猪流行性腹泻病毒蛋白对Vero E6核蛋白B23.1的影响

为了解猪流行性腹泻病毒(PEDV)核蛋白N对Vero E6细胞核仁蛋白B23.1的影响,将本实验室构建的DsRed-N1/B23.1重组质粒转染Vero E6细胞,转染6h后接种PEDV,分别在转染后12、18h和24h三个时间点,进行病毒感染细胞的间接免疫试验,同时设未感染对照组,而后利用激光共聚焦显微镜分析感染和转染细胞中B23.1蛋白的变化。结果表明,PEDV N蛋白与Vero E6核蛋白B23.1有共定位特征,在PEDV感染Vero E6细胞12h后,B23.1蛋白开始发生变化,随着时间的延长逐渐碎裂、分散。这个结果提示,病毒可能通过破坏核仁的结构和核仁蛋白的功能,进而为病毒的复制提供便利。     

2011年～2012年G9型猪轮状病毒流行病学调查及VP7基因遗传进化分析

为分析G9型猪轮状病毒(RV)的遗传变异情况,本研究根据GenBank中VP7序列设计合成一对扩增VP7基因的引物,采用PCR方法对2011年～2012年分离的部分RV VP7基因进行扩增、克隆和序列测定,并进行比对和遗传进化分析.结果表明:531份病料中RV阳性份数为39,阳性率为7.34％;而在检测的121个猪场中,共有23个猪场显示阳性,猪场阳性率为19％.VP7基因全长1 062 bp,含有一个982 bp的开放阅读框,编码326个氨基酸.与参考病毒株VP7全长基因核苷酸比较,同源性为91.5％～99.3％.在31nt、56 nt、75 nt、82 nt、191 nt、215 nt等位置均存在点突变,无插入和缺失.核苷酸系统发育进化树表明:黑龙江省哈尔滨市、桦南、绥化,辽宁省大连市、内蒙古自治区采集病料样品的基因间差异较小,与采集自中国广西、浙江、贵州、北京的病料样品基因相比差异性较大,这表明VP7基因存在地域差异.     

奶牛大肠杆菌耐药性的监测与分析

为了调查哈尔滨地区奶牛的大肠杆菌耐药性情况,为临床合理用药提供参考,试验采用Kirby-Bauer纸片扩散法测定各分离菌株对18种抗生素的敏感性.结果表明:48株大肠杆菌分离株中,除1株为敏感菌株外,其余菌株对各种抗生素存在不同程度的耐药性;分离株中存在多重耐药现象,3耐及3耐以上的菌株占总菌株的53.19%;分离株对...     

2010—2011年仔猪腹泻的病因分析和防控措施

自2010年12月起,我国主要养猪省份相继出现了以哺乳仔猪腹泻和高死亡率为特征的猪病,给我国的养猪业造成了很大的经济损失,导致我国猪肉价格不断上涨。对于该次哺乳仔猪腹泻的病因众说纷纭,使广大猪场管理人员感到迷惑和恐慌。笔者多次和现地养猪场的管理人员、技术人员及哈尔滨维科生物技术开发公司的业务员进行交流,了解现地猪场的疫情,归纳总结了2011年哺乳仔猪腹泻病的特征。     

控制腹泻病的最有效措施之一返饲

根据PEDV为冠状病毒的病原特征、致病机理和流行性特征,认为合理的返饲是目前控制PED最有效的措施之一。返饲是一种原始的免疫方法,其原理是将感染仔猪的病毒通过口服的方法感染怀孕母猪,使其产生免疫抗体（类似于接种口服弱毒苗）,从而使新生仔猪可以通过母乳获得高滴度的母源抗体,以抵抗病毒的感染。     

长根菇化学成分及药理作用研究进展

综述长根菇的化学成分及其药理活性的研究进展。其主要含有蛋白质、氨基酸、脂肪、糖类、维生素、微量元素以及真菌多糖、三萜类、朴菇素、生物碱、牛磺酸、叶酸等多种营养成分。长根菇具有抗肿瘤、降血压、降血脂、改善肠道、抗菌和抗氧化等药理作用。     

轮状病毒的免疫研究

轮状病毒(Ro-tavirus,RV)属呼肠孤病毒科的成员,是引起婴幼儿和多种幼龄动物急性腹泻的非菌性腹泻的主要病原体。1973年Bishop等在澳大利亚从腹泻患儿十二指肠粘膜及粪便中发现了一种新的病毒粒子。不论在发展中国家或是发达国家,因严重腹泻住院的3岁以下病儿中有20%～70%是轮状病毒感染性腹泻,平均为33%。世界卫生组织报告,每年有70万或者说每天有2000婴幼儿死于轮状病毒腹泻,其中发展中国家占全部腹泻死亡数的25%。Woode等在1974年首次从猪分离出轮状病毒,我国阙玲玲1982年首先在台湾发现猪轮状病毒(Porcine Rotavirus,PRV),以后江苏…     

反向遗传操作研究进展

反向遗传操作(又称感染性克隆)为在DNA水平上研究RNA病毒的基因组结构及功能和病毒宿主相互作用提供了重要手段。文章综述了反向遗传操作的研究策略,包括全长克隆的获得、体外转录和病毒的挽救,概括了反向遗传操作在病毒分子生物学研究、疫苗的研制、基因治疗和重组载体中的应用,分析了当前反向遗传操作研究中存在的问题。     

ST细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

为了筛选与猪细小病毒（porcine parvovirus,PPV）结构蛋白VP2相互作用的宿主蛋白,深入研究病毒入侵及致病的分子机制,本试验建立了ST细胞酵母双杂交cDNA文库。采用RNeasy Min Kit提取ST细胞的总RNA,反转录合成cDNA第一链之后,通过SMART技术合成了双链cDNA,并利用同源重组的方法,构建了ST细胞的酵母cDNA文库。结果显示,文库滴度为8.1×10⁸ CFU/mL,插入的双链cDNA片段大小为250~1 000 bp,平均大小约为500 bp,文库的重组率为96%。此文库可用于筛选与病毒相互作用的ST细胞宿主蛋白,为进一步阐明病毒的致病机制奠定了基础。