昆虫死亡素thanatin与斑点叉尾鮰β-防御素在毕赤酵母中的表达及其抑菌效果评价

旨在利用毕赤酵母表达系统表达出具有良好抑菌效果的重组抗菌肽。选定昆虫死亡素thanatin基因和斑点叉尾鮰β-防御素基因(命名为defbl),按毕赤酵母偏好性密码子优化后，将用T2A剪切肽连接的共表达基因(命名为TD)及各单基因分别构建至pMD19-T载体上，经EcoRⅠ、SalⅠ双酶切后亚克隆至表达载体pPICZɑA上，经SacⅠ线性化后电转化至毕赤酵母GS115感受态细胞中，通过Zeocin抗性及PCR筛选出阳性菌株，利用1%甲醇进行诱导表达，72 h后收集培养基上清液，冻干浓缩并纯化后，进行Western blot检测及体外抑菌试验、溶血性试验。结果显示，成功构建重组毕赤酵母工程菌株GS115-pPICZαA-thanatin、GS115-pPICZαA-defbl和GS115-pPICZαA-TD,通过甲醇诱导成功获得重组蛋白，纯化后Western blot检测结果显示，thanatin组和defbl组分别在2.3 kDa和7.8 kDa处出现特异性条带，TD组同时出现上述2条带，蛋白大小均与预期相符；3个重组蛋白浓度分别为600、300和700μg/mL;体外抑菌试验及溶血性...     

黄梁木提取物对断奶仔猪肠道健康的影响

旨在研究黄梁木提取物对断奶仔猪生长性能、腹泻状况、免疫功能及肠道健康的影响。试验选用24日龄体质量相近(6.57±0.05) kg的杜长大三元杂交断奶仔猪96只，采用完全随机化法分为2个处理组，每个处理组4个重复，每个重复12只仔猪。2组处理分别为空白对照组(BAS组，基础日粮)和黄梁木提取物组(EXT组，基础日粮+200 mg/kg黄梁木提取物)。试验期28 d。结果显示，相较BAS组，EXT组仔猪腹泻率显著下降(P<0.05),平均日增体质量显著提高(P<0.05)。BAS组和EXT组仔猪血清生化相关指标差异不显著(P>0.05)。EXT组仔猪血清中免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)的含量显著高于BAS组(P<0.05),且空肠及回肠中IL-10的表达也显著提高(P<0.05)。与BAS组相比，EXT组仔猪空肠的绒毛高度及绒毛高度与隐窝深度的比值显著提高(P<0.05),同时回肠的隐窝深度显著降低(P<0.05)。与BAS组相比，ACP仔猪结肠中ACE指数和不动杆菌属(Agathobacter...     

野性堪察加 只属于少数人的风景

<正>俄罗斯堪察加半岛是全球火山活动最为频繁的地区之一,堪察加边疆区20年前才对外开放,始终保持着原生自然状态。作者四次进入堪察加半岛拍摄,见识了各种极致的火山风景,也得以目睹棕熊和虎鲸惬意的生活画面。     

耐密植玉米品种宁研503的选育及全程机械化栽培技术要点

宁研503是山东金诺种业有限公司、济宁市农业科学研究院于2010年以L21为母本、JNl6为父本杂交选育的玉米品种，具有耐密植、抗逆能力强、适应范围广、产量高、品质优、兼作饲料及粮食用途、后期脱水快、适合机械化收获等优点，于2019年通过山东省审定。本文作者对宁研503的亲本来源、选育过程以及品种的综合性状表现进行了阐述，经过摸索集成了一套适合在山东地区推广的全程机械化绿色生产配套技术，以实现玉米生产的提质增效。     

钙处理对巨峰葡萄贮藏品质的影响

以4年生避雨设施栽培巨峰葡萄为试材,分别采用糖醇钙和硝酸钙两种不同类型的钙肥,叶面、果穗喷施及叶面、果穗喷施结合根际灌施两种施肥方式,研究对采后贮藏期间巨峰葡萄果实品质的综合影响。结果表明:叶面、果穗喷施结合根际灌施1 500倍糖醇钙肥处理的果穗质量、果粒质量、可溶性固形物含量、硬度和好果率均显著高于对照,贮藏期间果梗褐变程度显著低于对照,钙处理对适度延缓巨峰葡萄采后衰老进程,延长贮藏保鲜时间有积极作用。     

