两个中等毒力IBDV疫苗免疫鸡对超强毒攻毒的保护试验

应用 SPF鸡分别比较研究了两个国内厂家生产的中等毒力 IBDV疫苗接种后对法氏囊和胸腺的影响和对超强毒 GX-8/99攻毒后的免疫保护力。结果表明 ,用于试验的两个中等毒力疫苗虽然在 SPF鸡可引起法氏囊和胸腺不同程度的萎缩 ,但确实能够 1 0 0 %保护已经免疫的SPF鸡免于超强毒 IBDV人工感染造成的死亡 ,而且 ,还能减缓和预防超强毒感染合并诱发的法氏囊的炎症、出血和变性。从而说明 ,在不受母源抗体干扰条件下 ,中等毒力的 IBDV疫苗能诱发对超强毒 IBDV中国株 GX-8/99攻毒的有效免疫保护力。     

鸭坦布苏病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank已发表的鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu virus,DTMUV）基因组（登录号：JX273153）保守基因序列,设计了1对特异性引物及TaqMan探针,以DTMUV重组质粒为阳性标准品模板,建立了快速、准确检测DTMUV的荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法特异性好,仅能在DTMUV样本中检出荧光信号,与其他病原不发生交叉反应;敏感性高,最低检测限可达25 copies/μL;不同梯度定量模板的拷贝数的对数值与CT值之间的线性关系表达式为Ct=–3.323×Lg（conc）+43.70,相关系数R2＝0.997,扩增效率E＝100%,DNA在2.5×101～2.5×107个拷贝数内检测曲线有良好的线性关系。对来源于江苏省和安徽省的29份疑似鸭坦布苏病毒感染的病鸭组织进行荧光定量RT-PCR检测,结果有27份呈现阳性,阳性检出率为93.10%,比常规RT-PCR的敏感性高。研究结果表明,该方法快速、灵敏、特异、重复性好且能实时定量检测,可用于DTMUV的临床检测和分子流行病学调查。     

四君子汤加减颗粒对腹腔巨噬细胞吞噬功能及ND和IBD疫苗免疫效果的影响

为探讨四君子汤加减颗粒对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和肉用仔鸡免疫鸡新城疫(ND)疫苗、传染性囊病(IBD)疫苗后血清ND及IBD抗体效价的影响,选取40只小鼠,随机分为4组,对照组正常饮水,试验组在饮水中添加不同浓度的四君子汤加减颗粒,测定各组腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数;同时以肉用仔鸡为研究对象,考察四君子汤加减颗粒分别与ND Clone-30疫苗、ND油乳剂灭活苗和IBD冻干苗合用之后,肉用仔鸡血清中ND、IBD抗体效价的变化情况。结果显示,试验组小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数均显著高于对照组(P<0.05);试验组鸡血清中的ND和IBD抗体效价均高于对照组。表明四君子汤加减颗粒可显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性并能显著增强ND、IBD疫苗对肉用仔鸡的免疫效果。     

青海高原东部农业区耕地流失及其评价

为探究中国西部耕地流失规律,该文利用1999年、2009年遥感数据提取青海高原东部农业区耕地变化信息,分析耕地流失量和空间分布,并结合地形数据、经济社会发展基础数据等用 Logistic 方法定量分析耕地流失的主要影响因素。结果表明：1999年至2009年间,青海高原东部农业区耕地面积净减少1393.25 km2,耕地流失1811.78 km2,其中转化为建设用地157.05 km2,退耕还林/草1654.73 km2。坡度＞25°的耕地中78.82%已进行了退耕还林/草,说明青海高原东部农业区退耕还林/草成效显著。耕地流失去向评价结果表明,海拔对建设用地扩张的贡献率为-66.46%,坡度对退耕还林/草的贡献率高达91.25%,说明青海高原东部农业区建设占用和生态退耕的合理性。该研究为区域社会经济的可持续发展提供依据。     

5个水稻蛋白激酶的克隆、表达及活性研究

蛋白激酶在生长发育、表达调控、逆境反应、信号传导等几乎所有的生命过程中发挥着重要作用,蛋白激酶的研究具有重要的理论和应用价值。全基因组测序结果表明,水稻基因组中至少有1500个蛋白激酶。本研究利用已有的蛋白激酶序列,通过PCR扩增和重组克隆,将5个重要的蛋白激酶在酿酒酵母系统中进行了表达,它们的编号分别是:NM-189878,NM-194133,NM-190508,NM-197522和NM-197571,其中NM-194133具有较强的自我磷酸化活性。同源性分析表明,这些激酶在水稻中可能的作用包括:碳代谢的生物合成调控、种子形态发生、细胞分裂调控、生物和非生物刺激的反应调控等。这项工作为进一步的体外酶活分析及蛋白质-蛋白质相互作用研究等提供了基础,也为高通量克隆表达水稻蛋白激酶提供了一个有效的系统。     

