陆川猪脂蛋白脂酶基因的克隆与序列分析

[目的]对陆川猪脂蛋白脂酶(LPL)基因进行克隆与序列分析,为后期开展LPL基因表达与陆川猪肌内脂肪沉积的相关性研究奠定基础.[方法]根据GenBank中已公布的猪LPL基因序列设计引物,以陆川猪背最长肌组织总RNA为模板,利用RT-PCR扩增其LPL基因,测序结果用Lasergene 7.0软件进行序列分析,用MEGA 6.0软件进行同源性比较及构建系统进化树,同时利用在线蛋白质结构分析软件(PMP)预测陆川猪LPL蛋白二级结构.[结果]成功克隆获得陆川猪LPL基因编码区长1437 bp,与GenBank中已公布普通猪、大白猪、杜洛克猪、通城猪、贵州白香猪的基因同源性分别为99.6%、99.7%、99.7%、99.7%和99.4%.陆川猪LPL基因第760位点存在特有的碱基A,该突变导致缬氨酸突变为蛋氨酸.由基于LPL基因碱基同源性构建的物种系统进化树可知,广西陆川猪与大白猪的遗传距离最近,其次是山羊,最远的是小鼠.蛋白二级结构预测结果表明,陆川猪的LPL蛋白二级结构包含有N-端结构域和C-端结构域两个区域,且存在PLAT/LH2.[结论]LPL基因可作为研究陆川猪脂肪沉积的主要候选基因之一.     

蟛蜞菊对肉兔的饲用价值

选择24只体重相近的40日龄肉兔,随机分成2组,每组12只,基础日粮相同,青饲料分别饲喂桂牧1号象草与蟛蜞菊,两组在平均日增重、平均日耗基础料量、平均日耗青料量间均无显著差异（P〉0．05）,表明肉兔采食蟛蜞菊可正常生长发育。同时,两组内兔的血液指标和内脏重量无显著差异,表明蟛蜞菊与桂牧1号的饲用价值相似,可用于肉兔生产。     

感知·情景·体验——风景园林设计思维训练的教学探讨

结合风景园林设计思维的特性及生成特征,以突破感知障碍、代入情景、深入体验为教学主线,提出风景园林设计思维训练的途径及教学方法:创造性思维训练应从感知视角展开体验;整体性思维训练要从情景转换、场所策略及行为功能等方面展开专项设计思维训练;功能性思维训练应注重的是事件、行为和空间的关系。在教学上应采取以学生为主体、复合交织的、过程探究式的及进阶往复式的教学方法,以进一步提高学生的综合设计能力。     

影响猪脂肪沉积主要候选基因的研究进展

QU Qiuhong;HUANG Ye;JIANG Qinyang;HUANG Yanna(College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530004, China)     

陆川猪Occludin基因克隆及生物信息学分析

本试验旨在获得陆川猪Occludin基因的编码区（CDS）序列,并对其进行生物信息学分析。根据GenBank中公布的猪Occludin基因序列（登录号：NM_001163647.2）设计1对特异性引物,采集健康陆川猪的回肠组织提取总RNA并反转录成cDNA,以cDNA作为模板进行RT-PCR扩增并获得目的基因片段,将其插入pMD18-T载体,筛选阳性克隆菌测序正确后并利用生物信息学软件对所获序列进行分析。结果表明,试验成功克隆获得陆川猪Occludin基因CDS,长度为1 569 bp,共编码522个氨基酸。序列比对结果显示,陆川猪Occludin基因与参考序列的同源性为99.7%,存在3个差异位点,其中第16 bp处C→T为错义突变,引起第6位的亮氨酸变成苯丙氨酸;第1 059 bp处A→G和第1 218 bp处C→T均为同义突变,该错义突变位点可能是陆川猪肠道屏障功能与其他猪种不同的原因。同源性比对结果显示,陆川猪Occludin基因与小鼠、牛、人、果蝇、猕猴和犬的同源性分别为83.8%、89.5%、88.1%、84.1%、88.3%和86.6%。系统进化树分析发现,陆川猪与牛的遗传距离最近,与犬的遗传距离最远。Occludin蛋白分子质量为59.13 ku,氨基酸组成中丝氨酸含量较高（9.2%）,在肽链N端为Met,Occludin蛋白在水溶液中280 nm消光系数为96 415,不稳定指数为62.85,属于不稳定蛋白。疏水性分析结果表明,Occludin蛋白是亲水性蛋白。陆川猪Occludin蛋白存在5个跨膜螺旋区,不存在信号肽,包含2个超家族结构域：MARVEL超家族结构域和Occludin-ELL超家族结构域。二级结构预测结果显示,陆川猪Occludin蛋白中α-螺旋、延伸链及无规则卷曲分别占41.00%、5.36%和53.64%,三级结构与二级结构相一致。本试验成功克隆了陆川猪Occludin基因CDS并进行了生物信息学分析,为深入探讨Occludin基因对地方猪种肠道屏障功能的影响提供参考。     

花文化发展及杜鹃红山茶的文化策划

花文化是花卉产业化发展的动力.通过不同语境下花文化发展特性及发展方式的研究,提出名花文化、乡草文化、花语文化、伦理文化4种类型及花文化发展的自发休闲方式和自主商业方式.以此为基础,结合产业化发展要求,提炼出中国特产野生花卉杜鹃红山茶的文化基因,并进行文化策划.     

发酵豆粕替代鱼粉在水产养殖业的应用北大核心

替代鱼粉的蛋白资源开发成为近年来水产养殖业营养研究的热点。其中,发酵豆粕以其较高的蛋白质含量、平衡的氨基酸组成并含有较低的抗营养因子等特点受到关注。综述发酵豆粕及其营养特点、发酵豆粕替代鱼粉在水产养殖业的应用及其使用存在的问题,为后续研究及生产实践提供参考。     

广东海洋大学园林专业教学体系改革探索

简要概述广东海洋大学园林专业的发展演变;在广泛调研和充分论证的基础上,分析原有园林专业教学体系中存在的主要问题;结合园林专业本科培养方案的修订,对园林专业本科教学体系的培养目标、培养模式、课程设置、教学方法、教学内容等方面进行系统地研究和探索,期望对规范我国有关农业院校园林专业的教学体系有所借鉴.     

陆川猪FTO基因的克隆及生物信息学分析

为了获得广西陆川猪肥胖相关基因(FTO)编码区序列(CDS),试验利用基因克隆技术,从陆川猪背最长肌组织中提取总RNA,扩增出FTO基因CDS,并运用Lasergene 7.0、ExPASy ProtParam、ExPASy ProtScale、NPS@在线蛋白分析系统和SWISS-MODEL在线分析预测系统等分析软件对扩增出的序列进行生物信息学分析。结果表明:通过克隆测序得到的陆川猪FTO基因CDS全长为1 518 bp,与GenBank中公布的乌金猪FTO基因CDS的同源性为99.9%,与苏钟猪FTO基因CDS的同源性为99.6%;陆川猪存在第1 050位点的C→G,碱基G为陆川猪所特有,导致天冬氨酸突变为谷氨酸;通过建立系统进化树发现,陆川猪与乌金猪的遗传距离最近,它们聚为一支;陆川猪FTO氨基酸组成中亮氨酸含量最高,占总氨基酸的比例为11.7%,FTO蛋白具有较强的亲水性;陆川猪FTO蛋白的二级、三级结构预测显示包含α-螺旋、无规则卷曲和延伸链。说明陆川猪FTO基因具有高度的保守性,今后在陆川猪脂肪沉积研究中, FTO基因可作为主要候选基因之一。