聚肌胞微囊对NDV感染鸡α-干扰素及免疫活性的诱导效应

通过给NDV感染肉鸡口服聚肌胞(Poly I∶C)微囊,检测其体内α-干扰素(IFN-α)、特异性和非特异性免疫功能指标.结果表明: 口服型Poly I∶C微囊所呈现的治疗效果与其注射型相同,说明Poly I∶C微囊在内服吸收过程中,受消化道中核苷酸酶降解的程度并不显著;一定剂量范围内, Poly I∶C诱导产生IFN-α的能力与剂量成正比,但超过一定剂量范围(0.2 mg·kg-1)则可能产生抑制; Poly I∶C具有增强机体细胞免疫功能的能力,对体液免疫功能没有明显的调节作用.Poly I∶C微囊抗病毒作用和免疫调节作用可能是一方面通过诱导机体产生IFN-α而降低病毒对机体免疫系统的损害,另一方面则参与调节机体的细胞免疫.     

聚肌胞诱导鸡胚成纤维细胞和鸡胚及肉鸡抵抗新城疫病毒感染的研究

为探讨多聚核苷酸(聚肌胞)对新城疫病毒(NDV)的抑制作用,本研究通过聚肌胞对感染NDV的鸡胚成纤维细胞、SPF鸡胚和肉鸡进行了病毒抑制试验.结果显示:125和250 靏穖L-1的聚肌胞溶液能明显抑制100倍 TCID50的NDV在鸡胚成纤维细胞上的繁殖;5 mg·mL-1的聚肌胞溶液(每个胚0.1 mL)能明显抑制NDV在SPF鸡胚中的繁殖,减轻NDV对鸡胚生长的抑制作用,降低病毒血凝效价和鸡胚死亡数.聚肌胞对肉鸡抵抗NDV感染试验结果显示,肌肉注射0.01 mg·kg-1的聚肌胞注射液能明显提高治愈率和显效率.但反映细胞活性状态的中性红染色(D570值)随着聚肌胞浓度的增大而变小的结果说明,聚肌胞对鸡胚成纤维细胞的增殖有一定程度的抑制.     

四氯化碳致鸡肝脏和肾脏损伤实验动物模型的建立

给试验鸡人工灌服亲肝毒物四氯化碳（CCl4）,检测血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性的改变,观察肝脏和肾脏病理组织学变化,以建立肝脏和肾脏损伤的实验动物模型。试验结果显示,CCl4对鸡肝脏的损伤呈现出毒性累加效应,CCl4对鸡肝脏的损伤和致血清中转氨酶活性升高需要一定的作用时间和较高的攻毒剂量,而且随着投药剂量的增加,试验鸡血清中ALT的活性呈现出升高的趋势。试验鸡灌服CCl4后引起的肝细胞急性变性呈现出以典型的水泡变性为特征的病理变化。     

热休克蛋白研究进展

热休克蛋白是从原核生物到真核生物普遍存在的一种高度保守的蛋白质 ,热休克蛋白的研究已成为当今世界生命科学的热点和富有希望的研究领域之一。本文从热休克蛋白的基因调控和功能以及与疾病的关系方面作了详细叙述     

原位杂交法检测hsp mRNA在猪组织细胞中的分布

根据hsp70和hsp90 mRNA基因序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,利用体外转录系统,制作地高辛标记的RNA探针,建立检测hsps mRNA原位杂交方法。利用自建的原位杂交方法,对hsp70、hsp90 mRNA进行组织细胞定位研究。结果显示:hsp70 mRNA和hsp90 mRNA广泛分布于各组织细胞中,尤其在细胞核中相对集中,在肾小管上皮细胞胞浆中也呈强阳性着色。     

