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山羊卵泡卵母细胞低温冷冻保存研究 总被引:4,自引:0,他引:4
通过对冷冻液(1,2—丙二醇浓度和冷冻基础液)以及平衡和脱去防冻剂方法的筛选,研究了山羊卵泡卵母细胞的低温冷冻保存的可能性。结果表明,当冷冻液为含有10%1,2—丙二醇的生理盐水,并以五步法平衡和脱去防冻剂时,冷冻效果最为有效。解冻后,卵泡卵母细胞的回收率和形态正常率分别为96.6%(56/58)和75.8%(44/58),形态正常卵泡卵母细胞的成熟率为16.3%(2/12)。 相似文献
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综述了禽类转基因方面的制作方法、转基因禽类应用研究概况。分别介绍了成熟卵泡微注射法、精子载体转基因法、反转录病毒载体转基因法、受精卵移植法、单细胞受精卵微注射法、胚盘嵌合体法、原始生殖细胞嵌合体法的进展及发展动态。阐明了转基因在宿主基因组中的表达特征及转基因禽类研究中出现的问题,并展望了转基因禽类产品的应用前景。 相似文献
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5嵌合体鸡的生产 嵌合体制作最早主要用于发育生物学、细胞遗传学等学科的理论研究。目前,禽类嵌合体的制作中作供体细胞用的囊胚层细胞(BC)和原生殖细胞(PGCs)可以代替受精卵和早期胚胎用于体外遗传操作,已成为禽类转基因研究的一个热点。同时,BC和PGCs还可以在体外进行培养和冷冻保存。基本原理是经过遗传操作的BC细胞或PGCs细胞作供体,嵌合到受体胚胎中。如果是嵌合在生殖细胞,则该嵌合体性成熟后可产生一定比例经过遗传操作的配子。 有关鸡嵌合体方面的报道及鸡嵌合体制作方法、嵌合体的嵌合程度的判断以及怎样提高嵌… 相似文献
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禽类转基因生产及其应用的研究现状和进展 总被引:2,自引:0,他引:2
1.7 精子载体转基因法(Sperm mediated gene transfer) 1.7.1 辐射精子作载体法 Pandoy和Patchell用致死剂量辐射带有选择标记的鸡精液进行授精(制造假妊娠),然后再用同种精液进行正常受精,以此来进行品种标记基因的转导。该试验以羽色和蛋壳色基因为标记,用此法在后代中获得3.5%的后代可表达外源基因。这种方法可以准确地使DNA进入核内,同时解决分离、提供插入所需基因的困难,但是无特异性,遗传频率不能预知,而且会导入不需要的基因。Bumstead[6]从对马立克氏病敏感和淋巴白血病抗性的母鸡得到转基因鸡,发现这种转基因鸡蛋对两种疾病都表现敏感而不表现抗性。这一实验直接证实了辐射精子发生非特异性整合的事实。 1.7.2 精子载体法 在禽类中精子载体转基因法能够在子代中获得1/300的携带外源基因个体。1990年法国国立发育生物学研究所的以色列研究者用此法导入外源基因,用Southern杂交法检测出阳性个体。但是至今未能获得F1代。Gruenbaum等以LacZ和CAT作为标记基因,用吸附该基因的鸡精子进行人工授精,对获得的胚胎及雏鸡进行Southern杂交和PCR分析,结果在所检测样本中30%~60%整合有外源DNA,在部分组织中检测到外源基因表达产物,在传代试验中,证明外源DNA能遗传给后代。Squries等根据精细膜的特性和相似相溶原理,用脂质体包装外源DNA与精子共同孵育,然后进行人工授精,在鸡上获得成功,阳性率为15%~25%。 相似文献
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卵泡发育闭锁排卵的激素调节 总被引:2,自引:0,他引:2
哺乳动物的原始卵泡在其出生前或出生后不久形成,性成熟后,只有少数原始卵泡生长发育成熟并排卵,绝大多数卵泡在生长竞争中闭锁、退化。卵泡的生长发育、闭锁和排卵受多种因素影响,其中生殖激素起关键性调节作用。生殖内分泌学近年的进展,使人们对卵泡的激素调节机理有了更为深入的了解。 相似文献
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为研究环腺苷酸 (c AMP)对乳腺上皮细胞增殖的影响 ,建立了山羊乳腺上皮细胞培养体系。将细胞分为 8个组 ,分别用 1× 10 ,1× 10 2 ,1× 10 3,1× 10 4 ,1× 10 5,1× 10 6 ,1× 10 7pmol/ m L c AMP刺激细胞 ,从中选出效果明显、组间差异显著的 2组作为试验的高剂量组 (1× 10 7pm ol/ m L)和低剂量组 (1× 10 6 pm ol/ m L)。从细胞群体倍增时间、细胞生长曲线和细胞分裂指数 3个方面研究了 c AMP对山羊乳腺上皮细胞增殖的影响。结果表明 ,低浓度的 c AMP有促进细胞增殖的作用 ,高浓度 c AMP有抑制细胞增殖的作用。 相似文献
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全面系统地总结了哺乳动物显微受精的发展历史和现状,从注射部位、精子状态、精子发生、卵子状态、卵子激活等方面阐述了影响显微受精的主要因素,并指出了在我国开展显微受精的重要性和必要性。 相似文献
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关中奶山羊超数排卵的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
用FSH恒量法、FSH减量法、FSH和LH混合法及PMSG法处理获得头均可用胚数分别为5.5,5.8,4.0和3.2枚;从情期的6~8,9~11,12~15和16~18d开始超排获得的头均可用胚数分别为3.4,5.7,5.5和4.1枚;对2,3,4,5和6岁以上供体超排获得的头均可用胚数分别为3.2,4.7,5.1,5.7和2.9枚;在9,10,11,12月和次年1月超排获得的头均可用胚数分别为2.8,4.7,5.8,5.3和3.2枚。结果证明,在10~12月,从情期的9~15d开始,采用FSH恒量法或FSH减量法对3~5岁的关中奶山羊进行超排可获得更好效果。 相似文献
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山羊乳腺上皮细胞培养体系的建立 总被引:7,自引:0,他引:7
为研究乳腺上皮细胞增殖和分化特性及其基因表达的分子机制 ,建立了山羊乳腺上皮细胞培养体系。用无菌手术法从健康第二胎泌乳期山羊乳腺取得组织块 ,在体外条件下用组织块法进行原代培养。基础培养液用 RPMI1 6 4 0 ,含胎牛血清 1 5 0 m L/ L,添加 EGF(1 0 μg/ L)、胰岛素 (0 .1 m g/ L)、E2 (1 μg/ L)、氢化可的松 (0 .1mg/ L)、孕酮 (1 m g/ L)、青霉素 (0 .1 g/ L)及链霉素 (0 .0 5 g/ L) ,在铺有胶原的塑料培养板上培养。从细胞接种存活率、细胞群体倍增时间、细胞生长曲线和细胞分裂指数 4个方面考察了乳腺上皮细胞的生物学性状。结果表明 ,在此培养体系中 ,山羊乳腺上皮细胞生长良好 ,增殖旺盛。细胞产物电泳及蛋白印迹分析结果表明 ,培养的细胞为山羊乳腺上皮细胞 ,并具有表达山羊酪蛋白的功能 相似文献