不同诱导剂对山羊精子体外获能和受精能力的影响

比较不同获能诱导剂对山羊精子体外获能及受精能力的影响,优化山羊早期胚胎体外生产技术体系。山羊精子分别以不同浓度肝素、IA和EGS处理后,检查精子获能率、活力和体外存活时间,同时与体外成熟的卵母细胞受精,观察不同获能处理对精子受精能力的影响。在培养液中添加5,10,20μg／mL肝素,都能促进精子获能,其中10μg／mL组的获能率达到55．6％,存活时间为18～19h;低于此浓度,获能率显著降低,高于此浓度,获能率升高不显著,但精子存活时间和活力明显下降。0．1,0．4,0．7μmol／LIA都能提高精子获能率,其中0．4和0．7μmol／L处理组精子获能率最高,分别为56．2％和53．6％,但两组中的精子活力和存活时间有明显差异。5％,10％和20％EGS都能提高精子活力,延长体外存活时间,但实验组的获能率最高不到20％。10％EGS获能组的受精率和卵裂率分别为27．9％和18．6％,显著低于10μg／mL肝素和0．4μmol／L IA组,后两者的受精率相似,但IA组的卵裂率明显高于肝素组（52．0％VS40．2％,P〈0．05）。10μg／mL肝素和0．4μmol／L IA都可诱导山羊精子高水平获能,并获得较好的受精能力,但IA表现出更强的促卵裂发生效应。     

应用微卫星PCR对中国3个品系实验用小型猪的遗传检测

以 12个 STR(shord tandem repeat)座位的 PCR对中国 3个品系实验用小型猪进行了遗传检测。结果 ,3个座位品系间扩增结果相同 ;9个座位呈现品系间多态性 ,其中 2个座位在 3个品系间均具有差异。贵州小型香猪与西双版纳近交系小耳猪间有 6个座位有差异 ,其遗传距离为 0 .186 4;贵州小型香猪与广西巴马小型猪间有 3个座位有差异 ,其遗传距离为 0 .12 73;广西巴马小型猪与西双版纳近交系小耳猪间有 5个座位有差异 ,其遗传距离为 0 .1333。由此表明 ,3个品系小型猪间的遗传背景具有一定差异 ,同时表明这 9个座位可选择为小型猪遗传检测的多态性座位。     

表皮生长因子、巯基乙醇和亚硫磺酸对山羊体外胚胎生产的影响研究

采用抽吸法收集卵巢上的卵丘 -卵母细胞复合体 (COCs) ,微滴培养法于不同成熟培养液 (n =8)中培养 2 4～ 2 7小时后体外受精 ,然后移入不同胚胎培养液 (n =7)中培养 7天。应用胞核染色、胚胎移植等技术判定并统计成熟率、卵裂率和胚胎发育潜能。结果 :含 5 0ng/mlEGF(表皮生长因子 )组COCs成熟率 (75 4 5 %～ 75 8%)和卵裂率 (72 4 %～ 74.1%)均显著高于其它组 ,含 0 5mmol/LHTAU(亚硫磺酸 )组和或 10 0 μmol/LCYS(β -巯基乙醇 )成熟液组的≥ 8细胞率 (3 2 3 %～ 3 9 0 %)和桑胚率 (2 8 4 %～ 3 3 .8%)均显著高于其它组 (P <0 0 5 )。两只试管羊健康出生。结论 :EGF对COCs体外成熟和卵裂发育具有明显的促进作用 ;CYS对COCs体外成熟和受精卵裂无明显正作用 ,但成熟液含适量CYS有助于改善胚胎的体外发育 ,过量可能对细胞有毒 ;HTAU有益于早期胚胎的体外发育。成熟液中EGF和CYS的优选浓度分别为 5 0ng/ml和 10 0 μmol/L ;胚胎培养液中HTAU的优选浓度为 0 5mmol/L。优化体系所得胚胎具有正常的发育潜能。     

