米黑根毛霉脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达及酶学性质研究

根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子使用偏爱性,对米黑根毛霉脂肪酶(RML)成熟肽基因进行全面密码子优化,以提高RML基因在酵母细胞中表达的水平,并对重组脂肪酶的酶学性质进行了研究。运用重叠延伸PCR合成优化后的RML成熟肽基因,并进一步构建毕赤酵母表达载体p PIC9K-RML,通过电击法转化毕赤酵母GS115菌株,经G418抗性和PCR筛选获得高拷贝转化重组子。重组酵母菌用0.5%甲醇诱导异源基因表达,在28℃摇瓶培养168 h后酶活力达到122 U/m L,较未优化的原始菌株的表达酶活提高了10倍。重组脂肪酶最适温度为45℃,最适p H值为7,甲醇体积分数为40%以下时重组RML具有较好的稳定性。     

耿马甘蔗种植区土壤速效养分状况分析

为了解甘蔗产区土壤养分状况,并根据养分丰缺情况进行合理科学的施肥,最终实现甘蔗高产高糖,笔者对云南省甘蔗种植面积最大的耿马县进行土壤取样分析,共采集了737份土样检测养分含量。研究结果显示：耿马县甘蔗种植区95%以上的土壤属酸性土壤,60%以上的土壤有机质含量属于中上水平,70%以上的土壤碱解氮属于中上水平,80%上的土壤有效磷属于中下水平,严重缺磷,70%以上的土壤速效钾含量属于中下水平,缺钾。对照高产高糖甘蔗栽培技术土壤要求,耿马县甘蔗施肥建议稳氮、增磷、增钾。     

烟草骨干亲本主要病毒病抗性鉴定及遗传多样性分析

【目的】评价烟草骨干亲本主要病毒病抗性,分析抗病骨干亲本间的遗传多样性,明确不同抗源间的亲缘关系,为烟草病毒病抗性改良的亲本选择提供理论依据。【方法】在温室条件下采用苗期人工接种方法,对中国烟草育种过程中73份骨干亲本进行CMV、TMV和PVY 3种病毒病抗性鉴定,以CMV高抗、或TMV免疫、或PVY免疫为筛选标准,筛选抗病骨干亲本;并利用条带单一清晰、多态性稳定且分布在烟草24条连锁群上的103对SSR引物,对筛选出的抗病骨干亲本和烟草育种常用的4个主体优质亲本进行遗传多样性、聚类和主坐标分析。【结果】（1）不同供试材料间3种病毒病抗性存在显著性差异。在筛选出的29份病毒病高抗或免疫的烟草种质中,有23份种质对CMV表现为高抗,6份种质对TMV表现为免疫,5份种质对PVY表现为免疫。同时,在29份筛选出的烟草病毒病抗病种质中,龙烟1号和FC8对TMV和PVY都表现为免疫,CV87、T.T.11、抗88、CV91、胎里富1060、革新5号和T.I.245等7份种质对3种病毒病都表现为高抗。（2）对鉴定出的29份抗病骨干亲本以及K326、NC89、Speight G-28和净叶黄等4个烟草育种最常用主体亲本进行基因型分析,共筛选出322个等位位点,每对引物的等位变异为2-6个,平均为3.106个;基因型多样性变化范围是0.059-0.716,平均为0.387;引物多态性信息（PIC）含量为0.057-0.661,平均为0.343。当遗传相似系在0.672取值作切割线时,系统聚类分析将33份供试材料分为7个类群;当遗传相似系数在0.714取值作切割线时,第1类群又被分为4个亚群,其中第1亚群包括了全部供试外引抗病亲本种质和育种最常用外引亲本K326、NC89和Speight G-28,而国内抗病亲本种质分类相对较多。主坐标分析可将33份材料分为6个类群,外引抗病种质被分在第1类群和第2类群中,其中第1类群包括了8份引进抗病亲本种质和3份育种最常用外引亲本K326、NC89和Speight G-28,第2类群有3份外引种质和11份国内种质;而国内抗病亲本种质分类较多。聚类分析结果和主坐标分析结果基本一致,与种质亲缘关系吻合度较高。【结论】苗期人工接种方法对烟草骨干亲本的病毒病抗性鉴定准确,筛选出29份烟草病毒病抗病骨干亲本;外引抗病骨干亲本种质与K326、NC89和Speight G-28的亲缘关系较近,遗传背景狭窄;中国抗病种质地理来源广泛,遗传背景复杂,遗传基础较为丰富。     

