马立克氏病疫苗胚胎免疫鸡红细胞免疫功能的研究

作者检测了胚胎免疫鸡（孵化至18日龄时鸡胚接种马立克氏病二价疫苗）及其相应1日龄免疫鸡和未免疫鸡的红细胞CR1花环率和红细胞IC花环率以观察其外周血液红细胞免疫功能。结果表明,随着试验鸡日龄的增长,其外周血液中红细胞CR1活性呈现一定的递减性变化,但胚胎免疫鸡红细胞CR1活性的降低幅度远低于其它两组鸡。胚免鸡出壳后7日龄进行vMDV攻毒,结果也显示胚胎免疫可显著阻止红细胞免疫功能的下降。此外,胚免组鸡血清中红细胞免疫粘附抑制因子活性下降（IC形成减少）,使得红细胞免疫功能得以更好的发挥。     

表达传染性法氏囊病毒超强毒流行株VP2基因重组新城疫病毒LaSota疫苗株的构建

 【目的】重组新城疫病毒（newcastle disease virus,NDV）作为新型的活病毒载体疫苗具有巨大的优势和应用前景,本研究旨在探讨新城疫病毒作为防制传染性法氏囊病超强毒（very virulent infectious bursal disease virus,vvIBDV）及新城疫重组二联活病毒载体疫苗的可行性。【方法】采用单股负链RNA病毒反向遗传操作技术,救获野生型NDV LaSota疫苗株rLaSota及表达vvIBDV Gx株VP2基因的重组疫苗株rLaSota-VP2,分别经滴鼻点眼途径免疫SPF雏鸡,免疫后21 d分别以vvIBDV Gx超强毒和新城疫强毒进行攻击。【结果】rLaSota及表达vvIBDV－VP2基因平均鸡胚致死时间均大于120 h,脑内致病指数（ICPI）分别为0.4和0.36,静脉内致病指数（IVPI）均为0;接种后72～96 h每毫升尿囊液EID50则分别达到109.0以上。rLaSota-VP2以106.0 EID50一次免疫7日龄SPF鸡雏,免疫后3周对新城疫强毒致死攻击100％保护,对vvIBDV攻击免疫保护率达90％以上。 【结论】重组病毒rLaSota-VP2保持了LaSota亲本疫苗株高滴度的鸡胚生长特性和低致病性及遗传稳定性,免疫雏鸡对新城疫强毒和传染性法氏囊病毒超强毒株的致死均形成有效免疫保护。本研究为研制传染性法氏囊病－新城疫重组二联活载体疫苗奠定了基础。     

替米考星肠溶颗粒对猪的安全性试验

为了客观评价替米考星肠溶颗粒临床应用于猪的安全性,选取40头25日龄健康三元杂交猪,随机将其分成4组,每组10头,分别以1倍、3倍、5倍推荐剂量的替米考星肠溶颗粒拌料给药45 d,试验期内对受试猪进行血常规、血凝、血生化、尿常规、增重、料重比、脏器系数等指标的测定及病理学检查。结果显示,替米考星肠溶颗粒对受试猪的血液学指标、尿液指标、主要生产性能等方面未造成明显影响,说明替米考星肠溶颗粒以5倍推荐剂量(2000 g/1000 kg)临床应用于猪是安全的。     

IBDV不同分离株VP2高变区的基因序列分析

对9个IBDV(传染性法氏囊病毒)分离株的、VP2高变区进行RT-PCR扩增、测序，得到约560bp长的片段分析比较9个IBDV分离株与参考毒株的VP2高变区（Aeel-Spell)的氨基酸序列，并构建进化树、结果表明，9个IBDV分离株是超强毒株，并且得出亚洲目前流行的、rvIBDVs与欧洲国家的vvIBDVs的进化关系很近。     