共表达MEL和Ec-cLYZ重组表达质粒的构建及其重组蛋白的抑菌效果评价

为了表达一种高效低毒的广谱抑菌蛋白，试验通过T2A连接肽连接蜂毒肽(MEL)与斜带石斑鱼c型溶菌酶(Ec-cLYZ)基因，并克隆至pPICZαA质粒上构建重组表达质粒；将鉴定正确的重组表达质粒用限制性内切酶SacⅠ线性化后电转化至毕赤酵母表达菌株GS115感受态细胞中，构建毕赤酵母表达菌株；利用0.5%甲醇诱导表达，收集上清液进行冻干浓缩并纯化，采用Western-blot法检测重组蛋白的表达情况，BCA蛋白浓度测定试剂盒测定重组蛋白浓度，试管二倍稀释法分别检测不同浓度重组蛋白对兔红细胞的溶血活性，牛津杯法评价重组蛋白的抑菌效果。结果表明：成功构建出重组表达质粒pPICZαA-Ec-cLYZ-MEL、pPICZαA-Ec-cLYZ和pPICZαA-MEL及毕赤酵母表达菌株GS115/pPICZαA-Ec-cLYZ-MEL、GS115/pPICZαA-Ec-cLYZ和GS115/pPICZαA-MEL;经甲醇诱导，GS115/pPICZαA-Ec-cLYZ-MEL表达出分子质量为16.5,3.4 ku的重组蛋白，GS115/pPICZαA-Ec-cLYZ表达出分子质量为16.5 ku的重...     

基于转录组测序挖掘广西麻鸡生长发育相关基因

【目的】通过对1和60日龄广西麻鸡腿肌进行转录组测序(RNA-Seq),筛选出广西麻鸡生长发育关键基因。【方法】选择1和60日龄健康母鸡各3只,分别采集腿肌组织,利用Illumina Novaseq^TM 6000平台进行mRNA转录组测序,利用DESeq2软件进行差异表达基因的分析,并对差异表达基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,进一步筛选出生长发育相关基因,并用实时荧光定量PCR验证转录组测序结果。【结果】转录组测序结果显示,6个样本分别获得34 296 198~41 647 642条clean reads。与1日龄腿肌相比,60日龄腿肌共获得2 304个差异表达基因,其中998个基因上调,1 306个基因下调。GO功能富集分析发现,共获得富集条目572条,其中生物过程381条,细胞组分70条,分子功能121条。KEGG通路富集分析发现,共获得34个显著富集的信号通路,其中心肌收缩、MAPK信号通路、紧密连接、肌动蛋白细胞骨架信号通路、心肌细胞中的肾上腺素能信号传导等与生长发育相关。通过GO功能和KEGG通路富集分析获得5个生长发育相关基因,分别为肌球蛋白重链10(MYH10)、肌球蛋白链15(MYH15)、成纤维细胞生长因子10(FGF10)、成纤维细胞生长因子16(FGF16)、肌肉生长抑制素(GDF8)基因,其中MYH10、MYH15、FGF10为上调差异表达基因,FGF16和GDF8为下调差异表达基因。所选差异表达基因实时荧光定量PCR结果与转录组测序的基因表达水平一致,说明转录组测序结果可靠。【结论】本试验通过对广西麻鸡1和60日龄2个不同生长阶段进行转录组测序分析,获得MYH10、MYH15、FGF10、FGF16、GDF8共5个与生长发育相关的关键基因,为后续进一步探讨广西麻鸡生长发育的分子调控机制提供参考。     

大围山国家森林公园药用植物资源调查与分析

为了初步明确湖南省浏阳市大围山国家森林公园药用植物资源的概况及特点，并为该地区药用植物资源保护和可持续发展提供建议和参考，通过野外实地考察和标本采集，对大围山国家森林公园药用植物资源进行了调查和分析，共采集药用植物117种，隶属于52科和102属。大围山国家森林公园药用植物以草本为主，有85种，占72.65%;其次是木本植物，有21种，占17.95%;藤本植物和寄生植物较少，分别只有10种和1种。117种药用植物中，菊科植物的丰富度最高，占18.80%。用药部位有很强的多样性，主要以全草入药，占46.15%。在药用功效上以清热解毒为主，占50.43%。50种被《中国药典》收录，4种被列入世界珍稀濒危药材资源，2种属国家二级保护野生植物，2种为湖南省地方重点保护野生植物。大围山国家森林公园的药用植物资源非常丰富，应该在加强保护的前提下合理开发利用。