七彩神仙鱼 BTN1A1 基因克隆及其在嗜水气单胞菌胁迫下的表达分析

【目的】克隆七彩神仙鱼（Symphysodon aequifasciatus）嗜乳脂蛋白 1A1（Butyrophilin 1A1, BTN1A1）基因,分析其在病原刺激下的表达模式,为了解七彩神仙鱼 BTN1A1 基因功能提供依据。【方法】利用生物信息学对七彩神仙鱼 2 个 BTN1A1 基因（BTN1A1-1 和 BTN1A1-2）进行结构和进化分析。根据前期获得的七彩神仙鱼皮肤转录组数据,选取 BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 基因的 CDS 区设计引物进行克隆。采用 qRT-PCR 分析 BTN1A1 在各组织中的表达及嗜水气单胞菌刺激下的表达模式。【结果】BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 的 ORF 序列长度为 894、1 275 bp,分别编码 298、424 个氨基酸。BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 蛋白均具有 1 个信号肽、1 个 Ig 结构域、1 个 lg_like 结构域和 1个跨膜结构域的经典结构,BTN1A1-2 还具有 1 个胞质结构域。七彩神仙鱼 BTN1A1-1 与慈鲷科其他鱼类相似性较高,与尼加拉瓜湖始丽鱼（Archocentrus centrarchus）BTNIAI 对应氨基酸序列同源性最高、为 94.14%。但 BTN1A1-2 与其他鱼类发生分离,形成独特分支。BTN1A1-1 和 BTN1A1-2 在七彩神仙鱼各组织中均有表达,但在鳃、肠道、皮肤等与免疫相关的组织中表达量相对较高。七彩神仙鱼 BTN1A1-1 在嗜水气单胞菌胁迫后表达量先显著下降后上升,而 BTN1A1-2 表达量则先显著上升后下降。【结论】七彩神仙鱼 BTN1A1-1 基因相对保守,而 BTN1A1-2 基因在进化上较为特殊。二者在免疫刺激下的差异表达暗示其可能在七彩神仙鱼免疫防御中发生功能分化。     

利用绿色荧光蛋白优化辣椒遗传转化体系

【目的】农杆菌介导的辣椒遗传转化较为困难,至今仍未建立高效转化体系。绿色荧光蛋白(GFP)基因是植物遗传转化中常用的报告基因,以GFP为报告基因,优化农杆菌介导的辣椒遗传转化体系。【方法】利用GFP表达系统,统计3个辣椒品种(‘HP’‘8214’和‘L55’)中3种不同外植体(子叶、下胚轴和Flamingo-bill外植体)的不定芽分化率、不定根分化率与荧光阳性率,探究农杆菌侵染浓度、侵染时间、预培养时间和共培养时间等因素对不定芽、不定根分化率及荧光阳性率的影响。【结果】3个辣椒品种的Flamingo-bill外植体不定芽分化率均显著高于下胚轴与子叶外植体,其中‘L55’ Flamingo-bill外植体的不定芽分化率最高、达77.59%,故选用‘L55’ Flamingo-bill外植体进行后续研究。4种农杆菌不同侵染浓度和时间组合下,‘L55’Flamingo-bill外植体均可产生不定芽、不定根及表达GFP的愈伤组织,当农杆菌侵染浓度为OD₆₀₀=0.05,侵染时间为30 min时,不定芽分化率和荧光阳性率最高,分别达48.39%、4.84%。在6种不同预培...     

浅谈福建省绿色通道与城乡一体化工程建设中的树种选择和植物配置

分析了福建省绿色通道与城乡一体化工程建设的主要类型、建设特点、树种选择和植物配置的基本原则,提出了工程建设树种选择和植物配置。     

关于大兴安岭地区绿色产业发展的思考

分析了大兴安岭绿色特色产业发展现状,指出了存在的问题,并提出发展绿色产业的6点构想。     

混凝土剪扭构件承载力实用计算

钢筋混凝土剪扭构件承载力计算比较繁琐,本文基于对钢筋混凝土剪扭构件承载力计算公式的简化,提出一种计算图表的实用计算方法,并利用两个算例的计算验证了方法的有效性。     

城市居民应树立依法养犬意识

随着国内社会经济的发展,城市居家生活中饲养各类犬和已成为一种时尚。在饲养犬的过程中,由于一些饲养者法律意识的淡薄和对养犬专业知识的缺乏,往往造成一些侵权行为的产生,带来不必要的纠纷和经济损失。对于养犬爱好者而言,应当熟悉掌握当地政府部门制定准于养犬的相关规定,把个人的养犬行为置于国家法律和道德规范之中,做到依法保障个人养犬权益,     

DNA分子标记检测家蚕苏菊、明虎品种和纯度的研究

利用单粒卵微量DNA抽提法,从江苏省家蚕主要品种苏菊、明虎及其一代杂交种蚕卵快速提取出基因组DNA,用筛选出的 RAPD随机引物S77稳定扩增出苏菊、明虎的DNA特异性片段RS和RM,克隆和测序后大小分别为1694bp和1303bp,使用Blastn程序在NCBI 数据库检索发现,Rs的nt30-429与一个家蚕WGS(whole genome shotgun sequence)(dbj|BAAB01119085．1,contis504766)的nt472-874有92％的同源性,其中存在11个空缺位点(Gaps);RM的nt1070-1301与另一个家蚕WGS(dbj|BAAB01141578．1,contig554782)的nt262-31有91％的碱基相同,其中存在2个Gaps。进一步根据RS和RM序列合成SCAR标记引物PS-1(FP:5’ttccccccagtacgcaataac3’,RP:5’ ttccccccagacgtcacgtact3’)和PM-1(FP:5’ttcccccagtgatggaatttacg3’,RP:5’ttccccccagtccaatgttaca3’),能够准确、快速地鉴别所标记的苏菊、明虎及其F1蚕品种。     

大棚温室作物需水量计算模型研究进展

对目前国内外大棚温室作物需水量计算模型的研究进展进行了归纳总结,在此基础上指出：基于不同气候（主要是室内外气候耦合的相关度）条件下应使用不同的计算模型,并建议对大棚温室微气候复杂的动态系统进行数值模拟及建模,有利于进一步提高计算室内作物需水量模型的精度。     

库尔勒香梨砧木组织培养

试验选用库尔勒香梨矮化中间砧S系、F系中的品种嫩茎尖作为试验材料进行了离体增殖研究,结果表明,不同种类的基本培养基及不同浓度配比的植物生长调节剂对试管苗增殖的效果不同。M S培养基较A S、B5培养基更有利于矮化砧S系、F系茎的增殖,中等浓度的细胞分裂素(BA)与较低浓度的生长素(IBA)、赤霉素(GA3)配合使用效果更理想。综合茎质量、茎数量等指标认为:M S BA 1.0 m g/L IBA 0.05 m g/L GA31.0 m g/L是矮化砧S系、F系试管苗茎增殖的最佳培养基。