尼罗罗非鱼p38MAPK基因克隆与表达分析

为了探究p38MAPK与尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)免疫功能的相关性,本实验运用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)获得尼罗罗非鱼埃及品系ntp38MAPK的cDNA全长序列,结果显示,该序列全长1789 bp,开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)长1086 bp,5′非编码区(Untranslated Region,UTR)长342 bp,3′UTR为361 bp。ORF编码361个氨基酸,预测分子量为41.598 kD,理论等电点为5.10。序列含有p38家族典型保守的Thr-Gly-Tyr(TGY)双磷酸化位点以及紧密相连的底物结合位点Ala-Thr-Arg-Trp(ATRW)。同源性以及系统进化树分析结果显示,尼罗罗非鱼的p38MAPK与大黄鱼(Larimichthys crocea)和鲈(Dicentrarchus labrax)的相似性最高。采用qRT-PCR的方法研究了ntp38MAPK在各组织以及无乳链球菌感染过程中的表达差异情况,结果显示,ntp38MAPK在各组织均有表达,其中在肌肉的表达量最高,心脏、肝脏、脾脏次之,头肾中的表达量最低。无乳链球菌感染过程中,脾脏、头肾中ntp38MAPK的表达量在2 h开始上调,肝脏中4 h开始上调,8 h后肝脏、脾脏和头肾中的表达量都有所下降,24~72 h趋于平稳,表明ntp38MAPK在尼罗罗非鱼抵抗链球菌侵染过程中发挥重要作用。     

过量表达OsRRK1对水稻叶片发育的影响

[目的]OsRRK1(rop-interacting receptor-like kinase 1)属于胞质类受体激酶RLCK VI家族成员,通过对OE-OsRRK1转基因水稻的叶片形态观察,明确OsRRK1在水稻叶片发育中的作用.[方法]依据水稻基因组数据库公布的目标序列设计引物并构建OsRRK1超量表达载体,利用农...     

水稻抗性蛋白OsRRK1抗褐飞虱机理分析

目的 OsRRK1（Rop-interacting receptor-like kinase 1）蛋白是水稻中第一个被研究的类胞质受体激酶RLCKⅥ家族蛋白。在调控水稻叶片的卷曲和对褐飞虱的防御中都起着重要作用,但是其调控机理尚不清楚。本研究试图进一步探究OsRRK1基因抗褐飞虱的机理。方法 利用酵母双杂交的方法分析OsRRK1蛋白与OsLecRK（lectin-like receptor kinase）、OsLecRK1、OsLecRK2、OsLecRK3的互作关系,OsLecRK是抗褐飞虱基因BPH15区间的候选基因,是水稻先天免疫系统中一个重要成员,既参与水稻先天免疫反应,包括对褐飞虱、白叶枯病和稻瘟病的抗性,又参与水稻的发育过程。OsLecRK1、OsLecRK2、OsLecRK3的基因簇组成抗褐飞虱基因BPH3,含BPH3基因的水稻具有广谱、持久的抗虫性。同时利用DNAMAN软件分析OsLecRK蛋白与OsLecRK1、OsLecRK2、OsLecRK3的同源性。结果 DNAMAN的分析结果显示OsLecRK与OsLecRK1、OsLecRK2、OsLecRK3的同源性都很高,蛋白一致性在50%以上;酵母双杂交结果显示OsRRK1与OsLecRK、OsLecRK2和OsLecRK3互作。结论 OsRRK1通过与抗褐飞虱基因BPH15和BPH3候选基因的相互作用参与水稻抗褐飞虱过程。     

双草醚防除直播稻田杂草研究进展

双草醚(bispyribac-sodium)作为一种广谱选择性化学除草剂,近年被应用于直播稻田除草,其除草效果和对水稻的安全性日渐受到人们的关注。本文主要从双草醚作用原理、使用条件与防除杂草效果、应用安全性等方面进行了综合阐述,以期为双草醚的应用提供科学参考。     

黑青稞花青素提取工艺优化及抗氧化活性分析

以青海玉树产黑青稞为原料,研究了提取剂类型、酸化剂类型、提取剂浓度、提取时间、提取温度等单因素对黑青稞花青素提取率的影响,在此基础上,采用三因素三水平正交试验法优化了花青素提取工艺,并分析了黑青稞花青素的抗氧化活性。试验结果表明,对黑青稞花青素提取率影响最大的是乙醇浓度,其次是提取温度和提取时间,最佳提取工艺为:60%乙醇、提取温度为60℃、提取时间为3.0h,在此条件下,花青素提取率为1.86ug/g;黑青稞花青素质量浓度与羟自由基清除率呈一定量效关系。试验结果可为综合开发利用黑青稞资源,延长黑青稞加工产业链提供一定参考依据。     

菌肥的功能、应用及制备技术

菌肥是肥料制品中的一种,是现代农业生产实践中重要的辅助材料.菌肥具有保持土壤肥力、促进农作物营养吸收、减少病虫害和提升作物品质等作用.菌肥作为一种新型肥料,在农业生产中的应用越来越广泛,已经成为农业生产中的主要肥料之一.本研究综述了菌肥的定义,菌肥的功能,菌肥的应用及制备技术,并对菌肥未来的发展进行了展望.     

蒺藜苜蓿GPAT基因家族的全基因组鉴定、序列变异和表达分析

甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate?acyltransferase,?GPAT)是三酰甘油(triacylglycerol,?TAG)生物合成的限速酶,催化TAG生物合成的起始步骤,为多种脂质合成提供了底物,会直接参与到植物的生长发育和抗逆过程.蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)作为豆科模式植物具有基因组小、生长周期短、遗传转化效率高等特点.为了解GPAT基因在苜蓿抗逆尤其是在耐盐中的作用,本研究选择蒺藜苜蓿基因组为研究对象,采用Blastp和Hmm结构域搜索方法,共鉴定出24个mtGPAT基因.根据系统进化、基因结构和结构域差异将其分成3个亚家族.同时染色体定位分析发现,24个mtGPAT基因不均匀分布在7条苜蓿染色体上,每条染色体上分布有2～5个基因.基因表达谱分析表明:蒺藜苜蓿GPAT基因具有器官特异性,并且会参与盐胁迫反应.这些结果可为进一步深入研究蒺藜苜蓿GPAT家族基因的功能提供理论基础.     

水稻白叶枯病抗性基因Xa23的分子标记优化及应用

结合生物信息学的方法,对水稻白叶枯病(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)抗性基因Xa23的标记C189进行了改良和优化,获得了测序品种日本睛中C189电子克隆的序列,设计改良的分子标记,命名为P23.用P23扩增36个水稻亲本和200份中国栽培稻微核心种质材料,研究了该分子标记的稳定性和...     

水稻OsENOD93b基因组织表达模式与生物信息学分析

主要探究OsENOD93b基因在水稻中的组织表达模式,并对其作生物信息学分析.采用实时荧光定量PCR技术分析OsENOD93b基因的表达模式.用ExPASy-Protparam、Protscale、CDD、SOPMA、Phyre 2、Psort等在线工具对OsENOD93b进行生物信息学分析.经组织表达模式分析可知,O...