西农萨能羊乳腺脂肪酸合酶基因exon 9-15的克隆与序列分析

【目的】山羊FAS基因exon 9-15编码的乙酰/丙二酸单酰基转移酶（acetyl-CoA and malonyl-CoA transacylases,AT/MT）区域对山羊乳短、中链脂肪酸的合成起重要调控作用。本研究针对西农萨能羊乳腺FAS基因exon 9-15进行克隆和序列分析。【方法】以处于泌乳期28 d的西农萨能羊乳腺组织mRNA反转录的cDNA为模板,通过RT-PCR方法首次扩增出西农萨能羊乳腺FAS基因exon 9-15的cDNA序列全长及exon 8 的3′端和exon 16 的5′端部分cDNA序列（GenBank收录号为DQ 915966）,并对其进行了同源性分析和功能预测。【结果】克隆片段全长1 449 bp,其中包括exon 9-15共1 388 bp、exon 8的3′端9 bp和exon 16 的5′端52 bp,编码483个氨基酸,包含编码的AT/MT区域951 bp（454～1404 nt）;西农萨能羊乳腺FAS基因exon 9-15与牛（NM_001012669）,人（NM_004104）,大鼠（NM_017332）和鸡（NM_205155）核苷酸序列相似度分别为95%、85.7%、82.7%、73.2%,氨基酸相似度分别为92.9%、77.7%、82.3%、64.7%;exon 10较其它物种缺失1个氨基酸。【结论】克隆获得西农萨能羊FAS基因片段全长1 449 bp,外显子9-15大小分别为463、185、190、95、135、204和116 bp;核苷酸及氨基酸序列与牛相应序列的同源性均高于其它物种;AT/MT区域的活性位点在各物种间均为高度保守的丝氨酸,但西农萨能羊exon 10较其它物种缺失1个氨基酸,这可能对AT/MT区域的空间构象及其生理功能产生重要影响。本研究为西农萨能羊FAS基因cDNA全长克隆以及基因功能研究奠定了重要基础。     

西农萨能奶山羊gBTN1A1基因的筛选、克隆及序列分析

利用抑制消减杂交技术研究同一只西农萨能奶山羊泌乳中期和末期的乳腺组织差异表达基因,以泌乳中期乳腺cD-NA为测试组,末期乳腺cDNA为驱动组,构建消减文库,得到山羊(Capra hircus)嗜乳脂蛋白基因的部分序列。根据牛(Bos)和绵羊(Ovisaries L.)基因组序列进行电子拼接,并设计引物,得到山羊嗜乳脂蛋白基因的CDs区全序列,应用RT-PCR技术从山羊乳腺组织总RNA中扩增克隆了山羊嗜乳脂蛋白基因CDs区,命名为gBTN1A1,并登录GenBank(EF102891)。gBTN1A1基因开放读码框由1581个碱基组成,编码526个氨基酸,前26个氨基酸为推定的信号肽区域。gBTN1A1基因核苷酸序列与牛(NM-174508)、人(NM-001732)和鼠(AK145168)的同源性分别为97%、88%和84%,氨基酸序列的同源性分别为96%、84%和70%。其二级结构、跨膜区域及信号肽分析均与牛、人和鼠的BTN1A1基因相似。     

发酵饼干小麦"建麦1号"的选育及优质丰产栽培技术

1选育经过及品质、产量表现 "建麦1号"是我县农业部门在赤霉病特大发生的1989年从"泗阳936"小麦田中选择抗赤霉病的变异单株,经连续六年系统选育而成.     

自家血疗法治疗奶牛风湿病的体会

风湿病是常见反复发作的急性或慢性非化脓性炎症,其特征是胶原结缔组织发生纤维蛋白变性以及骨骼肌、心肌和关节囊中的结缔组织出现非化脓性局限性炎症。一般认为是一种变态反应性疾病。而自家血液疗法,通过血液中的红细胞被破坏的过程中,该红细胞被网状内皮细胞吞噬,从而刺激、增强了网状内皮系统的吞噬作用,提高机体的抗病能力;同时还刺激、加强了机体的造血能力和机体吸附血液内     

