猪霍乱沙门氏菌的分离与鉴定以及PCR检测方法的建立

[目的]为了确定四川省某猪场初生仔猪大规模发病的原因。[方法]对发病仔猪进行细菌分离、培养特性及形态结构观察、生化鉴定、药敏试验、动物致病性试验和血清型鉴定,并建立PCR快速检测方法。[结果]从发病仔猪体内分离到1株优势菌,初步鉴定为沙门氏菌。根据沙门氏菌invB基因设计的1对引物进行PCR扩增,得到408bp的特异性条带,PCR产物经T-A克隆测序证实为invB基因,与参比序列具有非常高的同源性,说明该PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性。经血清学试验确定该分离株为猪霍乱沙门氏菌,毒力试验和药敏试验结果表明分离菌致病性很强,对头孢三嗪、氯霉素、氧氟沙星等敏感。[结论]该研究为沙门氏菌病原鉴定与疾病诊断提供了依据。     

猪细菌性传染病病原检测新方法研究进展

细菌性传染病是生猪养殖业的严重威胁之一,近年来其发病情况呈现出新变化,对动物产品质量和公共卫生安全造成严重危害。对病原进行快速、准确的检测,是预防和控制猪病的有效手段,对养猪业发展和人畜健康具有重要意义。伴随生命科学技术的发展和学科间的交叉融合,传统的病原菌分离培养、普通PCR方法和早期免疫学等检测技术均朝着精确高效的方向不断发展革新,并以传统方法为基础建立了多种新型检测技术。文章重点介绍了猪细菌性传染病病原检测的几种新技术:以核酸分子生物学为基础的实时荧光定量PCR法(qPCR)、环介导等温扩增法(LAMP)、夹心DNA杂交(DNAH)等;以免疫学为基础的免疫胶体金标记技术、时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)、免疫磁珠分离法(IMS)等;以蛋白质分子生物学为基础的细菌质谱鉴定技术;以及适用于现场快速诊断的即时检测(POCT)技术,并分析了这几种新技术的优缺点,为不同条件的检测机构和研究部门在开展猪细菌性传染病检测和研究时选择相应的方法提供一定的参考,以期在猪病预防控制中发挥更加积极的作用。     

五种牛羊口蹄疫疫苗免疫效果评价试验

疫苗免疫是防控口蹄疫的重要措施,我国对口蹄疫采取强制免疫政策。本试验在使用环节抽取了5批牛羊口蹄疫疫苗,按照国家口蹄疫免疫方案和疫苗说明书对30日龄左右的羔羊进行了两次免疫,抗体监测结果显示：二免后O型口蹄疫抗体合格率均在80%以上,Asia I型口蹄疫抗体合格率均高于75%,A型口蹄疫抗体合格率均高于70%,免疫效果均达到农业部规定的要求。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2主要抗原区域的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

本研究以高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HPPRRSV)重组NSP2蛋白为包被抗原,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。通过RT-PCR技术,从PRRSV SCMS08株中,成功扩增出NSP2的主要抗原区域。将其克隆到pET-32a(+),成功构建原核表达载体,并转化宿主菌(E.coli)Rosetta 2(DE3)。以镍柱纯化表达蛋白,SDS-PAGE检测证实重组蛋白获得了高效表达,Western blot检测表明所表达蛋白能够被抗组氨酸标签单克隆抗体和PRRSV阳性血清识别。以此蛋白包被酶标板,初步建立了PRRSV NSP2-ELISA诊断方法。优化的NSP2-ELISA的最佳抗原包被浓度为1.7μg·mL-1,血清的最佳稀释度为1∶40。用该方法检测185份血清样品,与IDEXX公司ELISA试剂盒检测结果符合率为90.8%。建立的间接ELISA方法敏感性高、特异性强,可用于猪繁殖与呼吸综合征的常规诊断及流行病学调查。     

施马伦贝格病毒对畜牧业的威胁

对2011年最早在德国发现的一种新病毒—施马伦贝格病毒的病原学、流行病学、诊断、预防与控制进行了综述。该病毒可引起牛、山羊、绵羊、野牛等动物发病,表现发热、腹泻、乏力、死胎和畸形胎、产奶量下降等临床症状,严重影响牲畜生产性能,对畜牧业产生不可忽视的威胁。     

一株四川株猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

猪传染性胸膜肺炎的病原为猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App),该菌为革兰阴性,有荚膜、菌毛和鞭毛,形态较小,呈多形性.近年来,全国很多省份都有猪传染性胸膜肺炎的发病报道.随着临床混合感染和细菌耐药性的增加,迫切需要对细菌进行分离鉴定,最终找到控制或消灭该病的方法.     

牛疱疹病毒4研究进展

国外早已对牛疱疹病毒4(BHV-4)做了广泛的研究,尤其是作为有潜力的病毒载体,它更是引起了诸多学者的兴趣,但国内尚未见对该病毒的深入研究.为了更加全面地认识该病毒,论文对BHV-4基本生物学、分子生物学特征及流行病学等方面做了较为全面的综述,以期对相关研究提供资料.     

贡蕉不同类型种苗对植株生长及产量性状的影响

贡蕉Musa‘Gong’是热带亚热带地区重要经济作物，其种苗主要有组培苗和吸芽苗，不同类型种苗对田间管理要求不同，从而影响植株生长和产量性状。采用贡蕉不同类型种苗，比较分析不同种苗生育期的生长指标和产量性状之间的差异，筛选优质种苗类型。结果表明，与组培苗相比，吸芽苗幼苗期内球茎高度、内球茎宽度、粗根系直径分别显著增加656.52%、393.06%和198.77%,抽蕾期假茎粗度、假茎高度、叶片宽度分别显著增加18.36%、16.82%和17.02%,采收期果穗质量、果指质量、果指背长、果穗长分别显著增加34.49%、32.01%、24.30%和17.76%。相关性分析发现，果穗质量与内球茎高度、内球茎宽度、果穗长、果指粗呈极显著正相关。说明自然条件下发育形成的吸芽种苗具有较大的球茎器官，养分贮存足，发苗快，植株长势强，更易丰产稳产，是优质种苗。