辣蓼黄酮提取物的急性毒性和亚慢性毒性研究

【目的】 明确辣蓼黄酮提取物的毒理作用,评价其安全性。【方法】 在急性毒性试验预试验中,选取20只健康SPF级昆明系小鼠,随机分为6组,对照组(0 g/kg BW)和辣蓼黄酮提取物1~5组(灌胃给予辣蓼黄酮提取物20、10、5、2.5和1.25 g/kg BW),连续观察7 d,记录小鼠中毒和死亡情况。在急性毒性试验的最大给药量试验中,对20只小鼠分3次在24 h内按照30 g/kg BW灌胃给药,观察其生理状态,中毒情况及有无死亡情况,于试验第8天剖检观察其脏器有无异常情况。在亚慢性毒性试验中,取80只健康SPF级SD大鼠,随机分为4组,对照组(0 g/kg BW)和辣蓼黄酮高、中、低剂量组(分别灌胃给予辣蓼黄酮提取物20、10和5 g/kg BW),每组20只大鼠(雌、雄各半),喂养30 d,记录其体重、摄食量和饮水量。停药第7天,采血进行血常规和血液生化指标检查,计算其脏器指数,并进行组织病理学检查。【结果】 急性毒性试验各剂量组小鼠均未出现死亡情况,无法得出辣蓼黄酮提取物的半数致死量(LD₅₀),小鼠对辣蓼黄酮提取物的最大耐受量为30 g/kg BW,说明辣蓼黄酮提取物安全无急性毒性。亚慢性毒性试验中,各给药组大鼠体重、饮水量、采食量及脏器系数与对照组虽有差异,但在正常范围内。给药30 d血常规指标中,与对照组相比,高剂量组大鼠白细胞及淋巴细胞显著下降(P<0.05),中性粒细胞显著上升(P<0.05);中剂量组大鼠白细胞显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01);其余各组之间无显著差异(P>0.05)。血液生化指标中,与对照组相比,高剂量组大鼠甘油三酯(TG)水平显著上升(P<0.05),尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、总胆红素(TBIL)水平显著下降(P<0.05);中剂量组大鼠BUN水平显著下降(P<0.05),CREA水平显著上升(P<0.05),低剂量组大鼠谷丙转氨酶(ALT)、TG水平显著上升(P<0.05),BUN水平显著下降(P<0.05),其余各组间均无显著差异(P>0.05)。剖检和病理学检查未见明显异常变化,说明辣蓼黄酮提取物安全无亚慢性毒性。【结论】 5 g/kg BW及以下的辣蓼黄酮提取物无毒副作用,安全性好。     

马尾藻多糖对猪脾细胞免疫活性及其抗病毒活性的影响

采用MTT法测定不同浓度马尾藻多糖(Sargassum polysaccharide,SP)对正常猪脾淋巴细胞体外增殖及其感染猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)后培养活性的影响,并用Griess和ELISA法分别检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)、白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的水平。试验结果表明:25～400μg.mL-1的SP能协同伴刀豆球蛋白(ConA)显著促进T淋巴细胞体外增殖,400μg.mL-1的SP显著促进脂多糖(LPS)刺激的B淋巴细胞体外增殖活性。SP提高正常猪脾细胞体外培养不同时间段的NO分泌量,与对照组比较,差异显著(P<0.05);不同浓度SP提高PRRSV感染的猪脾细胞体外培养分泌NO量,与病毒对照组比较,培养8 h时200μg.mL-1SP、12 h时100～400μg.mL-1SP、24 h时100μg.mL-1和400μg.mL-1SP均能显著地促进NO分泌(P<0.05)。400μg.mL-1SP极显著促进体外培养的猪脾细胞分泌IL-2(P<0.01),100μg.mL-1和400μg.mL-1SP显著促进PRRSV感染猪脾细胞IL-2和IFN-γ的分泌。结论:马尾藻多糖通过促进猪脾细胞增殖和分泌NO、IL-2和IFN-γ来调节免疫细胞活性和抗病毒能力。     

辣蓼黄酮正丁醇部分对脂多糖诱导内毒素血症小鼠的保护作用

为探讨辣蓼黄酮正丁醇部分(FNB)对内毒素血症小鼠炎性细胞因子的影响,采用酶解-超声偶联法提取辣蓼全草中的总黄酮,结合大孔树脂纯化富集获得辣蓼正丁醇部分黄酮,通过不同剂量的FNB作用于脂多糖(LPS)刺激所诱导的小鼠内毒素血症模型,测定丙二醛(MDA)、MPO、T-AOC、T-SOD、GSHPX、GSH、LZM、ACP及炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素(IFN,IFN-α、IFN-γ)、白介素-2(IL-2)水平。结果表明,FNB能通过提升小鼠肝脏的抗氧化防御酶促体系的活性,减少LPS刺激所诱导的促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的释放,降低肺部TNF-α、IFN-α、IFN-γ以及IL-2mRNA的表达水平。说明一定浓度的FNB能减轻LPS诱导的内毒素血症对小鼠的损伤,改善生存率。     