鸡IgMμ链在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达及其反应原性的测定

IgM是机体初次体液免疫应答中最早出现的免疫球蛋白,其在血清中的含量会在首次接触抗原的几天内达到高峰,然后通过免疫球蛋白类转换作用转变为IgG而使其含量     

荧光定量RT-PCR法检测运输应激猪热休克蛋白mRNA转录水平

 【目的】探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化。【方法】根据HSP90、HSP70和GAPDH mRNA序列，设计并合成引物，将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体，重组质粒经筛选、鉴定，体外转录出RNA，梯度稀释作为阳性模板，用于标准曲线的制定和样品检测，建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台，并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90 mRNA转录水平的改变。【结果】经1、2、4、6和10 h的运输应激后，组织中HSP70 mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势，运输应激到10 h时HSP70 mRNA的转录水平升到最高，肝脏和心脏组织中HSP70 mRNA的转录水平分别为对照组的2.5和4.1倍；HSP90 mRNA的转录水平则随着运输应激时间的延长呈下降趋势。【结论】运输应激可以影响HSP mRNA转录水平的变化，并且对不同家族的HSP mRNA转录水平的影响不同；HSP70 mRNA的转录水平有望成为猪运输应激的判定指标之一。     

兽用聚肌胞注射液质量检验标准检测方法的建立

为了建立兽用聚肌胞注射液的检测方法和质量检验标准,本试验采用荧光增强试验、紫外特征吸收光谱试验和磷测定法、沉降系数检查法对兽用聚肌胞注射液进行了鉴别。结果显示,荧光增强试验和紫外特征吸收光谱试验可以满足对聚肌胞注射液的鉴别检测;含量测定表明,聚肌胞消化液取样量在0.4～1.5mL之间线性良好,聚肌胞注射液的含量为97.8%(重复性试验RSD=2.3%),平均回收率为100.81(RSD=2.02%);聚肌胞注射液沉降系数>4S,经方法学验证系统检测限为20μg,重复性试验表明准确度良好。     

鸡胚胸腺的组织发育

连续观察孵化至１４～２１日龄的鸡胚胸腺,详细描述了早日龄鸡胚胸腺的组织学分化发育过程。结果显示,胸腺完整组织结构的形成约在１８日龄。２１日龄出现的非炎性异嗜性细胞在胸腺组织分化发育过程中所起的作用值得注意。     

马立克氏病病毒gB与IL-2融合基因载体的构建及表达

根据已发表的马立克氏病病毒(MDV)血清Ⅰ型与鸡白介素2(IL-2)DNA序列,设计两对引物,用PCR扩增出MDV gB基因和IL-2基因,并克隆入pEGFP-C1载体,构建了载体pC1-gB—IL。通过酶切分离外源基因表达盒,并将外源基因表达盒插入pTK2B质粒,成功构建了转移载体pT-C—gB-IL。将转移载体pT-C-gB-IL转染CEF细胞,培养36—48h后,经荧光显微镜观察,有荧光出现,证明该载体得到表达,并通过Western—blotting鉴定证明MDV gB和IL-2的融合基因得到了有效的表达。     

硒—维生素E结合体对雏鸡自然杀伤（NK）细胞活性和T淋巴细胞转化率的影响

１５０羽雏鸡随机分为５组,Ⅰ－Ⅲ组于７日龄（ＮＤ首次免疫前３天）分别在饲料中添加硒－ＶＥ结合体２５,１５,５ｍｇ／ｋｇ,Ⅳ组添加ＶＥ１５ｍｇ／ｋｇ,Ⅳ组为空白对照,观察了硒－ＶＥ结合体对雏鸡血液ＮＫ细胞活性和脾脏Ｔ淋巴细胞转化率的动态变化。结果显示,硒,ＶＥ的适度配合使用具有雷同作用,能明显提高ＮＫ细胞活性和Ｔ淋巴细胞转化率,但在一定范围内,其效果受使用剂量的显著影响停止投服硒－ＶＥ结合体后,ＮＫ