污水处理池环境细菌遗传多样性分析

以碱加热裂解法从山西农业大学污水直接和间接排放处理池自然水样中分离细菌总DNA ,以细菌 16SrRNA基因特异性引物扩增 16SrRNA基因片段。采用T -A克隆系统克隆分子量为 1339bp的PCR产物 ,构建了rDNA亚克隆文库。用三种识别六碱基的限制性内切酶两两组合消化重组质粒。共分析了两个处理池自然水样各 30个rDNA重组质粒 ,分别发现 4种和 8种细菌rDNA基因型。各基因型频率的分布变化比较大 ,最高和最低的频率分别为 0 2 5和 0 0 1。部分基因型频率间差异显著 ,遗传多样性指数分别为 0 4和 0 9。     

绵羊成熟卵母细胞GMP玻璃化冷冻影响发育因素的研究

利用GMP法(毛细玻璃管法)冷冻成熟的绵羊卵母细胞,旨在探讨冷冻和解冻处理方法对绵羊成熟卵母细胞发育潜力的影响.对比在玻璃化冷冻液中添加0.3 mol/L蔗糖;卵母细胞冷冻前用7.5 μg/ml CB预处理;卵母细胞去掉颗粒细胞冷冻;以及四步法解冻和三步法解冻对卵母细胞形态完整率、孤雌激活胚发育率的影响.结果显示:玻璃化冷冻液中添加蔗糖孤雌激活卵裂率达到56.70%,极显著高于对照25.40%(P<0.01),桑葚胚率(16.49%)比对照(4.76%)有明显提高(P<0.05);冷冻前用CB进行预处理,解冻后形态正常率为78.78%,明显高于对照61.11%(P<0.05),孤雌激活卵裂率(39.39%)也高于对照组(21.11%);去掉颗粒细胞裸卵与保留颗粒细胞成熟卵母细胞解冻后形态正常率、孤雌激活卵裂率及桑葚胚率、囊胚率之间无显著性差异(P>0.05);四步法解冻和三步法解冻后卵母细胞形态恢复及孤雌激活后的发育率,两组之间差异不显著(P>0.05).在玻璃化冷冻液中添加蔗糖及卵母细胞冷冻前用CB预处理有利于卵母细胞冷冻解冻后形态恢复及孤雌激活后的胚胎发育.     

浅谈化肥识别法

农民购买化肥时很难识别真假化肥,下面提供一种在不具备化验设备的情况下的鉴别方法. 一、颜色和形态 优质化肥粒度和比重较均一,且表面光滑,颜色纯正.如俄罗斯产三元素复合肥(16-16-16)和美国二铵.而假化肥恰恰相反,肥料颗粒大小不均匀、粗糙.根据生产工艺的不同,化肥的颗粒大致有三种形状,一种是颗粒不规则,有油滑感,一般为转鼓造粒且经过表面包膜技术处理,有防潮及缓释作用;另一种圆形颗粒,有光泽和微孔,是塔式造粒且经过抛光处理;还有一种圆形颗粒,无光泽,为掺混方法或其他工艺生产.     

母牛卵巢囊肿的B超诊断与治疗

本研究利用B-型超声波图像显示母牛卵泡囊肿和黄体直径变化以及卵巢轮廓诊断母牛卵巢囊肿。通过激素治疗、穿刺的方法对卵巢囊肿进行对症治疗,治疗效果显著。     

人溶菌酶基因真核表达载体构建及其在牛乳腺上皮细胞中的表达

构建真核表达载体pEGFP-C1-hLYZ,并从基因水平研究人溶菌酶基因在体外培养的牛乳腺上皮细胞中的表达,为核移植提供转基因供体细胞.采用PCR的方法从人溶菌酶质粒中扩增854 bp人溶菌酶基因(包括完整的编码框446 bp).并克隆到pMD18-T载体上,用限制性内切酶Hind Ⅲ和BamHⅠ双酶切.将人溶菌酶基因的酶切片段(883 bp)定向克隆到pEGFP-C1的多克隆位点中,构建重组表达质粒pEGFP-hLYZ,并进行Hind Ⅲ和Bam HI双酶切鉴定.转染体外培养的牛乳腺上皮细胞,48 h后观察其表达情况.PCR检测溶菌酶基因的表达.成功构建了人溶菌酶真核表达载体,观察到表达绿色荧光蛋白的牛乳腺上皮细胞,并检测到溶菌酶基因.     

奶牛发情周期中FSH和LH浓度与卵泡发育的对比分析

选择从澳大利亚购进的2岁左右、发情周期为21天的育成母牛10头，用放射免疫测定法（RIA）测定了发情周期血清中促卵泡素（FSH）和促黄体素（LH）的浓度，用B-型超声波诊断仪检测发情周期卵巢卵泡发育变化。结果显示：FSH和LH浓度在奶牛发情周期中主要表现出两个波峰，其中一个波峰较小，这与卵泡两个发育波态势相似。     

奶牛发情周期中生殖激素浓度与卵泡发育对比分析

选择从澳大利亚购进的2岁左右发情周期为21d育成母牛10头,用放射免疫测定法（RIA）测定发情周期血清中促卵泡素、促黄体素、孕酮、雌二醇17β的浓度,用B-型超声波诊断仪检测发情周期卵巢卵泡发育变化。结果显示：优势卵泡发育体积和FSH、LH、与E2浓度在奶牛发情周期中主要表现出两个波峰．对比分析显示奶牛在发情周期第12天（优势卵泡峰时）不发情与不排卵主要原因可能是体内前列腺素等激素量不足所致。     

甘草酸单铵盐对猪卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响

将收集的猪COCs置于添加不同浓度(0.0,0.3,0.6,1.2μmol/L)甘草酸单铵盐(monoammonium glycyrrhizinate, MAG)的卵母细胞体外成熟培养液中培养46 h,统计成熟率，通过免疫荧光染色检测成熟卵母细胞ROS表达水平；对成熟卵母细胞体外受精，于胚胎培养液内体外培养48,120 h,分别统计体外受精胚胎卵裂率、囊胚率，并用Hochest荧光染色检测囊胚总细胞数；结合成熟率及IVF胚胎发育囊胚率选定最佳添加浓度，在体外成熟培养液中添加最适浓度MAG,以0μmol/L MAG为对照组，体外培养46 h后，利用免疫荧光染色检测猪成熟卵母细胞的线粒体膜电位水平和细胞凋亡水平。结果显示，与对照组相比，不同浓度MAG处理组猪卵母细胞体外成熟率均有所提高，但差异均不显著(P>0.05);不同浓度MAG添加均可降低猪卵母细胞ROS水平，与对照组相比，0.3,0.6μmol/L组差异显著(P<0.05),1.2μmol/L组差异极显著(P<0.01)。0.3μmol/L添加组显著提高了猪体外受精囊胚率(P<0.05),但不同MAG添加组对...     

玉米杂交制种技术

玉米种子生产是一项系统工程。本文结合笔者的工作经验,对玉米种子生产过程中的基地选择、隔离、播种、去雄、授粉、脱水晾晒以及病虫害防治等每个环节和工序,逐一进行了详细说明,对异常情况进行探讨,以期对生产实践中遇到的类似情况能起到参考作用。