黄喉拟水龟人工孵化技术的研究

通过设置不同的温度、湿度、孵化介质及黄喉拟水龟受精卵的排列方式,研究黄喉拟水龟受精卵人工孵化所需的条件.结果表明:黄喉拟水龟受精卵的孵化积温为49 896～55660℃,最适孵化温度为25～30℃,孵化介质的含水量以8%～10%较适宜.用1:1的沙土混合物作为孵化介质孵化率最高.卵的大小及排列方式对卵的孵化率影响不明显.25℃恒温孵化时,雄性稚龟的比例为77.8%,33℃恒温孵化,雌性稚龟的比例为92.9%.     

蚓激酶基因在大肠杆菌中的表达

[目的]实现蚓激酶基因在大肠杆菌中的高效表达。[方法]采用RT-PCR技术,以含蚓激酶基因的质粒pMD18-Tf3为模板进行RT-PCR扩增,克隆了蚓激酶基因Tfc,并进行测序,之后将蚓激酶基因Tfc克隆到大肠杆菌表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5α,用LB培养基于30℃培养24 h后,然后调温至42℃继续培养2 h诱导蚓激酶基因表达,收集菌体,进行SDS-PAGE电泳,利用纤维平板法检验蚓激酶的活性。[结果]测序发现该基因全长729 bp,共编码243个氨基酸,GenBank登录号为EU167735。SDS-PAGE电泳表明诱导表达后菌体总蛋白在28 kD处有一特异性条带,而含空质粒pBV220的大肠杆菌经诱导表达后无该条带,表达蛋白主要以包涵体形式存在,无纤维蛋白酶活性。[结论]该研究为创新蚓激酶的生产工艺提供了依据。     

终霜冻对新疆北疆地区酿酒葡萄冻害和产量的影响

针对中国西北葡萄与葡萄酒优势产区酿酒葡萄在萌芽生长过程中易受终霜冻危害的问题,研究终霜冻对葡萄嫩梢(萌发芽)发育、产量等影响,为减轻终霜冻危害和科学防御提供依据。2008年终霜冻发生时以新疆玛纳斯河流域酿酒葡萄基地为重点,调查酿酒葡萄不同品种、萌芽期、出土时间、结果母枝长度等因素下的终霜冻害发生情况、产量变化及灌溉、烟熏等的防霜冻效果。结果表明,赤霞珠、霞多丽、佳美、晚红蜜和贵人香葡萄嫩梢(萌发芽)对终霜冻(低温)的忍耐力基本相同,而不同发育阶段的嫩梢对低温的忍耐力存在较大差异,处于绒球期和未萌动的芽忍耐力最强。结果母枝留芽量、葡萄园灌水和烟熏对赤霞珠晚霜冻害的影响不大,而推迟出土时间可明显减轻赤霞珠受终霜冻的危害程度。终霜冻导致酿酒葡萄产量大幅下降,多数葡萄园减产超过40%。春季推迟葡萄出土时间是减轻终霜冻害的有效措施。     

广州动物园科研工作的历史、现状与展望

科学研究工作是动物园的主要职能,广州动物园在20世纪60年已开展濒危野生动物人工辅助繁育技术的研究,取得"大熊猫营养腹水症的研究"等许多重要的学术成果,现已形成20多人的学术研究团队。但与先进动物园相比,广州动物园在科研人才数量、实验室的建设、科研投入和特色动物种群等方面存在明显差距。广州动物园需要正视差距,着重引进高层次人才,搭建粤港澳大湾区生物多样性开放性研究平台,充分发挥科研人才的作用,在国家生态文明建设与粤港澳大湾区建设中做出卓越的贡献。     