玉米产量及相关性状的QTL分析

以玉米自交系吉846和掖3189为亲本,组建含有280个F7家系的RILs群体为试验材料,构建含117个SSR位点和50个AFLP位点的遗传连锁图谱,图谱总长度2 638.3cM,标记间平均距离15.8cM。采用复合区间作图法对10个产量及相关性状进行QTL分析,共检测到108个QTL,其中4个QTL相对稳定表达。结果表明,第1染色体上控制株高的qPh-2-1,位于标记P66M89315-P37M70169之间,可提供的表型贡献率为5.72%～8.40%;第3染色体上控制穗位高的qEh-3-1,位于标记P66M47273-umc1400之间,可提供的表型贡献率为17.01%～21.06%,为主效QTL;第4染色体上控制穗长的qEl-4-2,位于标记umc1058-umc2289之间,可提供的表型贡献率为4.42%～6.72%;第8染色体上控制穗粗的qEd-8-1,位于标记bnlg240-umc1268之间,可提供的表型贡献率为5.33%～9.57%。Bin2.00-2.01、Bin2.04-2.05、Bin3.05-3.09、Bin7.01-7.02和Bin8.05-8.07这5个区域可能是产量及相关性状QTL的密集区域。     

山羊血清可溶性CD58存在的研究

进行了正常山羊血清对兔 RBC的溶血试验和猪 PBMC Et玫瑰花环试验。根据山羊血清经 SRBC吸收和添加山羊红细胞 CD58后对兔 RBC的破坏作用显著降低 ,认为山羊血清破坏 RBC的作用与血清中游离 CD2有关 ;经透析、反复解离 ,SRBC吸收后的山羊血清可抑制对兔 RBC的破坏作用和猪 PBMC Et玫瑰花环的形成 ,据此 ,进一步认为山羊血清中存在可溶性 CD58     

Zhangfei融合蛋白的纯化及其免疫效果

【目的】纯化Zhangfei融合蛋白并检测其免疫原性,为研究其在生殖内分泌调节中的作用提供理论依据。【方法】通过大肠杆菌原核表达系统进行Zhangfei融合蛋白的表达,筛选出最佳诱导表达条件,采用SDS-PAGE凝胶检测Zhangfei融合蛋白的表达情况,比较谷胱甘肽琼脂糖凝胶和电洗脱2种纯化Zhangfei融合蛋白的方法,并测定纯化的Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠和家兔的效果。【结果】成功筛选出了表达Zhangfei融合蛋白的最佳诱导条件为IPTG终浓度3 mmol/L,诱导时间7 h;应用电洗脱方法可得到纯度较高的Zhangfei融合蛋白,其质量浓度为1.269 mg/mL,免疫小鼠的血清抗体效价达1∶5×103以上,免疫兔的血清抗体效价高达1∶3×106。【结论】电洗脱纯化Zhangfei融合蛋白的方法优于谷胱甘肽琼脂糖凝胶纯化法,Zhangfei融合蛋白具有良好的免疫原性。     

CD58对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的调节

采用IL-2的生物学测定方法，IL-4、TGF-β1、TGF-β2试剂盒等方法，对正常妊娠组山羊妊娠早期（15-19d)子宫局部细胞因子IL-2、IL-4、TGF-β、TGF-β2水平（活性）的变化规律进行了研究，结果发现，妊娠早期山羊子宫两侧局部细胞因子水平（活性）无显著性差异，IL-2活性先上升，后出现下降趋势；IL-4水平一直呈上升趋势；TGF-β1水平较高，但呈不规则曲线变化；TGF-β2先上升，后趋于平稳，并保持在较高水平。证明妊娠早期山羊子宫局部细胞因子分泌及活性有一动态变化规律。对CD58处理后山羊妊娠16-18d子宫局部上述细胞因子水平（活性）与同期正常妊娠相比的变化情况的研究发现，CD58极显著抑制IL-2的产生，而明显促进IL-4的产生，对TGF-β2的产生具有一定促进作用，而对TGF-β1无影响，证明CD58对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的产生具有调节作用。