玉米皮替代玉米粉对湘东黑山羊内脏脂肪组织脂肪代谢的影响

[目的]明确玉米皮替代玉米粉对山羊脂肪代谢的影响,为玉米皮在反刍动物养殖生产中的合理应用提供参考依据.[方法]选择10月龄左右、体重(17.50±2.67 kg/只)相近的健康雄性湘东黑山羊20只,随机分成2组[玉米粉组(CM组)和玉米皮(CG组)],每组10只.山羊日粮精粗比为75:25,CM组饲喂基础饲粮,CG组饲喂以玉米皮完全替代玉米粉的试验饲粮.饲喂60 d后进行屠宰,迅速采集网膜脂肪组织(简称网膜脂)、肠系膜脂肪组织(简称系膜脂)和肾周脂肪组织(简称肾周脂),通过Agilent 7890A气相色谱仪和实时荧光定量PCR检测其脂肪酸组成及脂肪代谢相关基因的表达情况.[结果]与CM组相比,CG组山羊网膜脂中的豆蔻酸(C14:0)、十七烷酸(C17:0)、硬脂酸(C18:0)、反式油酸(C18:1n9t)及花生酸(C20:0)含量显著(P<0.05,下同)或极显著(P<0.01,下同)上升;系膜脂中的十七烷酸和α-亚麻酸(C18:3n3)含量显著上升,肉豆蔻酸含量显著下降;而肾周脂的脂肪酸组成无显著变化(P>0.05,下同).山羊内脏脂肪的饱和脂肪酸总含量、单不饱和脂肪酸总含量及多不饱和脂肪酸总含量在CG组与CM组间均无显著差异.在脂肪代谢相关基因表达方面,与CM组相比,CG组山羊网膜脂中的乙酰辅酶A羧化酶基因(ACC)极显著上调表达;系膜脂中的脂肪酸去饱和酶1基因(FADS1)极显著下调表达,锌指蛋白类转录因子2(KLF2)、锌指蛋白类转录因子4(KLF4)、胆固醇调节元件结合蛋白1基因(SREBP1)则显著上调表达;肾周脂中的SREBP1基因极显著下调表达.[结论]以玉米皮替代玉米粉会不同程度地影响湘东黑山羊内脏脂肪组织中某些脂肪酸含量及脂肪代谢相关基因表达,但对内脏脂肪组织的饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸及多不饱和脂肪酸含量均无显著影响,即以玉米皮代替玉米粉对山羊内脏脂肪组织脂肪酸组成的总体影响较小,可在实际生产中推广应用.     

橙皮苷调控Bcl-2/Bax-Caspase3信号通路阻抑H2O2诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡

【目的】探析橙皮苷对奶牛乳腺上皮细胞凋亡的阻抑效果及其分子作用机制,为其在促进奶牛乳腺器官生长发育和维持泌乳功能领域的应用提供理论依据。【方法】以1000μmol/L H₂O₂处理奶牛乳腺上皮细胞8 h构建细胞凋亡模型,再用120μg/mL橙皮苷处理24 h,然后采用CCK-8法测定奶牛乳腺上皮细胞活性,通过激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和DNA凝胶电泳检测细胞凋亡情况,利用实时荧光定量PCR检测奶牛乳腺上皮细胞的Bcl-2、Bax和Caspase3基因表达水平,并以Western blotting检测Bcl-2、Bax和Caspase3蛋白的表达变化。【结果】与空白对照组(CK)相比,H₂O₂组奶牛乳腺上皮细胞活性极显著下降(P<0.01,下同),发生凋亡的细胞比例极显著升高,且DNA片段呈梯状条带;橙皮苷组奶牛乳腺上皮细胞活性显著升高(P<0.05,下同),且细胞凋亡程度低,发生凋亡的细胞数目较少。与H₂O₂组相比,H₂...     

厚朴酚与和厚朴酚的抗腹泻作用及其机理研究进展

厚朴酚与和厚朴酚是厚朴树中的主要活性成分.综述了厚朴酚与和厚朴酚的抗腹泻作用,并提出其可能的作用机理为:调节胃肠蠕动;作为Ca2+拮抗剂,阻断Ca2+通道;与其抗炎作用有关.     

鸭精液冷冻保存试验研究

以笼养金定鸭为材料,对鸭精液冷冻保存稀释液、防冻剂进行筛选,并研究了最佳平衡时间和解冻温度,同时还对公鸭精子在抗冻性方面的差异进行了初步探讨.结果发现:以10%二甲基亚砜做防冻剂,精子冻后活力最高,达0.7以上,经小群输精、孵化测定,受精率达65%.平衡时间10 min、解冻温度40C时,鸭精子冻后活力最好.公鸭在精子抗冻性方面存在极显著差异(P＜0.01),因此要在抗冻性方面对公鸭进行选择.     

白壳蛋鸡在4个微卫星位点上的遗传多样性研究

本研究利用 4个微卫星标记 ,通过计算平均遗传杂合度、有效等位基因数以及利用 SPSS软件进行聚类 ,对引进国外的白壳蛋鸡配套系的遗传多样性进行分析 ,结果表明 :母鸡的平均杂合度明显高于公鸡 ;父系公母鸡的有效等位基因数目高于母系公母鸡的有效等位基因数目 ;由聚类结果可将 4个系分为两类 ,A、B、D系为一类 ,C系为一类。     

奶牛乳腺长链脂肪酸转运的研究进展

奶牛乳脂中的长链脂肪酸（LCFA）JL乎全部来源于从消化道吸收并转运人血液的食物外源性LCFA,然后跨膜进入乳腺上皮细胞参与乳脂合成,而参与LCFA跨膜运输的脂肪酸转运蛋白有：脂肪酸转运蛋白家族（Fattyacid transport proteins,FAPTs）、脂肪酸转位酶（Fatty acid translocase,FAT／CD36）、脂肪酸结合蛋白家族（Fattyacid binding proteins,FABPs）和小窝蛋白（Caveolinproteins）。文章在综述LCFA跨膜运输研究的基础上,重点介绍4种LCFA转运蛋白的研究进展,发现在奶牛乳腺中表达的只有FAT／CD36和FABPs,而FATPs和小窝蛋白在奶牛乳腺中是否表达并参与LCFA的转运仍有待进一步研究确定。因此,应利用营养学、分子生物学和细胞生物学等方法,在体内和体外对FAT／CD36、FABPs、FATPs和小窝蛋白在泌乳期奶牛乳腺中的表达规律、作用机理进行深入研究,以探明其在乳腺LCFA转运中的作用及调控机制．并为优化乳脂组成实施的营养调控提供科学依据。