乌羊种质资源调查报告

乌羊是主要分布在酉阳土家族苗族自治县和附近的区县的一个具有浓郁地方特色的山羊品种,目前存栏2 000余只,有独特的外貌特征.文章采用典型调查、具体测定和资料分析相结合的方法,研究羊只生长发育和生产性能.结果表明乌羊公母初生重分别为1.83 kg±0.28 kg和1.59 kg±0.34 kg,周岁重为20.75 kg±2.89 kg和18.50 kg±3.54 kg,成年重为31.10 kg±5.28 kg和 27.78 kg±5.63 kg;乌羊性成熟较早,发情周期20.00 d±1.73 d,发情持续期38.27 h±13.71 h,妊娠期平均150.19 d±1.60 d,初产羊产羔率为116.67%,经产羊为177.78%.周岁乌羊射精量0.30 ml±0.17 ml,活力0.66±0.17,精子密度31.33亿/ml±29.33亿/ml,顶体完整率89.45%±6.42%,精子畸形率3.93%±3.43%;成年乌羊分别为0.64 ml±0.26 ml、0.67±0.18、21.35亿/ml±7.00亿/ml、92.76%±4.41%、4.06%±2.31%.公羊宰前活重为32.33 kg±2.52 kg,胴体重为16.67 kg±1.15 kg,屠宰率为51.59%±16.72%;成年母羊分别为27.67 kg±2.52 kg、13.33 kg±2.08 kg和48.08%±4.94%.文章还提出了在保种时应同开发利用相结合的建议.     

猪精液冷冻保存研究进展

根据国内外的研究进展,本文简要阐述了猪精液冷冻保存的机理和操作方法,对影响猪冷冻精液质量的因素进行了分析,同时指出了目前在猪精液冷冻保存技术的理论和实践中存在的问题,并提出了该技术中需要解决的问题和展望。     

贵州黑山羊遗传结构的RAPD分析

用27条多态性引物对15份贵州黑山羊个体基因组进行RAPD分析结果共扩增出258条带,其中多态带为119条,多态频率在0-77．78％之间,平均多态频率为46．12％．单个引物获得的扩增带数在4-14条之间,平均每条引物扩增出9．56条带、扩增带分子量范围为230bp-2800bp、用Nei氏公式计算品种内个体间的遗传相似性指数平均为0．9023结果表明：贵州黑山羊个体间的遗传变异较大,具有较丰富的遗传结构。     

巴马香猪精液冷冻过程中精子内抗氧化酶活性与精子质膜完整性关系研究

猪精液冷冻过程中,精子质膜往往因受到活性氧(ROS)的氧化而发生损伤,精子品质也随之下降.精子 ROS水平受抗氧化酶活性的影响,然而冷冻过程中精子细胞内抗氧化酶活性变化与细胞膜完整性的关系还缺乏报 道.该试验将巴马香猪精液冷冻保存降温过程中的精子分为4种状态,即鲜精、15 ℃精液、5 ℃精液和冷冻解冻 后精液,检测了各种状态下精子的运动参数、质膜完整性(PMI)和顶体完整性(AI),分析了超氧化物歧化酶(SOD) 活性、谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)活性和ROS(丙二醛MDA)水平.结果表明:15 ℃精子各项指标和鲜精无显著 差异(p>0.05);5℃精子运动能力、质膜完整性和抗氧化酶活性低于鲜精(p<0.05),而精子细胞内MDA 水平与 鲜精无显著差异(p>0.05);冷冻解冻后精子的运动能力、质膜完整性和抗氧化酶活性均低于其他各组(p< 0.05),精子MDA水平显著高于其他各组(p<0.05).同时,SOD和Gpx活性与精子PMI和AI之间的相关性均达 到了显著水平(p<0.05).可见,当精子降温至15℃以下直至冷冻时,SOD和GPX活性逐渐降低,精子细胞清除 ROS的能力随之下降,精子质膜脂质过氧化反应增强,质膜受损,内容物外渗是精液品质降低的重要原因.     

巴马香猪类固醇激素急性调节蛋白(StAR)基因真核表达载体的构建及鉴定

本试验通过RT-PCR扩增巴马香猪StAR基因,分析其序列的结构特点并构建真核表达载体,为StAR基因在猪睾丸间质细胞中的超量表达研究奠定基础.根据NCBI中猪StAR基因序列设计并合成引物,以巴马香猪睾丸组织总RNA为模板进行RT-PCR,将所得目的基因与pEGFP-C1进行双酶切后连接构建真核表达载体pEGFP-C1-StAR.结果显示,连接到pSURE-T克隆载体上的目的片段测序结果为858碱基组成,编码含有285个氨基酸残基的蛋白质,与NCBI报道的StAR基因比对,核酸同源性在99.3％以上,并成功构建了重组载体pEGFP-C1-StAR.     

应用HRP—SPA间接免疫酶染色观察实验性牛弓形体病主要脏器中虫体的分布

自从1966年Avrameas创建免疫酶技术检测体液中的可溶性抗原和抗体成分以来,免疫酶技术被广泛应用。1976年Voller首先应用ELISA检测弓形体抗体,此后,林继煌等应用酶标抗体直接染色法检查猪和兔