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巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统及其在外源蛋白生产中的优势与应用前景 总被引:10,自引:0,他引:10
表达系统是基因工程及生物制药研究和应用的重要内容 ,也是生命科学研究领域的热点。长期以来 ,大肠杆菌一直被用作表达外源基因的宿主菌 ,并成功地表达了多种外源蛋白 [1 ] ,但是它不能表达结构复杂的蛋白质 ,且分泌型表达产量较低。而哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统虽然能够表达结构复杂的真核细胞蛋白成分 ,但操作复杂 ,表达水平低 ,产业化生产造价昂贵 ,不易普遍推广使用 [2 ]。酵母是单细胞低等真核生物 ,它既具有原核生物易于培养、繁殖快、便于基因工程操作和高密度发酵等特性 ,同时又具有适于真核生物基因产物正确折叠的细胞内环境和… 相似文献
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有机磷类神经毒剂 (organophosphate nerve agents)是指由有机磷酸酯类 (organophosphonate,OP)构成的一类化学物质 ,因含磷 ,又称含磷毒剂。这类化学物质的共同毒性特征为 :经胃肠道、呼吸道、皮肤或粘膜吸收后 ,动物 (包括人和各种畜、禽、兽及昆虫 )迅速出现一系列神经系统症状 ,伴发全身机能失调、衰竭直至死亡 [1 ]。常见的有机磷酸酯类依据用途来分 ,可分为有机磷类民用杀虫剂 (organophosphate,OPP)和军用神经性毒剂 (nerve agents)。军用有机磷类神经毒剂多以气溶胶形式使用 ,对人类的毒害作用比一般有机磷农药致死性强、作用迅速… 相似文献
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高等动物克隆成功及其意义 总被引:1,自引:0,他引:1
综述了克隆技术在微生物,植物,低等动物和高等动物上的应用过程,阐述了高等动物的克隆成功在动物科学,医学和整个生命科学领域的重要意义。 相似文献
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本文为国内外首次报道从我国引种的西洋参茎叶中,经提取、大孔树脂吸附,除杂质后得纯度较高的总皂苷。将此总皂苷又以硅胶柱层析,经洗脱、分离,最后分得纯单一化合物。按常规测定物理常数、水解反应;又通过一维~1H、~(13)C 核磁共振谱,二维~(13)C—~1H 远程异核化学位移、~(13)C—~1H 异核化学位移、~1H—~1H 同核化学位移等相关谱,以及质谱的测定,最后确定以奥科提罗醇(0cotillol)为配基的拟人参皂苷—RT_5(pseudoginsenoside—RT_5)的分子结构。 相似文献
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20 0 1年 8月 ,辽阳灯塔某奶牛场有多头奶牛发生以眼结膜黄染、浓茶色尿液和机体严重衰竭等为主要临床症状的疾病 ,故请笔者赴现场诊疗。经病史调查 ,临床检查 ,采样涂片镜检和用药治疗 ,初步诊断为奶牛血孢子虫病 ,学名为梨形虫病 ,或称巴贝斯虫病 ,过去也称为焦虫病。现将诊疗过程报告如下。1 发病情况该奶牛场共有奶牛 5 0头。据牧场工作人员反映 ,在 2周以前发现有 10多头奶牛精神沉郁 ,呼吸较快 ,喜卧地 ,不吃草 ,只饮水 ,泌乳减少 ,尿呈黄色 ,逐渐消瘦。有 6头奶牛在笔者赶到前已陆续死亡。还有近 2 0头表现出异常的临床症状 ,3头较… 相似文献
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为使大肠杆菌热敏毒素LT的毒素活性丧失的同时仍保留其较强的免疫原性,实验依据LT基因的同源序列设计并合成5条引物,采用突出末端PCR法和重组PCR法,将克隆于质粒pEWD299上的LT基因,分别引入BamHI、Ndel和xhol等位点,扩增出带有上述RE位点且含有m7和m112突变点的约1100bp和约800bp的DNA片段和不含突变点的约300bp的DNA片段,使控制LT毒力活性中心的第7位和第112位氨基酸的碱基分别发生诱变,各DNA片段经分熟、纯化、RE酶切和DNA连接酶连接后,插入经BamHI和XhoI双酶切的线性化的高效表达载体pGEX-4T-1的多克隆位点区,使LTm基因置于pTac强启动子下且与Thrombin蛋白基因融合表达,将连接产物转化入JM105菌株,挑出可疑阳性菌落,提取质粒,经酶切鉴定、PCR鉴定和DNA序列分析,证明读框正确,序列正确,获得了pGEX-4T-1(LT7t GEX-4T-1(LTm112两个重组表达质粒。为运用基因工程手段大量生产人 动物大肠杆菌流行性腹泻的疫苗抗原和幽门螺杆菌疫苗的粘膜免疫佐剂,完成了基因水平的工作。 相似文献