转基因大豆GTS40-3-2转化事件特异性PCR检测

GTS40-3-2是抗草甘膦转基因大豆,为建立GTS40-3-2大豆转化体特异性PCR检测方法,本研究以GTS40-3-2标准品为实验材料,根据已公布转基因大豆GTS40-3-2基因与大豆基因组连接序列信息,利用Primer5.0软件设计了5对品系特异性引物,对每对引物进行了退火温度、特异性及扩增效率的PCR检测,结果显示,5对特异性引物均能够从GTS40-3-2中扩增出大小约279bp、238bp、470bp、490bp和257bp的预期产物,可用于特异性检测转基因大豆GTS40-3-2转化事件。以转基因大豆GTS40-3-2含量为5%、2%、1%、0.5%和0.1%的标准品进行PCR灵敏度检测,结果表明5对引物的检测灵敏度均能达到0.1%。通过荧光定量PCR对5对特异性引物的Ct值与溶解曲线比较,最后选择出RRS2引物对为转基因大豆GTS40-3-2品系特异性检测的最适引物。本文结果将为我国未来转基因生物产品成分检测提供科学合理的实验参考。     

碱裂解叶片两步快速制备PCR模板技术研究

广泛采用提取DNA作为PCR模板的方法主要有CTAB和SDS法2种,但步骤烦琐、耗时长。根据Taq酶储存液和PCR反应缓冲液所含K+离子、Cl-离子和Tween-20等成分,以0.05mol/LKOH为强碱裂解物、2%Tween-20为稳定剂配制碱裂解液,以0.05mol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸(Tris-HCl)和2mmol/LEDTA为中和液,经加热裂解和中和两步制备PCR模板。以甘蔗叶片为材料,用新鲜配制含KOH和Tween-20的裂解液,将适量叶片放入一定体积的裂解液中加热裂解,再中和,形成裂解混合物。直接以裂解混合物为模板,甘蔗内源基因为靶基因,在优化KOH裂解浓度、模板体积、加热裂解时间以及添加适量聚合酶稳定剂的情况下,PCR反应稳定,重复性强。以有代表性的单子叶和双子叶植物叶片为材料,经过多种内源基因PCR反应的反复验证,证实了这种方法的广泛适用性。该方法通过两步制备PCR模板,无需DNA提取过程,使用材料少,可以实现活体PCR检测,为遗传分析和分子诊断提供简便、快速和高效的分析方法。     

灌瓶机不锈钢托瓶支架加工工艺分析

针对ASY1/20塑料安瓿制瓶、灌装、封口一体机不锈钢托瓶支架零件机械加工工艺方案的确定方法、理论依据及对各加工工序所需的工装夹具设计进行了详细的阐述。同时,在机械加工中不锈钢材质零件属难加工材料,就如何确保零件的加工质量和提高加工效率,对切削用的刀具材料、参数选择及加工工艺进行探讨,并在实际生产中得到了应用,有效的提高产品质量和经济效益。     

利用RAPD技术进行甘蔗育种亲本辅助选择

本研究利用RAPD技术对甘蔗杂交育种的亲本组合进行选配和评价。对31份甘蔗种质材料的遗传背景进行了RAPD分析,根据农艺性状和遗传距离选择CP72-1210和湛74-121两份材料作为杂交亲本,从该组合的F1代群体中随机选取85个株系,分析了其农艺性状分布和遗传多样性,显示出F1群体具有广泛的分离,重组优良基因型的概率很大,初步说明利用RAPD技术可进行甘蔗杂交亲本的辅助选择。     

转基因番木瓜 55-1 转化事件定性 PCR 检测方法的建立

为了防止国外商业化生产的转基因番木瓜流入国内市场,建立转基因番木瓜 55-1 转化事件定性 PCR 检测方法,对于保护国内消费者知情权意义重大。本研究以转基因抗环斑病毒番木瓜 55-1 为研究材料,利用外源基因和番木瓜基因组序列设计了 9 对特异性检测引物,通过特异性引物筛选、熔解曲线分析、退火温度优化、特异性验证、灵敏度分析及检测限验证,建立转基因番木瓜 55-1 转化事件定性 PCR 检测方法。结果表明：本研究筛选出的检测引物,可特异的检出转基因番木瓜 55-1 转化事件,引物的检测灵敏度达到了 0.1%的标准,高于欧盟0.9%的检测要求,完全可满足转基因检测标识制度的顺利实施。     

服务主导型高职图书馆的涵义与构建

为适应服务型教育体系的需求,构建服务主导型高职图书馆成为高职图书馆发展的必然趋势。从服务主导型高职图书馆的基本涵义、特点、体系构建等3个方面进行了系统阐述。      

球磨机高通量提取甘蔗叶片DNA研究

简便快速地获得高质量、高纯度的DNA模板是进行分子遗传学研究和大批量分子检测的基础。常用的液氮手工研磨提取DNA方法存在着耗时、费力、污染等诸多不足。利用从美国引进的球磨机,根据甘蔗叶片的特点,采用国产钢珠,通过优化实验步骤,建立了一种高通量制备甘蔗叶片DNA的方法,其中,叶片快速研磨使用不锈钢珠的直径为4 mm,对叶片进行液氮预冻,时间为30～45 min,叶片用量为50～100 mg,打磨时间为30～40 s。这种方法缩短了提取DNA的时间,提高了效率,而DNA质量与经典方法相当,能够满足分子生物学研究的需要。     

转基因植物及其产品PCR检测引物的筛选研究

建立了一种转基因植物及其产品PCR检测引物筛选方法。以转基因大豆Roundup Ready为材料,设计了5对引物,通过荧光定量PCR方法对其扩增产物的Ct值、引物与模板的结合效率、PCR产物的溶解曲线方面进行分析,证明RRS2引物对是转基因大豆Roundup Ready最佳品系特异性检测引物。     

特色乳的功能活性研究进展

与牛乳相比,特色乳的营养物质含量丰富,具有多种生物活性,如抗菌活性、抗肿瘤活性和缓解疲劳作用等,但消费者对特色乳的营养价值了解较少,其产量、市场占比与消费量均较低.目前特色乳研究主要集中在对营养成分的分析及单一的功能活性,忽略了特色乳中所有功效成分的整体效果,对特色乳的功能活性成分、生理作用及作用机制缺少系统研究.本文...     

服务主导型高职院校图书馆吸引力初探

文章从服务主导型高职院校图书馆吸引力的内涵及现状出发,从外延和内涵两个方面探讨高职院校图书馆吸引力缺失的原因,并提出提升高职院校图书馆吸引力的几点对策。