基于宿主诱导的基因沉默技术创制抗拟轮枝镰孢玉米自交系

【目的】拟轮枝镰孢（Fusarium verticillioide）是一种主要的病原真菌,侵染玉米可以导致穗粒腐病、茎腐病、苗期根腐病及引起种子腐烂。由拟轮枝镰孢引起的病害不仅影响玉米的产量和品质,而且其病原菌代谢过程中产生的伏马菌素等多种真菌毒素严重威胁了人畜安全。通过宿主诱导的基因沉默（host-induced gene silencing,HIGS）技术创制抗拟轮枝镰孢的玉米种质,为玉米抗病育种提供新的优异抗源。【方法】通过同源克隆方法克隆可能与拟轮枝镰孢生长发育相关的关键基因,并通过体外转录获得相应的dsRNA片段;将不同基因的dsRNA与拟轮枝镰孢的分生孢子悬浮液预混后,用于后续的体外RNA沉默试验;对感病玉米自交系西502的种子进行消毒与接种,在培养皿中28℃避光培养48 h,调查种子的发病程度;在混有dsRNA的孢子悬浮液中加入葡萄糖,25℃培养24 h后,在显微镜下观察孢子萌发与菌丝生长情况;将三叶期的西502幼苗转移至预混dsRNA的孢子悬浮液中进行培养,7 d后观察苗期根腐病发病状况;通过种子鉴定与苗期鉴定体系,逐步筛选具有显著抑制效果的沉默靶标基因;合成筛选出的重点靶标基因片段,构建沉默载体并转化感病玉米自交系西502;对转基因株系的种子接种鉴定,验证转化玉米株系的抗性;提取接种后转基因种子的总RNA,对拟轮枝镰孢的靶标基因进行荧光定量分析,确定HIGS株系的沉默效果。【结果】从拟轮枝镰孢中克隆出18个与其生长发育相关的候选基因;通过种子接种鉴定,发现11个候选基因被沉默后,种子的发病等级极显著降低;进一步筛选出6个沉默后影响拟轮枝镰孢的孢子萌发和菌丝生长的候选靶标基因deo、Ras2、Dpdc、Hsp90、Frp1和Atg15;通过苗期接种鉴定,最后筛选出3个在体外具有显著抑制效果的沉默靶标基因deo、Atg15和Frp1;进而将3个靶标基因的特异区段人工融合成一段序列并构建沉默载体,获得转基因植株;鉴定发现转基因植株的T₂代种子对拟轮枝镰孢的抗性显著增强,且3个靶标基因的表达量均显著下降。【结论】拟轮枝镰孢基因deo、Atg15、Frp1与其生长发育密切相关,且沉默后能够显著提升玉米对拟轮枝镰孢的抗性。     

闽东渔场带鱼资源变动初探

本文阐述了闽东渔场带鱼的现状,对带鱼资源衰退原因作进一步分析,提出强化资源保护的意见和建议。     

乳山湾东流区细菌数量的分布及与环境因子关系的研究

根据1995年6～9月对乳山湾东流区的微生物调查资料，研究了乳山湾东流区海水及底泥中细菌和弧菌量的变化及其与环境因子的关系。结果表明，该海域海水中细菌和弧菌的数量变化与温度的变化相一致，6月中旬～8月中旬，细菌数量增长比较缓慢，8月中旬开始，细菌数量增长较快，到8月底，达到最高值，异养菌为5．71×106cell／mL，弧菌为2．1×104cell／mL。而后，随着温度的下降，水中的细菌量逐渐减少。滩涂底泥中，细菌和弧菌的数量均比海水中细菌高l～2个数量级。     

秋冬季黄东海区影响鳀鱼行动分布的三大水系变化特征

依据中国和挪威联合进行的黄东海渔业资源声学评估调查资料，并结合历史研究成果，分析了对鱼行动分布有着显著影响的三大水系（黄海冷水团、黄海暖流和苏北沿岸冷水）的变化特征。结果表明，三大水系均具有明显的年际变化。（1）黄海冷水团的温盐性质比较稳定，但其相对体积强年（1986年11月）约为弱年（985年11月）的144倍；（2）黄海暖流的流速强年（1986年1月）约为弱年（1992年正月）的1．21倍；（3）苏北沿岸冷水以3月份势力最强，其强度1985年1月大于1986年1月。     