针刺后海穴对小鼠脾NK细胞活性影响

针刺后海穴对小鼠脾ＮＫ细胞活性影响黄庆洲，张为民，胡庭俊（中国农业科学院中兽医研究所，兰州７３００５０）孟宪松（中国农业科学院科研部）后海穴注射疫苗，能促进疫苗的免疫力，已为我们过去的实验证实。在后海穴的免疫促进机理方面，研究发现后海穴能增强小鼠腹腔...     

“连藤”中草药添加剂对广西三黄鸡血液生化、免疫及抗氧化性能的影响

试验旨在探讨连藤中草药添加剂对广西三黄鸡血液生化、免疫及抗氧化能力的影响。480羽1日龄广西三黄鸡随机分4组,每组6个重复,每重复20羽。其中,A、B、C组为试验组,在基础日粮中添加0.1%、0.2%和0.4%连藤添加剂;D组为对照组,饲喂基础日粮。试验期70 d。分别于试验21、35、49 d从每组抽取6羽静脉采血,分离血清,测定生化、免疫及抗氧化指标。结果显示,连藤添加剂不同添加量对广西三黄鸡3个阶段的血清葡萄糖、甘油三酯、总蛋白、总胆固醇、尿素氮含量无显著影响(P>0.05),但A、B组35 d白蛋白含量极显著高于D组(P<0.01),B组49 d白蛋白含量显著高于D组(P<0.05)。A组49 d免疫球蛋白M含量显著低于D组(P<0.05)。A、B组49 d白细胞介素-2含量显著高于D组(P<0.05)。A、B、C 3组49 d总抗氧化能力极显著高于D组(P<0.01),B组35 d总抗氧化能力显著高于D组(P<0.05)。A、B组49 d谷胱甘肽含量极显著高于D组和C组(P<0.01)。B、C组35 d总超氧化物歧化酶活性显著高于D组(P<0.05)。日粮添加0.2%连藤中草药添加剂在一定程度上可以提高试鸡的免疫性能,显著提高鸡的抗氧化能力。     

海藻多糖可溶性粉饲料在增强猪瘟疫苗免疫效果上的临床应用

为验证海藻多糖可溶性粉临床试验的疗效,将35～45日龄的健康猪180头,随机平均分为3组,分别为猪瘟疫苗+海藻多糖可溶性粉组(100 mg/kg饲料)、猪瘟疫苗对照组、黄芪多糖粉对照组,连续给药7 d,于疫苗接种及首次用药后的14、28 d,每组随机选择10头猪进行采血,分离血清,检测猪瘟免疫抗体效价。结果发现在用药后第14 d,海藻多糖组猪瘟抗体滴度合格率高于猪瘟疫苗对照组,在用药后第28 d,海藻多糖组合格率为100%,高于猪瘟疫苗对照组和黄芪多糖粉对照组,说明海藻多糖可溶性粉能提高猪瘟疫苗免疫的抗体效价,且安全性好。     

中兽药制剂三黄连散抗炎作用的研究

为明确三黄连散(SHLP)体内和体外抗炎效果,体外试验采用CCK-8法筛选三黄连散对RAW264.7细胞安全浓度,同时建立LPS诱导RAW264.7细胞的体外炎症模型,以评价药物效果;体内试验用二甲苯诱发小鼠急性炎症模型,测定小鼠耳郭肿胀度、脏器指数及小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和COX-2含量。结果显示,三黄连散对RAW264.7细胞的安全浓度为50 μg/mL;高、中、低剂量的三黄连散能不同程度降低细胞IL-8、TNF-α、IL-β、COX-2的分泌水平(P<0.05,P<0.01);高剂量的三黄连散能极显著降低细胞上清液中NO的分泌水平(P<0.01);高、中、低剂量的三黄连散均可极显著降低模型小鼠耳郭肿胀和血清炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和COX-2分泌水平(P<0.01);不同浓度三黄连散对小鼠脏器系数无显著影响(P>0.05)。综上表明,三黄连散体内外抗炎效果显著。     

禽用抗感染免疫活性多糖的筛选实验

采用小鼠为实动物,以攻击强毒的方法,从数种多糖中筛选出８３０１多糖,给小鼠肌注,较对照组延长存活时间３６ｈ,该多糖具有较强的抗禽巴氏杆菌感染的作用。