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101.
为对禽流感病毒(AIV)M1蛋白表(拟)位进行分析,本研究采用针对AIV M1蛋白的型特异性单克隆抗体(MAb),淘选M13噬菌体展示的7肽随机肽库,进行M1蛋白表(拟)位分析。筛选获得共有序列MDRxL或HPR,定位于M1蛋白93~99位(93MDRAVKL99)和222~230位(222HPNSSAGLR230)氨基酸区域。采用ELISA、竞争性ELISA分析不同噬菌体拟位与抗M1的MAb免疫反应性,表明含有MDRxL或HPR基序的噬菌体拟位能够与MAb发生特异性结合,并且其结合能够被天然病毒抗原抑制或阻断,表明拟位多肽真实模拟病毒蛋白上与MAb结合的抗原决定簇或表位,提示M1蛋白93~99位(93MDRAVKL99)和222~230位(222HPNSSAGLR230)氨基酸区域构成AIV型特异性表位。 相似文献
102.
研究旨在表达流行性出血病病毒(EHDV) VP7蛋白并制备其多克隆抗体,为EHDV检测方法的建立提供材料。试验通过大肠杆菌进行VP7重组蛋白的诱导表达,通过镍离子亲和层析与透析进行重组蛋白的纯化与复性并免疫家兔制备多克隆抗体,通过间接ELISA、Western blotting与间接免疫荧光试验(IFA)分析多克隆抗体的效价与反应原性。结果显示,在37℃与IPTG (0.1 mmol/L)的诱导下,VP7重组蛋白(分子质量46 ku)以包涵体形式高效表达,纯化与复性处理后的重组蛋白纯度达94.52%,可与不同血清型的EHDV阳性血清特异性结合。制备的兔抗VP7蛋白多克隆抗体效价达1∶24 000;以制备的多克隆抗体为一抗,通过IFA与Western blotting检测到EHDV感染细胞中VP7蛋白的表达。本研究在大肠杆菌中实现了EHDV VP7蛋白的高效表达,制备的兔抗VP7蛋白多克隆抗体具有良好的反应原性与特异性,为EHDV诊断抗原的制备与血清学检测方法的建立提供了试验材料。 相似文献
103.
104.
从我省滇中地区11个县区所送检的66份可疑猪大肠杆菌病病料中分离到35株致病菌株。采用24种主要引起致病性大肠杆菌因子血清作平板凝集试验后鉴定出29株,其中O107 19株(1株含K88抗原)、O149 9株(4株含K88抗原)、O2 1株,占所分离致病菌株数百分比分别为54.0%(19/35)、25.7%(9/35)、2.9%(1/35)。从中挑战出含K88抗原菌株O107:K88、O149:K88与标准菌株K88、K99、F41、987P混合制备多价油苗,在以上分离地区应用1万头份,效果显著,平均保护率达70%以上,且免疫后猪只无不良反应。 相似文献
105.
断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)是一个新出现的疾病,该病主要由圆环病毒科的猪PCV2病毒引起,发病日龄为25~120d,其中60~80日龄发病率最高。PMWS的最终确诊需满足以下三个条件:(1)存在PMWS相关临床症状;(2)出现特征性的显微病理损伤;(3)在满足以上两个条件时有圆环病毒2型(PCV2)存在。这三个标准对PMWS的诊断缺一不可,如仅仅检测到PCV2只表明存在PCV2感染而不能确定为PMWS。 相似文献
106.
107.
抗原捕获ELISA对猪瘟的诊断效果 总被引:4,自引:0,他引:4
应用抗原捕获ELISA方法分别对现行猪瘟疫苗毒及接种疫苗后产生定型热的兔脾、不同地区可疑猪瘟组织样品进行检测。结果表明,ELISA方法对猪瘟强毒组织样品的检测效果良好,但对弱毒的检测并不敏感,因而可用于野毒感染鉴别。 相似文献
108.
109.
110.
猪瘟病毒云南毒株E2基因片段序列测定及分析 总被引:9,自引:0,他引:9
用RT-nPCR方法,选择猪瘟病毒2000年云南部分地方流行毒株E2基因主要保护性抗原决定簇编码区片段进行扩增和cDNA序列分析,并与中国标准强毒石门株进行比较。结果显示,云南地方毒株之间核苷酸及氨基酸序列同源性均大于90%;但与中国标准强毒石门株差异较大,其核苷酸及氨基酸同源性均小于80%。 相似文献