后用取样器进行组织取样,制作成石蜡切片,观察其形态学变化,用免疫组织化学方法对阳性细胞分析VEGF、bFGF的表达。结果表明,试验药物组在损伤后的修复能力优于阳性药物组和阴性对照组。表明ZD制剂可通过促进成纤维细胞、毛细血管新生和肌细胞的生成来进行组织的修复再生,试验药物组在损伤后VEGF、bFGF的表达优于阴性对照组和阳性药物组,ZD制剂可能通过提高VEGF、bFGF的表达进行损伤的修复。 相似文献
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一水肌酸对杜浙猪肉质性状、肌肉磷酸原代谢、纤维类型特征及蛋白质溶解度的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本文旨在研究饲粮添加一水肌酸(CMH)对杜浙猪肉质性状、肌肉磷酸原代谢、纤维类型特征及蛋白质溶解性的影响。试验选取体重70 kg左右杜浙猪30头,随机分为2组,每组5个重复,每个重复3头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮+0.5%CMH,试验期30 d。结果显示:与对照组相比,饲粮添加CMH对杜浙猪生长性能无显著影响(P0.05),使背最长肌宰后24 h p H和剪切力显著增加(P0.05),滴水损失和压榨损失显著降低(P0.05),背最长肌的肌酸(Cr)总量、磷酸肌酸(PCr)储备量、肌酸激酶(CK)活性、白蛋白及肌原纤维蛋白溶解度显著增加(P0.05),背最长肌肌球蛋白重链(My HC)Ⅱa mRNA比例显著降低(P0.05)。结果提示,饲粮添加CMH对杜浙猪肉质性状具有调控作用,对肌肉磷酸原代谢能力、蛋白质溶解度及肉品系水力产生显著影响。 相似文献