基于GC/TOF-MS技术对流感感染小鼠粪便代谢组学的研究

为了探讨小鼠感染流感病毒后粪便代谢物的变化情况,寻找潜在生物标志物及相关的代谢通路,本研究运用气相色谱-飞行时间质谱联用技术(GC/TOF-MS)检测对照组和病毒组小鼠的粪便。结果显示:在正交偏最小二乘法分析(OPLS)模型中,对照组与病毒组的得分图呈现明显差异,病毒组中一些代谢物发生了显著性的改变。α-酮戊二酸、甲硫氨酸、果糖-6-磷酸、苯丙氨酸、草酸、乳糖、棕榈酸、正缬氨酸、腺嘌呤、胆固醇、葡萄糖-6-磷酸、油酸、甘油、十五烷酸、β-丙氨酸等代谢物显著降低,而L-苹果酸、天冬氨酸、乳酸等代谢物显著上升。结论:病毒组与对照组之间存在脂类代谢、氨基酸代谢及糖代谢的差异,代谢组学的研究可以为流感病毒引起的肠道损伤机制提供新的依据。     

猪肺炎支原体抗体胶体金免疫层析检测方法的建立

旨在建立猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)抗体胶体金免疫层析检测方法,从而快速地对Mhp的感染和免疫情况进行监测,预防和控制猪支原体肺炎传播。通过柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,确定Mhp特异性抗原P46蛋白的最适标记pH和标记浓度并进行标记,作为金标液。将P46蛋白包被检测线T线,抗P46蛋白单抗包被质控线C线,组装检测试纸条。经优化,建立可同时用于Mhp血清抗体和黏膜抗体检测的胶体金免疫层析检测方法。利用该检测方法对76份临床血清样品和40份临床鼻拭子样品进行检测,并与ELISA检测结果进行比较。用该试纸条检测血清样品时,灵敏性、特异性、重复性较好,与商品化Mhp ELISA抗体检测试剂盒符合率为96.1%;该方法检测呼吸道鼻拭子样品时,存在微弱的非特异性反应,检测结果与本实验室建立的sIgAELISA检测方法符合率为87.5%。本研究成功建立了Mhp抗体胶体金免疫层析检测方法,整个过程只需10 min。检测血清样品具有较好的特异性和灵敏性,检测鼻拭子样品时特异性还有待提高。     

氯丙嗪和赛庚啶对黄羽肉种鸡产蛋性能的影响

黄羽肉鸡是利用我国地方优良的三黄鸡品种经过系统选育后培育的专门化肉鸡种群,其肉鸡产品具有皮肤黄、肉味香的特点,非常适合我国及东南亚地区消费者的消费习惯,近年来饲养规模得到不断扩大.     

兔神经肽W及其受体NPWR1基因克隆及分布定位

【目的】研究神经肽W（NPW）及其受体1（NPWR1,GPR7）mRNA 在兔各器官组织的表达情况。【方法】利用基因克隆方法克隆出兔神经肽W及其受体的cDNA序列片段,以GAPDH 为内参基因,采用相对定量RT-PCR 方法检测NPW及NPWR1 mRNA 在兔体内各组织中的表达情况,用原位杂交方法研究NPWR1阳性细胞在兔脑的分布定位。【结果】克隆出兔NPW及其受体NPWR1的基因部分序列,NPW基因片段长234 bp,NPWR1基因片段长508 bp,GenBank 登录号分别为HQ596517和HQ596518;经DNAStar软件分析,不同物种之间NPW及其受体基因序列的同源性较高。NPW及其受体在兔各组织广泛分布;NPWR1 mRNA在脑内主要分布于海马、小脑、下丘脑、延髓等部位。【结论】兔NPW及其受体基因在进化上是保守的;NPW及其受体在兔体内广泛表达,提示其参与多种生理功能的调节。     

神经肽W和神经肽B的研究进展

神经肽W和神经肽B是近年发现的一种神经肽,为G蛋白耦联受体GPR7和GPR8的内源性配体。神经肽W和神经肽B及其受体(NPB-WR)广泛分布于中枢神经和其他组织器官,具有调节摄食行为、能量平衡、神经内分泌、炎性痛觉等作用,可能还具有调节应激反应、情绪、焦虑和恐惧等作用。     

出雏前后蛋鸡和肉鸡血清中甲状腺激素水平的比较

用放射免疫分析法测定了出雏前后肉鸡（ＡＡ）和蛋鸡（伊莎）血清中总甲状腺激素（Ｔ３,Ｔ４）和游离甲状腺激素（ＦＴ３,ＦＴ４）的水平,结果表明：肉鸡和蛋鸡血清总Ｔ３水平在１４胚龄和１８胚龄时较低,１日龄时显著上升,肉鸡表现尤为突出。今后 Ｔ３水平的变化在品种间有所不同,肉鸡从１日龄到１０日龄斩下降,１日与５日龄差异显著;恧旧鸡１日龄至５日龄Ｔ３水平显著升高,除１日龄肉鸡Ｔ３水平显著高于蛋鸡外,其它日龄     

猪下丘脑开胃素 A的分布定位

用免疫组织化学方法研究了5头苏钟猪下丘脑内开胃素(orexin) A的分布.结果表明,在猪下丘脑内,开胃素 A免疫阳性神经元分布于下丘脑的视前内侧区、室周核、室旁核、视上核、背内侧核、穹隆周核、乳头体核、前区、外侧区和后区等部位,以下丘脑外侧区、乳头体核和视上核出现的免疫阳性神经元最多,以室周核的最少.这一结果与在其他动物上获得的基本相似.     

副结核分支杆菌Hed蛋白的抗原性分析及在间接ELISA中的应用

从副结核分支杆菌K-10菌株克隆出840 bp的hed基因片段,插入原核表达载体pET-32a(+),转化至Escherichia coliBL21(DE3),在0.8 mmol.L-1 IPTG诱导下进行表达,纯化重组蛋白,将其进行Western-blot分析、小鼠免疫试验,包被ELISA板,建立间接ELISA方法。结果显示:重组蛋白具有良好的抗原性,方阵滴定法确定了间接ELISA方法的抗血清最佳稀释度(100倍)和抗原包被浓度(4.4μg.mL-1),该方法具有较好的特异性和敏感性。     

猪下丘脑开胃素 A的分布定位

用免疫组织化学方法研究了5头苏钟猪下丘脑内开胃素(orexin)A的分布。结果表明,在猪下丘脑内,开胃素A免疫阳性神经元分布于下丘脑的视前内侧区、室周核、室旁核、视上核、背内侧核、穹隆周核、乳头体核、前区、外侧区和后区等部位,以下丘脑外侧区、乳头体核和视上核出现的免疫阳性神经元最多,以室周核的最少。这一结果与在其他动物上获得的基本相似。