禽腺病毒流行株FAdV-4-AH-F41的分子特征及对细胞因子的诱导作用

【目的】分析1株血清4型禽腺病毒（FAdV-4）流行株的分子特征及其感染对细胞因子的影响。【方法】采集安徽省某禽类养殖场疑似心包积水 肝炎综合症的鸡肝脏组织样本,用鸡肝癌细胞（LMH）对病原进行分离,采用PCR、透射电镜（TEM）观察和间接免疫荧光试验（IFA）对分离的毒株进行鉴定。采用分段扩增后拼接的方法克隆分离毒株的全基因组,对其进行遗传进化分析和序列重组分析。基于柯赫法则,用分离毒株接种无特定病原体（SPF）鸡,检验其致病性。采用实时荧光定量PCR法,检测分离毒株对LMH细胞天然免疫相关细胞因子环鸟苷酸-腺苷酸（cGAS）、干扰素刺激因子（STING）、白介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-8、干扰素-α（IFN-α）、IFN-β、干扰素调节因子7（IRF7）、线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）、主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ-α、MHCⅡ-β等11种细胞因子的诱导作用。【结果】分离鉴定到1株FAdV,其在LMH细胞中培养未出现明显细胞病变效应;病毒粒子直径为70~90 nm,符合FAdV-4的结构特征;免疫荧光试验结果显示,在接种分离毒株的LMH细胞内可观察到亮红色荧光,而对照细胞没有荧光;将该毒株命名为FAdV-4-AH-F41。采用分段扩增后拼接的策略获得了FAdV-4-AH-F41全基因组序列（43 708 bp）;遗传进化分析和序列重组分析发现,FAdV-4-AH-F41与FAdV-4株核苷酸相似性为99.6%;存在3个重组事件,第1个重组事件发生在30 453-30 674 bp,第2个发生在36 884-36 988 bp,第3个发生在43 401-43 715 bp。致病性试验显示,FAdV-4-AH-F41是导致鸡心包积水-肝炎综合症的病原。实时荧光定量PCR检测结果显示,与对照（DMEM/F12处理）相比,用FAdV-4-AH-F41处理后LMH细胞中11种免疫因子的表达量水平均有提升,其中cGAS、IL-6、IRF7、MHCⅡ β差异达极显著水平（P<0.01）,IL-1β、IFN-α、MAVS差异达显著水平（P<0.05）,STING、IL-8、IFN-β、MHCⅠ-α差异不显著。【结论】成功分离1株重组血清4型禽腺病毒,感染LMH细胞会诱导强烈的天然免疫反应。     

小麦类菌原体兰矮病研究简报

 小麦类菌原体兰矮病(Wheat Mycoplasna like-oaganism Blue Dwarf-WMBD)是北方麦麦区的一种主要病害,特别是在间套麦田和麦草覆盖保墒的旱农栽培麦区发生严重,其是我国在小麦上新近发现的第一个类菌原体病害。     

提高兽药门市经济效益的思路与措施

<正>我国目前有很多兽药生产厂家,大的、小的、真的、假的、创新型的、守旧型的、正在发展的、逐渐萎缩的,林林总总,鱼目混珠,参差不齐。兽药门市更多,每个省、每个市、每个乡镇、每个村落都有,而且很多村镇不止1家,竞争非常激烈,拼杀残酷。养殖者更多的是在感叹:猪越来越难养,疾病越来越多和复杂,盈利越来越难!屠宰场的人在思考为什么有人给猪喂水泥,屠宰     

鸡新城疫免疫监测盒应用效果观察

通常用规程法测定鸡新城疫HI值,需要制备血球液和实验室操作,不利现地推广。1989年来,我们在哈尔滨、大庆、佳木斯等地的5个鸡场采用辽宁兽研所研制的鸡新城疫免疫监测盒对14万只蛋鸡进行了应用试验,取得较满意效果。     

猪肺脏病变的剖检诊断

<正>现阶段,我国基层兽医的诊断条件极其有限,在无实验室诊断条件或实验室诊断费时较长的情况下,对猪肺部病变的剖检可为以呼吸道症状和肺部病损为特征的猪传染病的诊断提供支持。1几种常见猪病的肺部病变特征(1)猪传染性胸膜肺炎。急性病例呈现大叶性肺炎的病变特征,病灶大多分布在尖叶、心叶及膈叶的     

雏鹅暴发曲霉菌病的诊断

我市富拉尔基区某运输公司农场饲养的600只25日龄雏鹅,突然发生以呼吸困难为主的一种疾病。发病数为150只,死亡68只。根据流行病学、临诊症状、剖检变化及实验室检验,诊断为雏鹅曲霉菌病。并通过药敏试验,筛选出最佳的治疗药物和消毒药物,经药物治疗和环境消毒控制了病情,     

山羊同期发情技术的应用

放置含有0.3g孕酮的阴道栓（CIRD）配合肌肉注射PMSG，对布尔母山羊进行同期发情处理，取栓后36－55h内的同期发情率为100％，第一情期受胎率为53.85%，3个情期受胎率为100％，平均产羔率为254.54%。采用阴道栓配合FSH进行超排处理的布尔山羊供体，48h的同期发情94.5%。放置阴道栓或肌注PG处理的关中奶山羊受体48h内同期发情率为83.94%。     

无非洲猪瘟小区的创建与示范

自非洲猪瘟传入我国以来,给我国养猪业造成沉重打击.当前形势下,针对非洲猪瘟疫情特点创建无疫小区对其有效控制意义重大.山东曹县牧原农牧有限公司成功创建非洲猪瘟无疫小区,并以此为示范,将技术成果先后在山东省菏泽市、潍坊市、滨州市3个地区的5家猪场推广应用,取得了较好的社会效益和经济效益.本文从无疫小区组成单位规范化管控、生...     

白头翁散治疗犊牛慢性腹泻

犊牛慢性腹泻是犊牛较为常见的胃肠道疾病之一,以久泻不止为主要特征,对犊牛的健康和正常生长发育造成很大影响。笔者近几年在兽医临床实践中用白头翁散治疗犊牛慢性腹泻2 5例,治愈2 2例,疗效满意,现报告如下。1　病因犊牛( 2 0～1 2 0日龄)消化系统未发育完善,因饲喂不当,发生     

匍匐翦股颖HSP26.7基因启动子的表达分析

为研究匍匐翦股颖HSP26.7基因启动子在植物抗逆方面的功能,克隆了匍匐翦股颖的一个小热激蛋白HSP26.7基因的启动子并进行了序列分析;构建了同时具有该启动子序列和GUS报告基因的植物表达载体,并通过农杆菌侵染法转化拟南芥植株.结果显示:该启动子存在HSE,ABRE等响应高温和其他胁迫的调控元件,受高温胁迫强烈诱导,...