应用普通PCR与实时荧光标记PCR技术检测玉米子粒中转基因成分的比较

对比普通PCR法和实时荧光标记PCR法检测玉米子粒中转基因成分的检测效率,外源基因选取调控元件Ca MV35S启动子、NOS终止子、BAR、Cry IA(b)基因。普通PCR法在进行PCR扩增反应、电泳检测和凝胶成像后,进行结果判定;实时荧光标记PCR法的结果数据由Ct值判定,在一定范围内符合要求的数据即判定有效。通过两种方法比较,与普通PCR方法相比,实时荧光标记PCR法具有检测时间短、检测效率高、对环境造成的污染小等特点。     

应用PCR技术对广西规模猪场母猪流产病料主要疫病混合感染的流行病学调查

应用PCR和RT-PCR技术,对2005-2006年送检的广西22个规模猪场的母猪流产病料176份进行猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）混合感染情况的调查。结果,176份病料中检出CSFV阳性样品21份,阳性率11.9%,PRRSV阳性样品37份,阳性率21.0%,PRV阳性样品14份,阳性率8.0%,PPV阳性样品35份,阳性率19.9%;其中有45份样品存在不同程度的混合感染,混合感染阳性率达25.6%。结果表明,我区规模猪场母猪流产病料CSFV、PRRSV、PRV和PPV的感染和混合感染情况比较严重,提示广西近年来母猪发生繁殖障碍性疾病的病因与CSFV、PRRSV、PRV和PPVSV的感染密切相关,是今后广西规模猪场重点防范的主要疫病。     

长江中下游稻茬小麦超高产群体干物质积累与分配特性

为给长江中下游稻茬小麦超高产(>9 000 kg·hm-2)生产提供理论与实践依据,以中筋小麦新品种扬麦20为材料,通过氮素运筹(氮肥施用量、施用时期和比例)和基本苗调控建立稻茬小麦不同产量水平群体,研究超高产群体干物质积累与分配特性。结果表明,合理调控拔节期至孕穗期及适量增加孕穗期至开花期群体干物质积累量,在开花期干物质积累适量的基础上,重点促进花后干物质积累量,增加成熟期干物质积累量,是长江中下游稻茬小麦实现超高产的关键。稻茬小麦超高产群体开花期干物质积累量为12 800～13 600 kg·hm-2,花后及成熟期干物质积累量分别达7 200、20 000 kg·hm-2以上。开花期群体叶片干物质积累量与花后、成熟期干物质积累量呈抛物线关系,茎鞘、穗干物质积累量与成熟期干物质积累量呈极显著线性正相关,表明开花期叶片干物质积累量达到3 300～3 400 kg·hm-2,茎鞘、穗干物质积累量分别达7 500、2 000 kg·hm-2以上,有利于提高群体花后干物质积累量和产量。     

吐鲁番地区葡萄节水现状调查与对策

以现场勘察和农户访谈的形式,对地区两县一市具有代表性的9个葡萄种植基地节水情况现状进行调查,联合会诊节水项目实施过程中出现的问题,从滴灌系统存在的技术缺陷,农民在滴灌条件下对葡萄地管理方法的适用性,政府的节水政策和基础研究几个方面寻找原因,评议总结,寻求改进葡萄地节水技术的对策、措施.     

应用PCR方法对广西公猪精液的伪狂犬病、圆环病毒2型和细小病毒混合感染情况的检测

应用PCR技术,2006年对广西11个猪场的公猪精液235头份进行猪伪狂犬病(PRV)、圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)混合感染情况的检测。结果,235份样品中PRV阳性率为5.53%,PCV2阳性率为17.02%,PPV阳性率为13.62%;PRV与PCV2、PPV均存在不同的混合感染现象。结果表明,我区公猪精液PRV、PCV2和PRV带毒情况比较严重,成为当前造成母猪繁殖障碍和规模场猪群发病的主要原因,这将为今后种猪场对PRV、PCV2和PRV的控制与净化工作提供了依据。     

应用Pull-down方法获得鸡B-LB分子中结合恒定链的活性片段

本研究旨在探明鸡(Gallus gallus)主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅱ类分子(B分子)中与恒定链(invariant chain,Ii)结合的活性片段,以了解和深入研究Ⅱ类分子与Ii在递呈抗原肽中的作用机理.从实验室保存的B-LB基因的cDNA克隆了3个结构片段分别插入原核和真核表达质粒,再将其分别转染或者与li共转染工程菌Rosetta (DE3),诱导表达后先后用亲和层析和拉下法(pull-down)、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测其纯度和形成的复合物.然后用免疫印迹(Western blot)验证复合物的性质以及真核表达验证这些片段在细胞内的表达和定位.首先,构建的3个重组质粒pGEX-4T-1-B-LB-Sβ1、pGEX-4T-1-B-LB-β1和pGEX-4T-1-B-LB-β2TC均能单一表达目的蛋白B-LB-Sβ1、B-LB-β1和B-LB-β2TC,并被纯化.其次,在共表达和pull-down中,B-LB-Sβ1和B-LB-β1能够与Ii形成复合物,而B-LB-β2TC不能与Ii结合,因为免疫印迹的结果表明,特异性抗体能识别在poll-down中被结合的这两个目的蛋白.最后在真核表达系统中,也证实B-LB-Sβ1、B-LB-β1能保持B-L分子在293T细胞的浆膜系统定位的功能,而B-LB-β2TC却丧失了该定位功能.本研究结果首次提供了Ⅱ类分子结合Ii的活性片段的证据.     

山核桃FLOWERING LOCUST同源基因的克隆与序列分析

根据不同植物FLOWERING LOCUST（FT）同源基因序列的保守区,设计合成1对长度为18bp的PCR简并引物,以山核桃基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出长度为152bp的DNA片段,克隆到pMD19-T载体上。测序及序列分析结果表明,扩增所获得的片段序列为FT基因第四外显子部分序列,不含内含子,推测共编码50个氨基酸;其序列在GenBank中注册号为FJ858260．1,同源性比对结果表明,其氨基酸序列与其他植物FT基因的同源性高达88％～96％。     

浅谈高层建筑地下连续墙施工要点

文章简述了地下连续墙的工艺原理、分类,以及地下连续墙施工中常见的问题及处理措施,并结合工程实例,分析了地下连续墙施工质量控制措施,以供参考。     

几种药剂防治稻纵卷叶螟效果对比试验

用10%阿维·甲氧虫酰肼悬浮剂等7种药剂防治稻纵卷叶螟,对比防效和安全性。结果表明院10%阿维·甲氧虫酰肼悬浮剂600mL/hm2、3.2%阿维菌素乳油1 200 mL/hm2、31%丙溴磷·甲氨基阿维菌素苯甲酸盐乳油1 500 mL/hm2这3种药剂防治纵卷叶螟速效性好,对低龄幼虫有较好的防效;10%稻腾悬浮剂300 mL/hm2+18%杀虫双水剂450 mL/hm2持效性较好。     

谷欢等对稻田萤蔺的防治效果

通过谷欢等4种药剂进行苗后茎叶化除防治水稻田萤蔺药效对比试验,结果表明,每667 m2施用46%谷欢水剂130~260 mL、48%苯达松水剂200~400 mL,在药后7 d防效达97.7%~99.7%和99.7%~99.8%;药后30 d防效达98.2%~99.6%和94.0%~99.7%;药后30 d的鲜重防效均达99.1%以上。说明试验药剂对萤蔺都有较好的防除效果,且对水稻安全。