绵羊STMN1基因的克隆、序列分析及其组织表达

为阐明STMN1功能及其对绵羊肌肉生长发育的影响,本研究克隆了绵羊STMN1基因序列,对该基因编码蛋白质的理化性质进行预测,分析其在绵羊不同组织及不同发育时期背最长肌和股二头肌的表达特性。结果表明,克隆得到绵羊STMN1基因CDS区长450 bp,编码149个氨基酸,蛋白质分子量为17 302.51 D,等电点为5.75;绵羊STMN1氨基酸序列与山羊、牛、猪、小鼠和人的相似性达到90%以上;系统进化树分析表明,绵羊STMN1基因与山羊的亲缘关系最近。STMN1在绵羊睾丸中表达量最高,心和脾表达量次之,肝、肺、肾、背最长肌和股二头肌表达量较低。STMN1在不同发育阶段的绵羊背最长肌和股二头肌中均有表达,在绵羊背最长肌中,24月龄绵羊中STMN1高表达,0、2、5、12月龄中度表达;在绵羊股二头肌中,5月龄绵羊中STMN1高表达,2月龄中度表达,0、12、24月龄低表达。本研究结果为进一步阐明STMN1基因在绵羊中的生物学功能奠定了理论基础。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GS株结构蛋白基因的克隆及结构特征分析

根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)VR-2332毒株基因序列设计合成了6对引物,应用RT-PCR方法对PRRSVGS株部分片段进行基因的扩增、克隆和测序,将测序结果应用Blast和DNAStar软件进行拼接,并与国内外分离毒株进行核苷酸以及推导氨基酸序列同源性比较.结果发现PRRSVGS毒株结构蛋白基因全长3819bp,包括ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7共6个阅读框,分别编码GP2、GP3、GP4、GP5、M和N蛋白;与BJ-4、CH-1a、HB-2(sh)/2002和VR-2332美洲株等核苷酸的同源性在87.9%～97.1%,推导的氨基酸同源性在88.3%～97.1%;而与LV和Euro毒株的同源性差异显著,核苷酸同源性在56.0%～70.0%,氨基酸同源性在54.9%～77.6%.构建的系统发育树证明该毒株在基因型上属于美洲型.     

不同营养水平全混合日粮对育肥羔羊生理生化指标的影响

研究了不同营养水平全混合日粮(total mixed ration,TMR)对南非肉用‘美利奴’ב甘肃高山细毛羊’F1代羔羊生理生化指标的影响.结果表明:在TMR饲喂技术下,以0.8×NRC水平育肥南非肉用‘美利奴’ב甘肃高山细毛羊’F1代羔羊效果最好;试验羊体温、呼吸频率、脉搏等生理指标以及血液碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶和胆碱酯酶等生化指标均在正常范围内(P>0.05),但发现杂交羔羊母羊的平均体温极显著高于公羊(P<0.01).说明在甘肃河西走廊地区可以大面积推广应用肉羊TMR饲喂技术,用南非肉用‘美利奴’杂交改良‘甘肃高山细毛羊’是可行的.     

高寒牧区引入南非肉用美利奴羊与甘肃高山细毛羊杂交效果的观察

为改善与提高天祝县甘肃高山细毛羊的毛肉生产性能,2011年9月引入7只南非肉用美利奴种公羊与甘肃高山细毛羊进行杂交试验,并对杂交F1组和甘肃高山细毛羊纯繁对照组所产后代的初生重、1月龄重、3月龄重、6月龄重进行了跟踪测定与对比分析。结果表明:杂交F1初生重~6月龄重均显著高于对照组(P<0.05),变异系数15.99%;引入的种公羊在人工授精中,1次射精量0.6～1.3 mL,精子密度13亿～23亿个/mL,平均活力0.65,均达到标准要求。由此可见,高寒牧区引入南非肉用美利奴羊改良甘肃高山细毛羊是一项提升天祝县养殖效益的重要举措。     

褪黑素对体外培养绵羊垂体细胞分泌FSH和LH的影响

本文采用体外细胞培养和放射免疫测定法(RIA)的方法,研究了褪黑素(MLT)对季节性繁殖的蒙古母羊垂体细胞分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的作用。结果表明:当单独用递增的MLT(10、100、1000、2000pg/mL)处理原代垂体细胞时,随时间的延长FSH的分泌量极显著下降(P<0.01),但对LH的基础分泌没有影响;无论用10IU/mLhCG单独刺激,还是用不同剂量MLT与10IU/mLhCG共同刺激垂体细胞,FSH和LH的分泌都极显著高于对照组(P<0.01),但与MLT的剂量没有关系。     

