平果金花茶ISSR-PCR反应体系的建立与优化

采用正交设计和单因素试验相结合的方法,快速建立并优化平果金花茶ISSR-PCR反应体系和程序。平果金花茶ISSR-PCR适宜的反应体系:20μL反应体系含模板DNA 50ng、引物0.75μmol/L、dNTP 0.15 mmol/L、Mg2+1.50 mmol/L、TaqDNA聚合酶1.00 U、10×buffer 2.00μL。扩增程序:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,52.2℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,45个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。经过8份平果金花茶种质的检测,表明该体系稳定、重复性好,可用于平果金花茶遗传多样性分析。     

猪喘气病的症状及防治对策

猪呼吸道病复合症 (ｔｈｅｐｒｏｃｉｎｅｒｅｓｐｒｉａｔｏｒｙｄｉｓｅａｓｅｃｏｍｐｌｅｘ,ＰＲＤＣ)是由多种病原引起的呼吸困难的疾病 ,它使猪生长迟缓 ,饲料报酬降低。临床表现为嗜眠、厌食、发烧、咳嗽。本病在 1 8～ 2 0周龄育成猪中特别普遍 ,已成为全世界养猪生产造成较大经济损失的呼吸道疾病。主要病原为猪肺炎支原体 (Ｍｈｐ)、蓝耳病病毒(ＰＲＲＳＶ)、猪流感病毒 (ＳＩＶ)、猪多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌等。猪喘气病是一种慢性接触性呼吸道病 ,又名猪地方性流行肺炎。本病发病率高 ,分布面广 ,除引起死亡外还导致…     

野外采集牦牛睾丸组织的冷冻保存及其生精细胞的复苏培养研究

采用玻璃化冷冻方法对野外采集的牦牛睾丸组织进行冷冻,通过HE(hematoxylin-eosin)染色分析发现玻璃化冷冻后的牦牛睾丸组织曲细精管结构保存较完好,曲细精管可见大量形态完好的各类生精细胞。采用台盼蓝染色检测细胞活率,发现冷冻复苏后细胞活率可达80.20%。分别通过生精细胞和精原干细胞标志蛋白DDX4和GFRA1免疫荧光染色发现复苏后培养14天后的生精细胞和精原干细胞的数量明显减少。通过RT-qPCR对复苏后不同实验处理组牦牛睾丸细胞标志基因的表达分析,发现培养30天的生精细胞中的精原干细胞标志基因Thy1和UCHL1的表达量显著增高。因此,玻璃化冷冻保存的牦牛睾丸组织中曲细精管及其生精细胞得到了较好的保护,该方法对于其他哺乳动物生精细胞的长久有效保存具有重要的参考价值。     

桂林福本和纽荷尔脐橙前期花芽形态分化比较研究

对福本和纽荷尔花芽分化时期和形态解剖特征进行研究,以便为桂林地区早熟脐橙的花期花量调控提供科学依据。采用石蜡切片法对福本和纽荷尔脐橙花芽分化过程进行解剖观察研究。研究表明：福本和纽荷尔花芽分化都从10月下旬开始,但在时间上也存在一定的差异,其中福本多数集中在12月中上旬,历时3.5个月;纽荷尔多数集中在12月中下旬,历时4个多月。福本和纽荷尔均从12月中旬开始萼片分化,福本翌年1月上中旬达到盛期;纽荷尔直至翌年2月上中旬才达到盛期。福本翌年1月下旬进入花瓣形成期,纽荷尔在2月上旬的切片中还未观察到花瓣分化。两个品种未分化时芽体均小,花芽芽体横径从萼片形成期开始明显增大。实验还观察到,两个品种有些花芽数个叠生,聚伞花序。     

凉粉草遗传多样性的SCoT和ISSR分析

采用SCoT和ISSR两种分子标记技术对7份凉粉草种质资源进行遗传多样性分析.结果显示:筛选出的8条SCoT引物共扩增出90个位点,多态性比率为83.33％,遗传相似系数变化范围为0.47 ～0.83;筛选的10条ISSR引物共扩增出100个位点,多态性比率为70.0％,相似系数变化范围为0.61 ～0.80.聚类分析结果显示,7份凉粉草种质资源被分为三大类,两种分子标记的分类结果基本一致,表明SCoT和ISSR两种分子标记均适用于凉粉草种质资源的遗传多样性研究.     

