减毒沙门氏菌介导H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用研究

构建获得含有H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组真核表达质粒pCAGGS-HA。重组质粒电转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,获得重组沙门氏菌SL7207(pCAGGS-HA)。重组菌SL7207(pCAGGS-HA)以5×109cfu的剂量2次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡后,再以油乳剂灭活疫苗加强免疫1次,并设立重组菌单独免疫组、灭活苗免疫组、空载体免疫组及空白对照组。联合免疫组和重组菌单独免疫组的小肠黏膜抗体效价与其他组之间存在显著差异(P<0.05),且两组的攻毒免疫保护水平与空载体组之间差异显著(P<0.05),其中联合免疫组的免疫保护率最高,达100%,而灭活苗免疫组保护率为80%,表明减毒沙门氏菌介导的H9亚型禽流感DNA疫苗与灭活疫苗联合应用具有良好的免疫协同作用。     

仪器分析课程的教学研究

针对目前仪器分析课程的教学现状和存在的问题,结合生物科学专业的特点,笔者在教材选择、教学模式、教学方法和手段、实验教学、考核评估等方面对仪器分析课程的教学改革进行探索,以期在有限的学时内达到巩固基础、系统理论,了解前沿知识和提升能力的学习效果。     

产单核细胞李斯特菌的污染状况监测

应用PCR快速检测方法对生猪屠宰加工流通环节的产单核细胞李斯特菌（Listeria monocytogenes,Lm）进行分子流行病学监测,结果表明,市场生鲜肉污染率为5%,而宰前猪毛、大肠及入冷库前猪肉样品未被污染。     

破伤风毒素C片段基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

本研究对破伤风毒素C片段进行了基因克隆、重组表达、蛋白纯化和免疫原性分析。应用PCR技术直接从破伤风梭菌64008菌株基因组中扩增出大小为1356 bp的破伤风毒素C片段(TetC)基因,经DNA序列测定分析,扩增出的基因与GenBank上登录的序列AF154828的同源性达到99.2%。将此基因克隆至大肠杆菌融合表达载体pGEX-6P-1,构建成重组表达质粒pGEX-6P-1-TetC,并在大肠杆菌BL21中表达,重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的21%。经SDS-PAGE蛋白电泳鉴定,表达产物为76 Ku左右的重组蛋白,经免疫印迹试验证实该重组蛋白是破伤风毒素C片段抗原。     

仪器分析课程实验教学改革探讨

仪器分析课程是生物工程的一门基础性、工具性的学科。随着现代仪器分析技术的不断发展,目前高校的仪器分析课程实验教学已经不能满足现代社会对于实践能力和创新精神的需求,教学改革迫在眉睫。分析了生物工程仪器分析课程实验教学的现状及存在的问题,并从课程重构、以研促教、校企合作3个方面提出了以生产实践为导向的改革措施,以期为培养高素质生物工程应用型人才提供参考。     

酶标单抗阻断ELISA检测鸡白痢和鸡伤寒抗体

以辣根过氧化物酶标记的沙门氏菌O9单抗3-47-0与包被的鸡白痢沙门氏菌脂多糖抗原建立了一种抗体阻断EL ISA以检测鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌感染。该方法基于待检血清样品抑制酶标单抗与脂多糖的结合,以检测鸡白痢和鸡伤寒特异性抗体。对72份已知鸡白痢阳性血清(抑制率为(98.5±4.0)%)、54份已知鸡白痢阴性血清(抑制率为(15.3±8.0)%)、42份SPF鸡血清(抑制率为(0.8±7.2)%)检测的结果表明,该方法具有很强的区分能力。在人工感染试验中,从第2周开始,该方法能从全部鸡只中检测到特异性抗体,比全血玻板凝集试验(PAT)早1周时间。对344份种鸡血清的检测结果表明,单抗阻断EL ISA比PAT特异性好、敏感性高。另外,该方法也能检测出与鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌有共同抗原的沙门氏菌感染产生的抗体。     

鸡传染性支气管炎病毒S1基因的真核表达及其产物的免疫原性

采用RT-PCR扩增出鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M 41株的全长S1基因,并将其片段连接到pGEM-T载体,经酶切、PCR及序列测定表明,获得的S1基因ORF全长为1 659 bp,与G enB ank上公布的IBV M 41 S1基因序列一致。将S1基因与真核表达质粒pVAX 1连接,构建重组真核表达质粒pVAX 1-S1。将重组质粒转染COS-7细胞,采用间接免疫荧光检测转染细胞S1蛋白的表达。同时以重组质粒免疫小鼠,可诱导产生特异性针对IBV S1蛋白的抗体(P<0.01)。这为鸡传染性支气管炎新型基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

蜂蜜酶值（DN）快速检测法——标准参考比色板法

蜂蜜中淀粉酶活性值（酶值ＤＮ）是评定蜂蜜质量的一项重要指标,新鲜的蜂蜜其酶值较高,营养好。本文在传统检测方法,度管碘反应目测法和分光光度比色法的基础上,结合两者的优点,采用标准参考比色板法,该方法具有方便、易行、快速可靠等优点。     

光合细菌在家禽水产养殖中的应用研究

在青年蛋鸭、肉用雏鸡的日粮中添加1.5%以及在稚鳖、稚龟的水体中添加1.0%的光合细菌（PSB）浓缩液，研究其对蛋鸭、雏鸡、稚鳖、稚龟生产性能及水质的影响。结果表明：PSB具有提高家禽、水产动物成活率、促进生长、净化水质的作用。     

光合细菌在家禽水产养殖中的应用研究

在青年蛋鸭、肉用雏鸡的日粮中添加 1 .5%以及在稚鳖、稚龟的水体中添加 1 .0 %的光合细菌 ( PSB)浓缩液 ,研究其对蛋鸭、雏鸡、稚鳖、稚龟生产性能及水质的影响。结果表明 :PSB具有提高家禽、水产动物成活率、促进生长、净化水质的作用