辽宁地区猪源大肠埃希菌整合子携带情况调查与分析

查明辽宁地区整合子在猪源大肠埃希菌中的分布及整合子携带耐药基因盒的种类,可为该病的综合防控提供科学依据。本研究利用整合酶基因PCR扩增法检测整合子,并对整合子可变区进行扩增测序。结果表明,71.43%(40/56)的菌株为Ⅰ类整合子阳性,1.79%(1/56)的菌株同时为Ⅰ类和Ⅱ类整合子阳性,未检测到Ⅲ类整合子;87.8%(36/41)的菌株表现为Ⅰ类整合子可变区扩增阳性,扩增产物大小在116bp~2 307bp之间,100%(1/1)菌株表现为Ⅱ类整合子可变区扩增阳性,大小为2 106bp;整合子可变区含有编码对氨基糖苷类抗生素耐药的基因(aadA1、aadA2、aadA5、aadA22、aadB、aacA4和sat2),编码对磺胺类抗生素耐药的基因(dfrA1、dfrA12、dfrA17),编码对氯霉素抗生素耐药的基因(cmlA1、cmlA6)。因此,整合子在大肠埃希菌中广泛存在,辽宁地区大肠埃希菌中整合子主要携带编码对氨基糖苷类、磺胺类和氯霉素耐药基因盒。     

伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法的建立

为实现对伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）野毒株与gE基因缺失疫苗株的快速、敏感、特异的鉴别诊断,本试验针对PRV gD和gE基因设计了2套特异性引物和TaqMan探针,建立了PRV野毒株与gE基因缺失疫苗株的TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法,对引物和探针浓度、退火温度等进行了优化,对方法进行敏感性、特异性、重复性试验,并进行临床样品检测。结果显示,建立的针对gD、gE基因的TaqMan实时荧光定量PCR方法线性相关系数（R²）分别为0.996和0.980,均呈良好的线性关系;检测限分别为39.4和12.1拷贝/μL;与圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应;重复性试验结果显示,针对gD基因的批内和批间变异系数分别为1.43%~1.86%、1.10%~2.07%,针对gE基因的批内和批间变异系数分别为0.98%~1.41%、1.12%~1.86%。应用建立的TaqMan实时荧光定量PCR与普通PCR分别对11份临床疑似感染样品进行检测,阳性率分别为36.4%和27.3%。结果表明,该方法敏感性高、特异性强、重复性好,可作为伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株的早期鉴别诊断和定量检测的有效手段。     

猪瘟病毒通用型RT-LAMP方法的建立与应用

本研究根据猪瘟病毒(CSFV)基因组的NS5B基因片段,设计了4条针对NS5B基因6个位点的RT-LAMP扩增引物,建立的方法能特异性地检测出CSFV,而PRV、PPV、PRRSV、PCV、FMDV等病毒扩增结果均为阴性;该方法与猪瘟荧光RT-PCR方法相比,特异性无明显差异,敏感性高10倍;另外,该方法耗时短,只需1h,操作简单,不需要PCR仪等特殊仪器,扩增产物可通过肉眼观察、或加入荧光染料在紫外灯下观察特异性荧光、也可通过凝胶电泳检测,因此适合从临床病料中快速准确检测出猪瘟病毒感染情况,适合推广应用于基层和野外现场.     

辽宁省一起野禽H5N6高致病性禽流感疫情的紧急流行病学调查

2021年4月6日,辽宁省沈阳市和平区长白岛森林公园内饲养的10只黑天鹅和1只大雁死亡,袭击率为3.8％(11/291).经现场调查和临床剖检诊断,市级和省级疫病控制中心实验室检测,诊断为疑似H5亚型高致病性禽流感.随后,经国家禽流感参考实验室确诊为H5N6亚型高致病性禽流感.4月12日,农业农村部公布了该起疫情.在接...     

辽宁省规模猪场生物安全状况调查

2018年8月,我国首例非洲猪瘟病例在辽宁省被发现。随后,全国各地区相继发生非洲猪瘟疫情。如何控制、净化非洲猪瘟,已成为国内整个产业亟需解决的问题。为掌握辽宁省规模猪场生物安全状况,分析生物安全在非洲猪瘟防控中的作用,开展了相关流行病学调查工作。对辽宁省部分发生过非洲猪瘟疫情的规模猪场进行流行病学调查发现,没有出猪台、饲料进场不消毒、人员与车辆进出管理不严、防疫管理混乱等,是疫情发生的主要风险因素。对辽宁省56个未发生过非洲猪瘟疫情的规模猪场进行流行病学调查发现,这些猪场的生物安全水平普遍低下,主要表现为:缺乏最基本有效的防护隔离硬件设施,以及相关的规章制度和操作规程;缺少验证消毒灭源等生物安全手段实施效果的经验和方法,没有专业技术人员对饲养场风险点进行评估和分析;饲养场从业人员的"知信行"水平普遍较低。综合分析认为,辽宁省生猪养殖业的生物安全水平与疫病防控需要有很大差距,而规模场生物安全水平低下、从业人员缺乏生物安全意识和知识,是当前疫病防控效果不理想的主要原因。今后需要通过政府扶持、业务部门指导和培训,对饲养场进行科学分析和评估,通过改进硬件、完善制度、加强宣传培训等措施,全面提高养猪场的生物安全水平。     

辽宁省牛炭疽疫情诊断报告

炭疽(Anthrax)是由炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)引起的一种人畜共患传染病。易感动物主要是牛、羊、马、驴等草食动物,人类主要是通过接触患畜、进食感染炭疽的牲畜肉类、吸入含有病菌的气溶胶或尘埃以及接触污染病菌的皮毛而感染本病。临床病型有皮肤炭疽、肠炭疽、肺炭疽及炭疽性脑膜炎等,本病传染性强,危害严重。     

3项实验综合检验判定病死肉

在肉品卫生质量检验中,鉴别病、健肉有很多种理化方法,通过多年的研究及多方面的探讨,我们于1997年初开始引进原解放军农牧大学科研成果-动物性食品兽医卫生检验箱中的病死畜禽肉综合检验技术,经过实验室对照试验及小区试验,最后在全省范围内推广.     

动物炭疽病的研究进展

炭疽是由炭疽芽孢杆菌引起的一种人畜共患的烈性传染病.全球大约有82个国家发现过动物炭疽病,据估计,近几年全球每年有1万例动物炭疽,9 000人感染发病.近几年,在辽宁省的个别地区也零星发生过动物炭疽疫情,并且也有人感染发病的情况.