饲料中磺胺氯吡嗪钠含量的高效液相色谱检测方法的建立

为建立饲料中磺胺氯吡嗪钠的高效液相色谱检测方法,饲料经乙腈提取,旋转蒸发浓缩,2 mL甲醇+8 mL 0.05mol.L-1KH2PO4溶解,固相萃取净化,0.2μm有机相滤器过滤后,回收液经Agilent 1100液相色谱仪进行检测。检测条件:在C18色谱柱上,流速为1.000 mL.min-1,柱温25℃,紫外检测波长为272 nm,流动相为乙腈和0.2%磷酸混合液(体积比为35∶65)。试验结果显示:磺胺氯吡嗪钠的色谱峰保留时间为7.5 min;在添加0.5、1和2μg.mL-1条件下,回收率为90.6%～97.1%;检测限为0.5 mg.kg-1,定量限为1.0 mg.kg-1,线性范围为0.50～10.00μg.mL-1,回归方程为Y=57.332X+2.972 9(R2=0.999 3);4种饲料样本的相对标准偏差(RSD)为1.0%～2.9%。结论:本试验所建立的高效液相色谱检测方法灵敏度高、准确性和重现性好,可以对饲料中的磺胺氯吡嗪钠进行定量检测。     

HSP70及HSP70 mRNA在热应激肉鸡组织中的定位

利用间接法免疫组织化学技术和RNA探针原位杂交技术，研究了HSP70 及HSP70 mRNA在热应激6 h处理肉鸡心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏、胸腺和法氏囊等组织中的分布。结果显示，热应激6 h时HSP70 mRNA主要分布在肉鸡肝脏和肺脏中的血管壁及其周围，心肌纤维也有少量阳性信号，而脾脏、法氏囊和胸腺等组织未检出现阳性信号；热应激6 h时HSP70主要分布在所检肉鸡各种组织的血管壁。提示HSP70与热应激肉鸡心血管系统具有相关性，可能与心血管系统的功能和损伤有关。     

SYBR Green Ⅰ模式荧光RT-PCR鉴别新城疫病毒毒力

【方法】根据NDV的F蛋白裂解位点附近的序列，设计分别对应于NDV强毒和弱毒的两对引物，然后用SYBR Green Ⅰ模式的荧光RT-PCR方法比较两对引物对同一NDV的RNA扩增效率以及扩增产物的Tm值，来区分NDV的毒力。【结果】对8株NDV进行检测并测定其鸡胚平均致死时间（MDT），荧光RT-PCR方法的检测结果和MDT测定的结果完全一致，说明此荧光RT-PCR法可用于NDV毒力检测。     

运输应激猪组织病理性损伤、HSP_(27)的组织分布及其相关性研究

利用组织学、免疫组织化学以及临床血液检测等方法,探讨持续运输应激对育肥出栏猪组织的病理性损伤以及组织损伤与HSP27组织定位之间的相关性。结果表明:运输应激初期(1～2h),反映组织损伤的血液肌酸激酶(CK)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性都显著升高;应激4h时,CK及AST活性有所下降;当应激持续到6h和10h时,CK活性又显著升高。组织病理损伤也呈现出相似的波动变化。免疫组织化学结果显示,随着应激时间的延长,HSP27在组织中的定位没有发生肉眼可见的变化;HSP27主要分布在心肌和肝细胞胞浆中,在背最长肌的细胞浆和细胞核中均呈强阳性表达,在肺脏细支气管的黏膜下层有强阳性表达,在受检组织的血管壁及内皮细胞中也有强阳性表达。     

抗朊蛋白单抗用于牛海绵状脑病检测和细胞型朊蛋白在中枢神经组织中的定位和分布

朊病毒病（又称传染性海绵状脑病）的病原是致病型朊蛋（PrP^Sc），聚集在牛脑中能够引发牛海绵状脑病（BSE）。利用自制的单抗4C11和国外同类单抗进行免疫组织化学（IHC）的比较染色，结果显示单抗4C11和国际上常用的单抗在BSE阳性切片的IHC染色结果上没有显著差异；利用单抗4C11结合IHC方法检测中国山东省150例牛脑样品的实验表明，所有送检样品中IHC的检测结果均为阴性，而且IHC方法比较适合于我国BSE的检测；对中枢神经组织内细胞型PrP^c的IHC定位结果显示，PrP^c在牛脑组织不同部位的分布有差异。