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本试验通过研究精卵作用时间、培养密度、气相环境对卵裂率和囊胚发育率的影响及早期发育快慢与胚胎发育能力的关系,得出:精卵共作用12 h和18 h,不影响囊胚率(P>0.05),但受精18 h的卵裂率明显高于受精12 h的卵裂率(P<0.05);对于四孔板而言,培养密度在50~80枚/孔之间,不影响胚胎后期发育率(P>0.05);早期用5%CO2,空气为平衡气,后期用5%CO2、5%O2,N2为平衡气的气相条件的卵裂率、囊胚率分别极显著高于单独使用这两种气相环境的囊胚率和卵裂率(P<0.01);早期发育较快的胚胎后期发育的能力更强(P<0.01)。 相似文献
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为了提高并稳定转基因胚胎移植受胎率,对可能影响受胎率的供受体同期化程度、移植胚胎数量、受体处理方式、胚胎发育速度、受体注射黄体酮、供体作受体等6个方面进行研究。结果表明,(1)供受体发情时间差在±12h以内,不影响受胎率(P>0.05);(2)每只受体移植2~3枚转基因胚胎的受胎率极显著高于移植1枚的受胎率(P<0.01);(3)在繁殖季节里,受体采用自然发情、肌肉注射PGF2α、肌肉注射PMSG+PGF2α等方式,三者受胎率间差异不显著(P>0.05);(4)发育迟缓的胚胎移植后,受胎率显著低于正常发育胚胎的受胎率(P<0.01);(5)移植后的受体注射2mg黄体酮,不能提高受胎率(P>0.05);(6)供体当作受体使用,不影响受胎率(P>0.05)。 相似文献
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1998年5月和9-10月,对奶山羊和土种山羊进行超排处理,以获得用于转基因注射的受精卵。发情的23只奶山羊中,共排卵377枚,回收卵310枚,回收率82.2%;平均每只排卵16.39枚,回收13.48枚。原核可见率为41.3%,发情的17只土种山羊中,共排卵229枚,回收191枚,回收率为83.4%,平均每只排卵13.47枚,回收11.24枚。 相似文献
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旨在研究羔羊、胎儿成纤维细胞、绵羊类胚胎干细胞及处理方式对核移植效率的影响。比较了羔羊皮肤成纤维细胞饥饿及消化后平衡时间对细胞可用率的影响;胎儿成纤维细胞饥饿及消化后平衡时间对细胞可用率的影响;羔羊成纤维细胞、胎儿成纤维细胞、类胚胎干细胞在可用率及对融合率的差异和类胚胎干细胞与转基因羔羊皮肤成纤维细胞对核移植效率的影响。结果表明,饥饿对胎儿成纤维细胞可用率影响不大(P>0.05),但平衡时间影响极大(P<0.01);饥饿及平衡时间对胎儿成纤维细胞影响都很显著(P<0.01);胎儿成纤维细胞的可用率极显著高于类胚胎干细胞和羔羊皮肤成纤维细胞(P<0.01),融合率显著高于羔羊(P<0.05),但与类胚胎干细胞间没有差异(P>0.05);胚胎移植后,类胚胎干细胞的怀孕率显著高于羔羊皮肤成纤维细胞(P<0.05)。饥饿和平衡时间对供核细胞的可用率有显著影响,类胚胎干细胞的核移植效果好于成纤维细胞。 相似文献
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移植方法和培养液对显微注射生产转基因小鼠的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了移植方法和培养液对显微注射法生产转基因小鼠的影响。结果表明 ,小鼠受精卵显微注射外源基因后 ,进行单、双侧输卵管移植 ,受体的妊娠率分别为 34.4 %和 37.5 % (P>0 .0 5 ) ,差异不显著 ;但仔鼠成活率分别为 83.6 %和 97.2 % (P<0 .0 5 ) ,差异显著。用 M2和改良的 M2培养液作为显微注射及移植工作液 ,体外培养的囊胚率分别为 17%和 35 % (P<0 .0 1) ,差异极显著 ,体内发育的情况也与这一结果相似 ,妊娠率分别为 35 .9%和 6 2 .5 % (P<0 .0 5 )。表明改良的 M2培养液的成分结构更适合小鼠胚胎发育的要求。 相似文献
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[目的]探讨冻精稀释液中添加类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对绵羊冷冻精液质量的影响,明确最佳的IGF-Ⅰ添加浓度,为提高绵羊冻精受精率和加速其品种改良奠定基础.[方法]以特克赛尔年轻种公羊的精液为试验材料,在冻精稀释液中添加不同浓度(0、50、100、150和250 ng/mL)的IGF-Ⅰ,通过SYBR-14/PI双染法、低渗肿胀试验和吖啶橙(AO)染色法检测解冻精液在孵育0、1和2h后的顶体完整性、质膜完整性和DNA完整性,并通过体外培养验证其体外受精效果.[结果]Ⅱ组(IGF-Ⅰ添加浓度100 ng/mL)的冷冻精液解冻孵育0、1和2h后,其精子顶体完整性呈逐渐下降趋势,但整体效果优于其他试验组;在精子质膜完整性和DNA完整性方面,也表现为Ⅱ组高于其他试验组,且孵育时间越短(1h内),效果差异越明显,均显著高于对照组(P<0.05).体外受精试验结果显示,5个试验组间的卵裂率和囊胚发育率均不存在显著差异(P>0.05),但以Ⅱ组的体外受精效果略优于其他试验组.[结论]绵羊冻精稀释液中添加IGF-Ⅰ可有效增强精子活力,改善冻精存活率,维持顶体、质膜和DNA完整性,但要求绵羊冷冻精液须在解冻后1h内完成相关操作. 相似文献
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DTT延缓绵羊卵母细胞老化的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
探讨在培养基中添加二流苏糖醇(DTT)能否延缓卵母细胞的老化进程。采用孤雌激活、单精子注射、体细胞核移植、Real-time-PCR方法研究了DTT对绵羊老化卵母细胞后续发育效率以及母源基因表达水平的影响。结果表明:DTT处理后的老化卵母细胞其核移植重构胚的受精率显著升高(P<0.05),囊胚率差异不显著(P>0.05);DTT显著增加了老化卵母细胞其单精子注射胚的囊胚率(P<0.05);DTT处理后的老化卵母细胞除Zar1水平稍低于老化卵母细胞外(P<0.05),其他3个母源基因(Mater、Dnmt1和GDF9)表达水平显著降低(P<0.05)。结果显示,DTT能在一定程度上延缓卵母细胞老化进程,改善老化卵母细胞的质量。 相似文献
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