杨梅果蝇综合防治技术研究

从农业、物理、生物防治的角度出发,对昆明地区为害杨梅的果蝇进行综合防治技术研究,结果表明,果蝇对颜色无明显趋性,对气味较敏感,对水、糖、醋、酒比例为10∶6∶3∶1的糖醋液趋性最强;生物源杀虫剂0.3%印楝素乳油300倍液、600倍液,2.5%多杀菌素悬浮剂600倍液对为害杨梅的果蝇均具有较好防效,且对果品安全;及时清除地上落果并运出果园集中处理,也是较好的农业防治措施。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒垂直传播及其危害研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染引起的繁殖障碍在妊娠早期表现为母猪受胎率低、不规律返情及孕早期流产;怀孕后半期流产、早产,产死胎、木乃伊胎及弱仔等。先天感染的仔猪抵抗继发感染的能力低,可持续排毒并感染周围的阴性动物。PRRSV穿过胎盘屏障感染胎儿很可能是经巨噬细胞/单核细胞介导的,并在母胎界面造成病理损伤,病毒在胎儿着床点的复制可能是导致胎儿死亡和母猪流产的原因。预防PRRSV垂直传播必须控制母猪感染PRRSV,缩短已感染母猪的病毒血症持续时间,此外,通过生物安全、限制猪群流动和严格的消毒措施控制水平传播,通过疫苗免疫和药物保健消除易感动物。作者概述了妊娠各阶段母猪感染PRRSV发生垂直传播的情况及其后续的繁殖障碍。     

南方规模化奶牛场草基循环农业模式研究

针对奶牛养殖快速发展带来的资源浪费和环境污染问题,探讨了南方规模化奶牛场循环农业模式并提出了相关策略。提出养殖场粪污(包括奶牛粪、尿和养殖废水)是造成环境污染的主要因子,牧草是消纳养殖场粪污,变废为宝,构成循环利用链的主要载体。因此南方规模化奶牛养殖可以就地取材、就近利用,构筑形成草基循环农业模式。草基循环农业模式结合规模化奶牛养殖对鲜草需要量大、杂交狼尾草产量高且对奶牛场污水氨氮吸收率高的三大因素而构建,是低耗高效、安全优质、清洁生态的循环农业模式。     

添加黑麦草饲粮对鹅肉脂肪酸组成的影响

本研究旨在观察饲粮中添加不同比例多花黑麦草(Lolium multiflorum Lam)对鹅肉脂肪酸组成影响,揭示牧草摄食量与鹅肉α-亚麻酸(ALA)相对含量之间的关系。选用50羽14日龄长乐灰鹅,分成5个处理,饲养期60 d。各处理饲粮中黑麦草干物质比例分别为: 0.00%(CK),5.42%,11.92%,19.52%和27.24%。结果表明:随着饲粮中黑麦草比例的提高,鹅肉ALA相对含量显著增加,试验各组分别比对照组增加了86.90%,197.24%(P<0.05),393.10%(P<0.05)和304.83%(P<0.05);PUFA/SFA显著上升(P<0.05);n-6PUFA/n-3PUFA显著下降(P<0.05)。鹅肉ALA相对含量与饲粮中黑麦草比例的曲线回归模型方程为:y=0.270+0.106x-0.002x²(F=22.99^**)。当饲粮中黑麦草的干物质比例在0%～26.50%时,鹅肉ALA的含量呈上升趋势;当黑麦草的比例超过26.50%时,鹅肉ALA的含量转而呈下降趋势。说明黑麦草中的ALA能够通过摄食消化过程沉积到鹅肉中。     

滇西南勐永蔗区土壤肥力的综合评价

以滇西南勐永蔗区185份土壤样本为研究对象,采用主成分分析法、隶属度函数和模糊数学法,对蔗区土壤肥力进行综合评价。结果表明:(1)勐永蔗区土壤p H值和有机质、全钾、速效钾、有效磷含量适宜,全氮含量偏高,全磷、碱解氮含量偏低;(2)p H和有机质、全氮、全磷、全钾、碱解氮、速效钾含量的空间变异较小,有效磷含量的空间变异较大;(3)勐永蔗区土壤肥力平均综合指标值0.53,中等水平及以上的占92.3%,说明该蔗区土壤肥力状况总体良好。     

基于MAPGIS管理系统的县级农村土地利用数据库更新——以承德市双滦区为例

农村土地利用数据库更新是国土资源“一张图”建设的一项重要内容,也是实现国土资源动态管理的主要方法。该文以MAPGIS农村土地调查管理系统为平台,以承德市双滦区为例,着重探讨了农村土地利用数据库更新的流程和方法,并对数据库更新过程中应重点注意的问题和解决方法进行了阐述。      

烟草有机酸研究进展

本研究较全面地综述了近些年来国内外烟草有机酸分析研究进展,并对各种有机酸如挥发、半挥发和不挥发酸的性质、作用进行了分析。涉及有机酸的前处理方法包括水蒸汽蒸馏、溶剂萃取、SPME（固相微萃取）等。最后综合介绍了近些年来气相色谱法(GC)及其联用技术、高效液相色谱法(HPLC)、离子色谱法(IC)及其他方法在烟草有机酸分析研究中的进展,认为随着现代的分离、分析仪器及技术的应用和发展,使彻底了解烟草及烟气中各类成分成为可能,为卷烟工业加香提供了现实基础。