基于地方分离B型诺维氏梭菌的产毒试验及羊羔疫菌苗的研制

以分离自青海省海晏县病死羊脏内的一株B型诺维氏梭菌株为研究对象,通过不同培养基、不同p H及不同培养时间等进行产毒比较试验证明,该菌在含1.0%葡萄糖培养基,p H 8.0~8.4,37℃培养72h产毒达最高点,平均可达2万MLD/m L,最高可达4万MLD/m L;利用该菌株制成羊黑疫单价疫苗,并以标准菌株菌苗作为对照,完成了家兔免疫攻毒、血清抗体测定;羊免疫血清抗体测定及高免血清的制备等试验。试验结果表明,该疫苗0.1m L免疫家兔21d,可抵抗200MLD(家兔最小致死量)毒素的攻击,是现用疫苗的2倍,0.1m L家兔免疫血清可中和300MLD(小白鼠最小致死量)的毒素,是现用疫苗的3倍,羊免疫14d,血清0.1m L可中和400 MLD(小白鼠最小致死量)的毒素,180d时血清0.1m L可中和50MLD的毒素,用此疫苗免疫家兔制备的抗血清每m L可中和160000MLD毒素。该菌株在筛选的培养基上具有良好的产毒性能,制备的羊黑疫疫苗免疫效果明显优于标准菌株菌苗,可作为羊黑疫疫苗生产用菌株。     

猪大肠杆菌自家菌株油乳剂灭活苗的研制与免疫效果观测

仔猪黄白痢是由猪致病性埃希氏大肠杆菌引起的一种传染性肠道疾病，仔猪发生严重腹泻，并导致脱水，败血症或继发其他疾病，仔猪发育受阻，甚至死亡，给养猪业带来巨大的经济损失。长期以来，该病的防治主要依赖药物，但极易产生耐药性，效果并不理想。大肠杆菌的血清型数量繁多，各猪场都有自己特异性致病菌，使得疫苗广泛应用受到限制。为了探讨自家菌苗的免疫效果，笔者在对福州市某猪场做致病性大肠杆菌血清型鉴定的基础上，选取自家优势菌群制成多价油乳剂灭活苗，进行了小群试验，现报道如下：１、材料与方法１．１病料用灭菌棉签从该…     

原儿茶酸对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎的作用机制研究

【目的】 探究原儿茶酸对脂多糖(LPS)诱导的小鼠子宫内膜炎的作用机制。【方法】 将60只小鼠随机分为对照组、LPS组、LPS+不同浓度原儿茶酸(20、40、80 mg/kg)组共5组,每组各12只。对照组小鼠用微量注射器经阴道灌注50 mL生理盐水,LPS组灌注50 mL LPS(1 mg/kg),原儿茶酸治疗组灌注50 mL LPS前1 h分别腹腔注射20、40、80 mg/kg原儿茶酸,注射24 h后,颈椎脱臼法处死所有小鼠。收集子宫组织,通过HE染色检测子宫组织病理变化,用试剂盒检测髓过氧化物酶(MPO)活性,ELISA法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6含量;Western blotting法检测p65、核因子-κB(NF-κB)的抑制蛋白(IκB)以及磷酸化p65、IκB(p-p65、p-IκB)蛋白表达水平。【结果】 组织病理结果显示,对照组小鼠子宫组织形态正常,子宫内膜上皮结构正常;LPS组小鼠子宫组织出现严重的炎性细胞浸润和子宫内膜上皮充血及水肿。与LPS组相比,随着原儿茶酸浓度的增加,小鼠子宫组织中炎性细胞明显减少,子宫内膜上皮充血水肿情况也明显得到改善。MPO活性检测表明,与对照组相比,LPS组MPO活性极显著升高(P<0.01);与LPS组相比,原儿茶酸治疗组MPO活性均极显著降低(P<0.01),并呈剂量依赖性。ELISA结果表明,与对照组相比,LPS组小鼠子宫内膜组织中TNF-α、IL-1β和IL-6含量均极显著升高(P<0.01);与LPS组相比,原儿茶酸治疗组小鼠子宫内膜组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量均极显著降低(P<0.01),并呈剂量依赖性。Western blotting结果表明,与对照组相比,LPS组p-p65和p-IκB的表达水平均极显著升高(P<0.01);与LPS组相比,原儿茶酸治疗组p-p65和p-IκB的表达水平均极显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。【结论】 原儿茶酸通过减轻子宫组织的病理变化,降低子宫组织MPO活性,抑制NF-κB信号通路及炎症细胞因子的产生,对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎起到保护作用。     

加大“三品”认证力度 促进农产品质量安全

仪陇县幅员面积1767km^2，辖58个乡（镇），总人口108．83万人，其中农业人口94．14万人，农村劳动力47万个，耕地总面积63．15万亩，农民人均纯收入3266元。2008年以来，仪陇县启动了“无公害、绿色食品行动计划”，强力推进农业“三品”认证工作，全力打造名优农业品牌，有效地促进了农产品质量上台阶。继“仙宇”牌食用植物油、     

桑树断梢病防治效果初试

<正> 近几年来桑树断梢病在我市部分地方危害日趋严重,导致春叶减产,蚕儿缺叶吊食,直接影响蚕茧产量和质量。针对此种情况,我们在较严重的土垭乡五村三社,扶农乡三村五社于1994、1995两年进行防治试验,收到了较好的效果。 该病病状是:一般在5月中旬,在新梢基部出现黑褐色点斑后发展成块斑、周斑,长度为1～2cm,其病斑着生处有数个白桑果(为