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用IBDV特异引物对IBDVRNA进行逆转录和PCR扩增。以低触点琼脂糖凝胶电泳法回收PCR扩增带,经酚-氯仿纯化后,用DIG际记制备IBDVCDNA核酸探针.斑点杂交试验证明,该探针能与IBDV不同毒株(STC、Lukert、B_2和LQ)发生阳性杂交反应,敏感度为1pg.本实验制备的IBDVcDNA核酸探针不仅为IBDV的流行病学研究和分子生物学鉴定提供了敏感可靠的手段,而且也是核酸探针制备方法的一次探索。 相似文献
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5株已适应鸡胚细胞的AVAV在Vero细胞上传2~5代后各毒株均能产生明显的CPE和较高的病毒滴度,而2株非鸡胚细胞适应株(分别为鸡胚毒和野外组织毒)在Vero细胞上盲传7代,仍无明显的CPE出现。这一结果初步表明Vero细胞能用于已适应鸡胚细胞的毒株的增殖。而不能用于病毒的分离。吸附时间与冻融次数明显影响病毒的适应进程,以吸附1小时、冻融2次以上为佳。AVAVJN-1株能在Vero细胞上产生蚀斑,大小为2.7~4.4mm,出斑时间为接种后4~5天,Vero细胞用于中和试验,测得S(1133)株免疫鸡血清的小和效价为1:80。 相似文献
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我国的江海型猪种是处于华北型和华中型的交错地带,由华北型和华中型二猪种杂交而成,故曾又称华北、华中过渡型。姜曲海猪主要分布在长江北岸沿江高沙土地区,二花脸猪是太湖猪的一个类群,产于太湖流域的沿江沿海地带,均属此型。此型猪以繁殖力高而著称,且具有经济成熟较早和脂肪较多的特点。肉用家畜价值的高低,主要取决于它的体躯各组成部分的比例,以及其各组织和各器官的相互构成关系。因此,对不同品种猪胴体的骨骼、皮肤、肌肉、脂肪各组织和各内脏器官 相似文献
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猪囊虫病实验动物模型的建立 总被引:7,自引:1,他引:7
猪带绦虫孕节经酸性胃蛋白酶 37℃消化后,离心收集虫卵,加入含胰蛋白酶、 Na H C O3 及猪胆汁的孵化液,置 37℃孵化,孵化率在 75% 以上。孵化后的六钩蚴经尾静脉感染昆明小鼠,9 周后剖检,在小鼠的心脏及肺脏见有猪囊虫,感染率为 100% 。压片镜检,确认检出的猪囊虫发育成熟,形态结构完整;胆汁孵化试验,见其头节自动外翻。用 E L I S A 方法在小鼠血清中检测到囊虫 C A 抗原和抗体。试验表明,经尾静脉感染昆明小鼠的六钩蚴,可发育成成熟的猪囊虫,从而为猪囊虫病的研究提供了一种制作简便、经济的实验动物模型。 相似文献
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用兔抗牛睾丸细胞培养物的IgG琼脂糖4B偶联制备亲和层析柱,以反向亲和层析法纯化SFV—C抗原,即通过亲和层析免疫吸附除去PEG沉淀法部分纯化抗原中的残留牛睾丸细胞培养物成分。结果表明.通过3次反向亲和层析柱的纯化抗原.其总蛋白去除率达76.9%;应用纯化前后抗原检测猪瘟免疫血清.纯化抗原可以除去猪瘟免疫血清中的非相关抗体反应,确保猪瘟免疫抗体检测的特异性. 相似文献
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应用具有良好安全性的鸡病毒性关节炎病毒(AVAV)弱毒JN-1株免疫1日龄肉鸡40只,分别用琼脂扩散试验、间接ELISA和中和试验(NT)检测免疫鸡血清中的AVAV抗体。中和抗体于免疫后7d开始出现,14d后全部阳转;ELISA抗体也于免疫后7d开始显示阳性,21d后全部阳转;琼脂扩散抗体于免疫后14d开始阳转,28d以后全部显示阳性。分别在免疫后7、14、21和 28d于足掌皮下用强毒攻击免疫鸡,临床保护率分别为2/10、9/10、10/ 10、10/10,病理保护率分别为0/10、7/10、9/10、10/10。体外抗病毒谱试验显示,弱毒株的免疫血清能中和AVAV J-1株、S_(1133)株、FDO株和H_(9307)株。上述实验结果表明,AVAV弱毒株具有良好的免疫原性。 相似文献
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本文就干部人事档案达标升级活动提出了理性思考,即进一步做好材料收集,增强服务意识,提供优质服务:利用先进技术,提高管理水平:提高案卷质量:加强队伍建设,提高人员素质。这对新时期做好干部人事档案工作具有现实意义。 相似文献
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猪囊虫病疫苗用SOA工程菌的培养与发酵工艺 总被引:3,自引:1,他引:2
以摇床振荡培养猪囊虫病疫苗用SOA工程菌,确定了其最佳培养条件:培养基为含0.2%葡萄糖的LB磷酸盐复合培养基(pH7.4),诱导剂为1%乳糖,培养温度为37℃。以此为基础进行工艺放大,研究了SOA工程菌在70L国产发酵罐中的发酵培养工艺,确定了接种量、pH、气压、溶解氧、温度等参数。试验结果显示,种子罐细菌量为OD600=4.0时,接种到发酵罐的菌体收获量最高;罐体气压在0.05~0.25MPa之间变动对工程菌产量、活菌数及表达量等均无明显影响;整个发酵过程中,发酵条件比较稳定,pH为7.4~7.0,溶解氧保持在100以上,温度36~38℃,发酵时间8~10h。发酵结束,发酵液OD600高达11.2,活菌数为103亿/mL,表达量为16.2%,重组质粒稳定。 相似文献