三维电极法处理模拟制药废水研究

利用三维电极处理模拟盐酸利多卡因和苯甲酸钠制药废水,单因素研究表明,主电极间距、电解时间、电解电压及处理废水量等因素都对三维电极处理模拟制药废水效率有显著影响;通过正交试验分别得到了三维电极处理模拟盐酸利多卡因废水、苯甲酸钠废水的最佳条件,在各自的最佳条件下,对利多卡因废水的降解率为62．55％、CODCr去除率为63．5％,对苯甲酸钠废水的降解率为59．40％、CODCr去除率为61．9％,且不同降解时间2种废水的紫外光谱发生了显著变化;动力学研究表明,三维电极降解利多卡因反应动力学表现为二级反应,降解苯甲酸钠的反应动力学表现为三级反应;2种废水按不同比例混合后,在三维电极处理盐酸利多卡因的最佳条件下,混合废水中盐酸利多卡因、苯甲酸钠降解率分别提高到70．75％和61．65％,在三维电极处理苯甲酸钠的最佳条件下,处理效果均比单一废水时降解率降低。     

鬼鲉早期发育阶段的摄食节律与饥饿致死时间

采用实验生态学方法研究鬼鲉(Inimicus japonicus)早期发育阶段的摄食特性和仔鱼饥饿致死时间.结果表明,仔鱼和营游泳生活的稚鱼摄食高峰出现在白天,并以白天摄食为主,6日龄仔鱼、17日龄营游泳生活稚鱼的摄食率高峰为10:00和14:00.随着生活习性的转变,其摄食节律也发生明显变化,稚鱼和幼鱼在营底栖生活方式的阶段,以夜间摄食为主,另一摄食小高峰出现在早晨.进入底栖生活阶段的29日龄稚鱼、40日龄幼鱼的摄食高峰为22:00和6:00.鬼鲉仔、稚、幼鱼各阶段的日摄食率分别为:6日龄仔鱼69.7%,17日龄稚鱼57.7%,29日龄稚鱼42.3%,40日龄幼鱼17.7%.在饥饿条件下鬼鲉初孵仔鱼、1、3、5、8和10日龄仔鱼的全部死亡时间分别为192 h、216 h、168 h、80 h、178 h和264 h,半数死亡时间分别为144h、120 h、120h、60h、108 h和144h,说明5日龄仔鱼是鬼鲉早期发育中最为敏感的阶段.饥饿仔鱼呈现头大、体短、身瘦、体色发白等形态特征,行为上表现为游动缓慢,反应迟钝和静卧底部.长期饥饿后仔鱼脑后部下陷明显,其形态特征可作为判断仔鱼饥饿致死的重要指标.     

疏穗处理对‘赤霞珠’葡萄果粒大小及花色苷积累的影响

疏穗(花序或果穗)是调节产量和负载量的一项葡萄园田间管理措施,广泛应用于优质葡萄生产中,不同时期和程度的疏穗对果实产量和品质影响不同。本研究于2011年以新疆玛纳斯县广东地和园艺场2个地块2000年定植的‘赤霞珠’葡萄为材料,在果实第1个膨大期(花后约3周)分别进行1穗/新梢(CT1)、1.5穗/新梢(CT2)和2穗/新梢(CT3)3个程度的疏穗处理。在采收期对产量相关指标和花色苷进行测定。结果表明,在广东地,3种疏穗处理间平均果穗质量无显著差异,CT1与CT2、CT3相比,产量分别下降48%和65%;在园艺场,3种疏穗处理间平均果穗质量亦无显著差异,但CT3处理的平均果粒质量低于CT1和CT2。将采收期的果粒按质量分为5级,在广东地,果粒大小主要分布于≤0.84g、0.85~1.14g和1.15~1.44g3个质量级次中,在≤0.84g质量级次中,CT1处理果粒所占百分数分别比CT2和CT3低12.4%和18%;在园艺场,果粒大小主要分布于0.85~1.14g、1.15~1.44g和1.45~1.74g 3个质量级次中,在≤0.84g质量级次中,CT3处理的果粒所占的百分数分别比CT2和CT1高18.3%和15.6%。说明疏穗处理后,果粒有增大的趋势。利用HPLC-MS检测各质量级次花色苷的质量分数和组成,发现不同大小的果粒以及经过不同程度疏穗处理的果粒中花色苷的质量分数间存在差异。随着果粒的增大,甲基化花色苷和酰化花色苷的质量分数及总花色苷的每果粒质量(以mg/kg果实鲜质量表示)逐渐降低。在广东地,随着疏穗程度的提高,总花色苷、甲基化花色苷和酰化花色苷的每果粒质量(以μg/果粒表示)和质量分数(以mg/kg果实鲜质量表示)逐渐增加。对不同疏穗处理下果粒各种花色苷的质量分数进行主成分分析显示,地块对果实中花色苷的积累影响较大。     

