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以氨基糖苷类、四环素类、磺胺类和氯霉素类四大类抗生素的11种耐药基因为靶基因,构建了耐药基因的检测芯片.确定芯片点样温度为25℃,湿度为65%;各样点中心距离为1000 μm,样点直径为220 μm.芯片点样结束后,室温干燥6 h,60℃水合处理30 s,80℃干燥10 s,254 nm波长紫外交联10 min.以532 nm(绿光)波长扫描采集杂交信号,激光扫描分辨率为10 μm,激光功能90%,PMTG 85%.选用tetA基因进行杂交动力学研究,确定靶基因的点样浓度为100 ng·μL-1,探针最适浓度为3600 pg·μL-1,系统检测灵敏度为3 pg·μL-1.基因芯片杂交的主要参数为:44℃预杂交2 h,52℃杂交6 h.杂交信号的判读标准为:样点信噪比(S/N)≥1.5及信号强度中位值≥1000.芯片杂交特异性高,重复性好,实现了11种耐药基因的同时检测. 相似文献
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多重耐药鸡致病性沙门氏菌I类整合子的检测研究 总被引:3,自引:0,他引:3
采用药敏纸片法(NCCLS 2004),对19株鸡致病性沙门氏菌进行了药敏试验,结果19株菌对丁胺卡那霉素、卡那霉素、庆大霉素、新霉素、链霉素、氨苄青霉素、强力霉素、氟哌酸、头孢三嗪、氯霉素、磺胺异恶唑、四环素、先锋V 13种药物的耐药率分别是:5.26%、63.16%、47.37%、36.84%、84.21%、84.2%、100%、57.9%、5.26%、52.6%、89.47%、100%、26.3%。19株菌多为多重耐药:其中耐5种、6种、7种、8种、9种、10种药物的分别为10.53%、 5.26%、15.79%、21.05%、15.79%、15.79%,多重耐药率84.21%(16/19);根据I类整合子的结构设计了3对引物,对I类整合子的intI1、可变区、3’保守端进行扩增,检测鸡致病性沙门氏菌I类整合子,分析I类整合子与多重耐药的关系,扩增出了750~2000 bp的基因盒片段,检出率为73.68%(14/19),多重耐药菌的I类整合子检出率为87.5%(14/16),I类整合子PCR阳性菌株多重耐药率为100%(14/14)。研究结果表明,I类整合子与多重耐药之间有明显的相关性。 相似文献
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猪瘟的流行现状及防制 总被引:9,自引:1,他引:9
近年来 ,猪瘟的发生率呈上升趋势 ,病猪临床表现多样化 ,主要以非典型猪瘟为主。本文根据对四川部分种猪场的流行病学调查及血清学监测情况 ,参照有关资料 ,对当前的猪瘟现状进行分析 ,并提出防制建议。1 流行病学特点1 .1 以零星散发为主 ,常发生在规模化猪场。1 .2 免疫猪群常有发生。且常发生在具有明确免疫程序的规模化猪场。涂长春等报道 [1] ,在发病猪场中 ,接种疫苗 7天内发病的有 8/48个 ,7天后发病的有 2 1 /48个 ,潜伏期一般 2~ 2 1天。1 .3 1 0日龄内和断奶前后仔猪 (1 5~ 6 0日龄 )发病率较高 ;育肥猪和种猪很少发病。1 … 相似文献
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