钻井噪声与振动对鲤鱼生长的影响

采用剪标记法，现场模拟测定了钻井噪声与振动对鲤鱼生长的影响，研究结果表明，钻井噪声与振动对鲁鱼生长有显著影响，其临界等效噪声级和振动级约为８３．９dB和８９.7dB,影响域径约为９m，污染持续时间，体重和群居行为等生态因素，能显著改变钻井噪声与振动对鲤鱼生长的污染效应，由在污染消失后鲤鱼生长率能迅速恢复，这说明钻井噪声与振动鲤鱼的生长的污染效应，由于在污染消失后鲤鱼生长率能迅速恢复，这说明钻井噪声与振动对鲤鱼的影响机制可能是合理的。     

东南太平洋智利竹(竹夹)鱼渔业生物学的初步调查研究

根据在东南太平洋的探捕调查 ,对所渔获的智利竹鱼 (Trachurus murphyi)群体的构成、叉长与体重的关系 ,年龄与生长的关系和性腺发育等基本生物学特征进行了初步探讨。结果显示 ,渔获智利竹鱼的叉长范围为 1 45～ 61 0 mm,体重范围为 42～ 1 95 0 g,年龄组成为 2～ 1 3龄 ,3～ 4龄鱼为优势群体 ,初次性成熟年龄为 3龄 ,不同年龄个体性腺成熟的节律差异明显     

白令海阿留申海盆区夏季理化环境特征及其与狭鳕分布和移动的关系

１９９３年６～８月，“北斗”号渔业资源调查船在白令海阿留申海盆区进行了狭鳕资源声学调查及渔场环境调查。应用本航次调查资料，本文阐述了调查海区温度、盐度及溶解氧分布特征，并分析了狭鳕分布和移动与理化环境的关系。结果表明：（１）阿留申海盆区为大面积低温水所覆盖，水温在１０℃以下。温盐水平分布特征为公海区低温高盐，调查区的其余水域则为高温低盐。溶解氧水平分布比较均匀，表层溶氧含量在１０ｍｇ／Ｌ左右；（２）温跃层位于２５米和５０米之间，一强冷水团控制着１００米到２００米左右的水层，其水温在３℃以下。盐度随深度增加而增加，溶解氧随深度的增加而降低；（３）狭鳕当年生幼鱼主要分布在海盆水系和东大陆架水系的混合区内，１００米层幼鱼密集区水温在３～５℃，盐度在３２．９～３３．１，溶解氧在８～９ｍｇ／Ｌ；（４）夏季狭鳕成鱼主要在冷水团范围以内垂直移动，２００米层成鱼密集区水温为３～４℃，盐度为３３．２～３３．６，溶解氧为６～８ｍｇ／Ｌ。     

花生增产喷肥是关键

在花生中后期喷施叶面肥,是取得花生优质高产的一项有效措施。适用的叶面肥及施用方法如下: 磷酸二氢钾 为高效磷钾复合肥,在花生开花结荚期喷施,可满足花生果针发育的需要,促进光合产物的输送和果针的膨大,增加饱果数,提高粒重和含油量,同时可防止早衰,具有显著的增产效果。一般用浓度为0.2％的磷酸二氢钾溶液喷叶2次,每次每667平方米喷肥液50～75千克。如叶片脱氮发黄,可与0.5％的尿素、4000倍的802溶液混合喷施。 硼肥 硼能促进花粉萌发,有利于传粉受精;提高花生着果率,同时还能增加叶绿素,增强光合作用,促进物质     

法推广强紫外线保鲜新技术

强烈的紫外线照射能够破坏人体内脱氧核糖核酸结构,导致人体罹患皮肤癌。法国卡莱纳公司和美国马克斯韦尔公司的科学家正是由此得到启发,决定联合生产强紫外线发生器,利用紫外线能够改变脱氧核糖核酸结构的特性,对农产品进行强紫外线照射,通过破坏残留的细菌、病毒、酵母菌等微生物的脱氧核糖核酸而达到杀灭的目的,使农产品得以长时间储存、保鲜。 强紫外线发生器的关键技术是它使用氙灯发射出紫外线占20％的强光,强度比自然光高出2万多倍。与普通的热处理和电离处理方法不同,紫外线光照处理不会使农产品出