褪黑素对体外培养绵羊卵泡颗粒细胞分泌雌二醇和孕酮的影响

采集绵羊卵泡颗粒细胞进行体外培养,根据试验设计加入褪黑素(MLT)和HCG,分别于不同培养时间收集细胞培养液,用放射免疫测定法(RIA)测定细胞培养液中雌二醇(17β-E2)和孕酮(P4)含量。结果表明:卵泡颗粒细胞在无血清培养体系中可体外培养,并能够分泌相应17β-E2;用MLT或MLT与HCG共同处理卵泡颗粒细胞,能促进细胞分泌17β-E2,并呈时间和剂量的依赖性,但对P4的分泌没有影响。     

饲粮营养水平对羔羊生产性能和采食行为的影响

采用3×2×2因子设计,研究不同营养水平(A因子:A1为1.0倍NRC,A2为0.9倍NRC,A3为0.8倍NRC)、遗传背景(B因子:B1为甘肃肉羊新品种选育群羔羊,B2为‘杜泊’(♂)×甘肃肉羊新品种(♀)F1代羔羊)和性别(C因子:C1为公羔,C2为母羔)条件下羔羊的生产性能、采食行为和经济效益.结果表明:A1组羔羊试验末体质量和平均日增质量极显著高于A2和A3组(P<0.01),料肉比极显著低于A2和A3组(P<0.01);B1组羔羊平均日增质量极显著低于B2组(P<0.01),料肉比极显著高于B2组(P<0.01);C1组羔羊平均日增质量极显著高于C2组(P<0.01),料肉比显著低于C2组(P<0.05).随营养水平的降低,羔羊每个逆呕食团咀嚼次数显著上升(P<0.05);B1组羔羊反刍时间极显著低于B2组(P<0.01).根据经济效益分析,A1组羔羊纯收入极显著高于A2和A3组(P<0.01);B1组纯收入极显著低于B2组(P<0.01);C1组纯收入极显著高于C2组(P<0.01).说明杜甘杂种羔羊生产性能和经济效益较高;公羔的生产性能和经济效益优于母羔;采用1.0倍NRC的饲粮可以获的最佳生产性能和最大经济效益.     

不同性别滩羊脂肪沉积和体脂率差异分析

为研究不同性别滩羊脂肪沉积和体脂率差异,选取12只6月龄滩羊（公、母羊各半）,通过测定脂肪沉积、各部位脂肪占活重和胴体重比例、屠宰性能,计算活重体脂率和胴体体脂率。结果表明：(1)母羊大网膜、肾周脂肪占活重和胴体重的比例均显著高于公羊（P<0.05）,母羊皮下脂肪占活重的比例显著高于公羊（P<0.05）、占胴体重的比例有比公羊高的趋势（P=0.052）,肠系膜、尾脂占活重和胴体重比例公、母羊间差异均不显著（P>0.05）;(2)母羊腰大肌、股二头肌脂肪含量有高于公羊的趋势（P=0.083,P=0.084）,但背最长肌脂肪含量与公羊差异不显著（P>0.05）,平均肌内脂肪含量公、母羊间差异不显著（P>0.05）;(3)母羊GR值显著高于公羊（P<0.05）,宰前活重、胴体重、屠宰率和背膘厚公、母羊间差异均不显著（P>0.05）;(4)母羊活重体脂率和胴体体脂率均显著高于公羊（P<0.05）。综上说明,滩羊母羊在脂肪沉积能力方面优于公羊。     

藏绵羊BOLL的分子特征及其在睾丸中的表达调控与功能分析

【目的】BOLL作为一个RNA结合蛋白,可通过与其他分子相互作用而在精子发生过程中发挥不可或缺的作用。研究旨在分析藏绵羊BOLL的序列特征及其在睾丸中的表达与分布模式,进而探究其表达调控与潜在的生物学功能,以期为进一步解读BOLL在绵羊精子发生中的作用机制提供必要的思路和分子见解。【方法】选取3月龄(性成熟前)、1岁龄(性成熟)和3岁龄(成年)3个关键发育阶段各8只健康的雄性藏绵羊。以睾丸组织总RNA为模板,采用RT-PCR技术克隆藏绵羊BOLL的完整编码序列(coding sequence,CDS)区;通过相关生物信息学软件对BOLL的序列与结构特征及其互作蛋白进行分析;采用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,qRT-PCR), Western blot和免疫荧光染色法对BOLL在3个发育阶段睾丸组织中的表达和免疫定位特征进行检测;基于课题组前期有关藏绵羊睾丸组织全转录组测序数据,借助相关数据库进行绵羊BOLL的竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络和功能注释分析,并采用qRT-PCR和双荧光素酶...     

回眸陇原羊业七十载锚定强“芯”开启新征程

新中国成立70余年以来，甘肃省羊产业发生巨大变化，羊种业相继经历了起步、快速发展、转型升级与自主创新等4个阶段，绵、山羊品种资源越来越丰富。站在新的历史起点，在大力发展现代种业产业的环境下，甘肃羊种业必将在种质资源保护利用、新品种培育、良种繁育体系、全产业链发展体系建设等方面实现质的飞跃。