马来穿山甲源嗜水气单胞菌亚种的分离鉴定及生物学特性分析

为鉴定马来穿山甲(Manis javanica)腿部致病菌并研究其致病性、耐药性和耐药基因,从救护的1只马来穿山甲腿部溃烂处采集样品,无菌分离培养致病菌,进行形态学观察、革兰氏染色及16S rRNA和gyrB基因测序分析,并开展细菌药敏试验和小鼠致病性试验,随后通过PCR扩增6种毒力基因(rtxA、earA、hlyA、alt、act、epa)及19种耐药基因(5种β-内酰胺酶相关基因、6种氨基糖苷类修饰酶基因、6种氯霉素耐药基因、2种磺胺耐药基因)。结果显示:分离的1株优势菌为革兰氏阴性短杆菌,经16S rRNA和gyrB基因测序以及序列进化树分析鉴定为嗜水气单胞菌亚种(Aeromonas dhakensis),其gyrB基因序列与马来西亚分离株高度同源,推测此致病菌可能由非法走私的穿山甲从马来西亚携带至我国。药敏试验显示,其对头孢曲松、头孢克肟、庆大霉素和氧氟沙星等药物敏感,对青霉素、阿莫西林、头孢氨苄、头孢克洛、氯霉素、磺胺甲恶唑、甲氧苄啶和林可霉素耐药。4种耐药基因tem、aac(3)-II、flor、sul2为阳性,与抗生素耐药表型相符。4种毒力基因earA、hlyA、alt、act为阳性,小鼠半数致死量为3.75×10^(6 )CFU/mL。根据药敏结果使用敏感抗菌药物治疗穿山甲,其腿部患处有好转。因此,引起穿山甲腿部溃烂的病原嗜水气单胞菌亚种(Aeromonas dhakensis)可能为国外传入菌株,具有较强的致病性和多重耐药性。本研究为嗜水气单胞菌的流行病学调查及其感染的防治提供了依据。     

猪磷酸二酯酶4B2的原核表达和活性鉴定

使用RT-PCR方法扩增猪磷酸二酯酶4B2基因,将其克隆到表达载体,经PCR和测序鉴定的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白表达。结果显示,目的基因片段大小为1718 bp,与GenBank公布的猪PDE4B2基因序列同源性为99.7%。表达的重组蛋白以包涵体和可溶性蛋白两种形式存在。Western blotting检测结果表明,蛋白质大小约为66 ku,通过液相检测重组蛋白的cAMP-PDE活性为51.46%。制备的多克隆抗体有良好的特异性,为进一步检测天然蛋白PDE4B2和筛选PDE4B2的特异性抑制剂奠定了基础。     

寒区封闭引水渡槽中水温变化预测分析

甘肃引洮供水工程由于两条供水管线末端均不具备建设大型调蓄设施的工程条件,通过延长总干渠供水时间来解决调蓄不足的问题必须考虑冬季输水。针对这一实际问题,根据传热传质理论,建立了流固耦合对流换热三维数值模型,通过数值计算结果与室内模型试验结果进行对比研究,验证了数值模型的可靠性,表明其模型可用来对寒区封闭性渡槽内部水体在低温环境条件下的温度变化进行了预测分析。分析结果表明,虽然渡槽内水温与渡槽内的流量、入口水温、流速及环境温度等因素有关,但由于该渡槽结构及保温措施设计合理,并且有效控制水体在渡槽内的运行时间,水温降低幅度并不大,保证了在低温季节时水体在渡槽运行过程中水温不低于0℃,可有效防止渠体在寒区低温运行时结构冻害及冰灾现象的产生,进一步确保了封闭性渡槽的冬季输水安全。可为其它寒区引水工程的合理设计及安全运营提供科学参考。