猪中性粒细胞磷酸二酯酶基因表达及活性研究

 【目的】通过对猪中性粒细胞磷酸二酯酶（PDE）基因表达、活性及特异性抑制剂实验检测，研究其存在的主要PDE亚型及在体外的活性，为探讨PDE在中性粒细胞的分布、活性变化及对cAMP、cGMP调节与中性粒细胞功能关系提供依据。【方法】采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测PDE基因在猪中性粒细胞的表达，以高效液相色谱（HPLC）检测环核苷酸在PDE反应前后的含量变化，计算PDE活性。【结果】在检测的18个PDE亚型中，PDE1B、2A、3A、3B、4A、4B、4C、4D、5A、7A、7B、8A、8B、9A、11A 共15个PDE mRNA在猪中性粒细胞表达，特异性抑制剂实验表明PDE4、PDE5分别为水解cAMP、cGMP的主要PDE亚型；cAMP/cGMP-PDE在10～40 μl范围内，与其活性存在良好的线性关系（r＝0.9929/0.9992）。【结论】猪中性粒细胞至少存在15个PDE亚型，其中PDE4、PDE5为主要存在的2个亚型，PDE样品量在一定范围内与其活性存在良好的线性关系，可作为筛选PDE型中性粒细胞功能调节剂的方法。     

绞股蓝无糖口含片的制备工艺

经过筛选处方和优化工艺,采用湿颗粒法研制了新型绞股蓝无糖口含片,并对其质量进行了评价。结果表明,绞股蓝浸膏粉、甜味剂、清凉剂的用量及润湿剂的浓度等因素对口含片的质量有较大影响。当以70%乙醇作润湿剂,15%绞股蓝浸膏粉、77%甘露醇、4%阿斯巴甜为材料,再添加上述混合料总量的0.1%薄荷脑和3%硬脂酸镁,60℃的干燥温度,可制得口感好、有绞股蓝特有风味、表面光滑美观、色泽一致、硬度好、崩解性良好、具有保健功能的新型绞股蓝无糖口含片。     

肉松粉、羽毛粉和肉骨粉替代鱼粉养殖奥尼罗非鱼的效果研究

试验研究了肉松粉、羽毛粉和肉骨粉替代鱼粉池塘养殖奥尼罗非鱼的效果研究。24 000尾(349±28.3)g奥尼罗非鱼分为4组,每组设计3个平行试验区域,每2 000尾饲养于2×667 m2左右的实验区域中。对照组和1、2、3试验组日粮分别以鱼粉、肉松粉、羽毛粉和肉骨粉设计蛋白质水平为28%左右,消化能为2 670～2 810 Kcal/kg。在水温(28.2±2.8)℃饲养60 d。试验结果:①奥尼罗非鱼的相对生长率,食物转化率肉松粉组鱼粉组肉骨粉组羽毛粉组,差异显著(P0.05)。由于单位鱼成本不同,肉松粉组养殖效益为对照组的132.46%,肉骨粉组为对照组的96.60%,羽毛粉组为对照组的80.51%。②奥尼罗非鱼体水分,灰分含量差异不显著(P0.05);蛋白质含量鱼粉组肉松粉组肉骨粉组羽毛粉组,鱼粉组显著性高于肉骨粉和羽毛粉组(P0.05);脂肪含量肉骨粉组羽毛粉组肉松粉组鱼粉组,前3组显著性高于鱼粉组(P0.05)。③奥尼罗非鱼肥满度,脏体比,肝体比无显著性差异(P0.05),仅肉骨粉组肠脂比及肝脂肪含量最高,羽毛粉组最低,显著性差异(P0.05)。在池塘养殖中,饲料中使用肉松粉替代鱼粉可明显降低成本,提高经济效益。在罗非鱼饲料中使用部分肉骨粉和羽毛粉是安全的。     

水稻恢复系航天育种的研究

通过航天育种途径对中稻恢复系明恢63、838、752等进行改良,选育出航98、SP90010、SP134、SP143等强优恢复系,并与不育系配组育成了SP优Ⅰ98、丰优航98、中九优10、G4优10等高产、优质、抗性强的杂交组合。     

12种中草药的体外抑菌试验

1 材料 1.1 药物 千里光、火炭母、蒲公英、鱼腥草、白头翁、金银花、松针、杜仲、黄芩、野菊花、苦参、大蒜等,均购自当地药材市场.     

小熊猫源犬瘟热病毒株H、F基因的克隆及序列分析

为了解1株圈养小熊猫源犬瘟热病毒（CDV）GD-1的遗传变异情况,通过RT-PCR方法对该株CDV进行H、F基因的克隆、测序及序列分析。结果显示：该分离株的H基因序列与GenBank中丹麦报道的登录号为GU266280的犬源CDV毒株的核苷酸序列相似性最高,为96%;F基因序列与巴西报道的登录号为KY057355的犬源CDV的核苷酸序列相似性最高,为95.7%。下载CDV代表毒株序列进行遗传演化、氨基酸序列比对及分子特征分析。结果显示：H蛋白共有8个潜在的N-糖基化位点,分别位于19、149、309、391、422、456、587、603位点;H蛋白的SLAM受体结合位点氨基酸序列与欧亚野生型毒株一致,与疫苗株相比,530、549位氨基酸不同,与其他CDV参考毒株H蛋白相比还存在24、41等9处氨基酸位点发生明显变异,与标准强毒株A75/17的氨基酸相似性为95.2%,与Onderstepoort、Convac等5株疫苗株的氨基酸序列相似性为88.2%~89.3%;F蛋白共有6个N-糖基化位点,分别位于62、108、141、173、179、517位,与Onderstepoort等疫苗株氨基酸相似性为89.1%~89.7%;与其他参考毒株相比还存在115、130等11处氨基酸发生变异;构建基于H、F基因的遗传进化树,结果显示：该毒株位于Asia-4型的一个小的进化分支,这与目前我国流行毒株主要位于Asia-1型存在明显不同。本研究首次报道了小熊猫源的Asia-4基因型CDV野毒株,并对毒株的H及F基因进行了序列分析,对于了解我国CDV流行株的遗传变异情况、流行病学调查、疾病防控及疫苗研发等具有重要意义。     

斑鼻羚毛首线虫ITS序列的PCR扩增及分析

以茂名野生动物园斑鼻羚体内分离出的毛首线虫为研究对象,用保守引物PCR扩增其核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(ITS)和5.8 S序列,并进行克隆、转化、测序和序列分析,对样品进行分子鉴定.结果获得2个毛首线虫样品的ITS及5.8 S rDNA序列,总长为1 316 bp,样品间序列相似性为99.2%.将序列与G...     

猪呼吸道疾病综合症病原谱分析及防控原则

猪呼吸道疾病综合症(Porcine respiratory disease complex,PRDC)由多种因素综合作用而引起,发病率高,给集约化生猪养殖造成了巨大的经济损失。通过对美国、丹麦、中国近几年的PRDC病原调查进行总结,发现在不同国家、不同地区,不同品种猪的PRDC病原谱存在差异。其中圆环病毒2型、蓝耳病病毒、猪流感病毒、肺炎支原体、胸膜肺炎放线杆菌是我国PRDC的主要病原,通过对5种主要病原致病机理的概括分析,绘制了PRDC发病机理图,并针对PRDC的防控提出了6点建议。     

华南虎源血巴尔通体的PCR检测

为了快速准确检测华南虎感染的血巴尔通体种类,我们根据已发表的猫血巴尔通体的16S rRNA基因序列,利用软件Primer Premier 5.0设计2对特异性引物,以华南虎源血巴尔通体基因组DNA进行PCR检测。2对引物分别扩增出1452 bp和170 bp的rDNA序列,1452 bp序列与GenBank~（TM）发表的3种猫血巴尔通体序列相似性分别为99.3%、91.7%和79.5%,而170 bp序列与序列AM748929的相似性为100%。实验结果表明华南虎感染的血巴尔通体为大型猫血巴尔通体,实验建立的PCR检测方法为华南虎血巴尔通体病的诊断及分子流行病学的调查提供了新的手段。     

绯红金刚鹦鹉毛滴虫和丝状真菌混合感染的诊断与治疗

禽类毛滴虫病是一种侵害上消化道的原虫病,主要感染幼鸽﹑鸽﹑鹌鹑﹑斑鸠和鹰,有时也感染鸡和火鸡,少见感染鹦鹉的报道。2004月3月以来,某场群养的绯红金刚鹦鹉(A ra m acao)陆续有8只出现以舌面覆有一层黄白色伪膜,咽部黏膜可见隆凸的柱状或多乳头状灰白色的增生物,嗉囊肿大,反复呕吐和极度消瘦等症状的感染性疾病,10天内3只绯红金刚鹦鹉先后因此死亡。通过发病情况调查、病理剖检和实验室检查,诊断为毛滴虫和丝状真菌混合感染。通过应用甲硝唑等药物治疗,鹦鹉的病情得到控制。1发病情况2004年3月份,该场从外地引进24只绯红金刚鹦鹉和蓝黄…