一例犬细小病毒病的诊治

2007年9～10月间,对我市兽医站接待犬传染病的调查中,犬细小病毒病的患病率达40%,死亡率为20%左右。在临床上主要以肠炎综合症为主,心肌炎病例较少。现就一门诊出现的一典型病例的诊治情况报道如下。1发病情况9月13日我市一养狗小户,家中3只幼犬(8周龄)相继发病,死亡1只,畜主携     

绵羊生长激素基因的克隆、序列分析及真核表达

利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从新疆阿勒泰×中国美利奴杂交F1代绵羊脑垂体总RNA扩增出编码绵羊生长激素(oGH)基因序列,T-A克隆入载体质粒pT-Adv.测序结果表明所克隆的oGH cDNA在重组质粒的阅读框架是正确的,共含有654个碱基,其核苷酸序列与已知的3条绵羊序列相比共有7个碱基的差异,除第472位和529位的碱基差异能够引起氨基酸序列的变化外,其余均为无义突变,说明从新疆阿勒泰×中国美利奴杂交绵羊中获得的羊生长激素存在有不同品系间的基因多态性变化.将重组质粒pT-Adv/oGH cDNA定向克隆入真核表达载体质粒pcDNA3.1/myc-HisA,构建成重组oGH基因的真核表达载体pcDNA3.1A/oGH.利用脂质体转染法,将重组质粒导入到小鼠骨髓瘤(SP2/0)细胞中,经间接ELISA检测,证明在转染细胞的上清中存在有目的基因产物的外泌表达.     

流产布鲁氏杆菌RB51疫苗对性成熟公牛和怀孕青年母牛的生物安全性试验

选用6头3岁娟姗公牛和7头怀孕中期杂种青年母牛，采用标准幼牛剂量的流产布鱼氏杆菌RB51（RSB51）疫苗免疫后，检测菌落和菌群的情况。结果表明：试验牛中无一头分离出流产布鱼氏杆菌（SRB51）疫苗菌体，公牛的配种可靠性正常，母牛的状态正常。宰杀剖检后，从公牛、母牛包括胎儿的任何组织中均分离不到（SRB51）疫苗菌种，但血清学分析可检测到SRB51特异性抗体。（Am J Vet Res 1999;60:722-725）     

绵羊MOET育种计划生物技术匹配的模拟计算

动物胚胎移植首次成功距今已逾百年,而近20年来的进展最快.MOET(Multiple Ovulation and Embryo Transfer)育种计划是超数排卵和胚胎移植技术与核心群育种技术相结合的一项系统工程,应用于单胎动物在提高育种进展和育种效益方面具很大潜力.目前MOET技术作为一种较为成熟的生物技术已在动物育种中广泛应用.这一育种计划的实施不仅可以提高母羊的繁殖力和迅速增加优秀个体的数量,而且可通过同胞测定缩短世代间隔.MOET育种计划的成功实施,除需要高产优质母羊组成的核心群作为胚胎移植的供体外,还必须通过科学合理的组织调配,使一系列相关生物技术在时间、空间上实现有机匹配,以免发生箍木桶拼板的“短板”效应,造成生物技术条件、种质资源的溢失浪费.影响育种进展和育种效益.本文依据绵羊MOET育种核心群实践,探讨其相关生物技术步骤合理组合匹配模拟计算.     

牛Th1/Th2型细胞因子实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中牛Th1/Th2(BoTNF-α、BoIFN-γ、BoIL-2、BoIL-4、BoIL-6、BoIL-8、BoIL-10)型细胞因子的基因序列,在保守区设计并合成各自特异引物,并以牛3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)基因为内参,采用SYBR GreenⅠ染料以建立实时荧光定量PCR检测方法。将Th1/Th2型细胞因子基因克隆至pMD18-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR-GreenⅠ荧光定量RT-PCR标准曲线和溶解曲线,并做灵敏性、特异性和重复性试验。对建立的Th1/Th2型细胞因子SYBR-GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法进行分析,结果表明牛IFN-α、IFN-β、IFN-γ和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×101～1×108 copies/μL范围分别呈良好的线性关系,相关系数均大于0.991。溶解曲线分析表明产物为特异的单峰,具有较高的灵敏性和特异性,重复性较好。建立了检测Th1/Th2型细胞因子的实时荧光定量RT-PCR方法,为在mR-NA水平对牛Th1/Th2型细胞因子的定量分析奠定了基础。     

克拉玛依白碱滩区猪、羊口蹄疫免疫抗体监测与分析

为了解克拉玛依市白碱滩区猪、羊口蹄疫疫苗强制免疫效果,防止口蹄疫的发生和流行,杜绝疫情隐患,对白碱滩区2016—2019年口蹄疫疫苗强制免疫后,采用液相阻断ELISA法进行口蹄疫抗体水平监测。结果显示,2016—2019年猪群O型口蹄疫抗体水平合格率分别为75%、96%、85%和92%,羊群O型口蹄疫抗体水平合格率分别为79%、100%、95%和93%,均符合农业农村部关于畜群免疫抗体合格率保护水平。白碱滩区猪、羊群口蹄疫免疫整体效果良好,且2017—2019年猪、羊群口蹄疫免疫效果明显提高,好于2016年。     

多杀性巴氏杆菌分离鉴定及序列分析

旨在了解新疆地区多杀性巴氏杆菌主要流行株的特性。通过病原的分离纯化、PCR扩增及测序,分析8株多杀性巴氏杆菌的血清型,16S rDNA基因、ompH基因和ompA基因的差异。结果表明,3株羊源、2株牛源和1株禽源分离株为荚膜A型,1株牦牛源分离株为荚膜B型,1株标准株为荚膜E型,均具有很强的致病性。分离株与GenBank公布的代表株的16S rDNA基因、ompH及ompA基因同源性分别为93%~100%、93%~100%、98%~100%。ompH基因的ORF氨基酸C端最后10个氨基酸变化较大,分离到5株ompA基因的ORF氨基酸序列N端多出6个氨基酸（M-K-R-I-I-Q）替代原先的起始位置。可见：新疆主要流行株为强致病性的荚膜A型,且有出现变异趋势。     

牦牛巴氏杆菌和葡萄球菌的分离鉴定

2007年7月初,农十二师104团某牛场牦牛因阴雨天气转场.造成牛群突然发病、死亡,主要是犊牛.发病率为3%;致死率为20%.其临床症状:病初体温高达41℃～42℃,精神沉郁,呼吸加快,有痛苦性干咳,下痢,气味恶臭.病理变化:肝肿胀、质脆,个别牛肝表面有坏死灶;肾稍肿;淋巴结明显水肿、出血;肺脏表面有肝变区,呈大理石样花纹,有纤维素性胸膜炎变化,有化脓灶;心包积水;初诊为"牛出血性败血病",一种以高热和败血症为特征的急性传染病[1].     

捻转血矛线虫Hc38保守结构域的表达及对绵羊的免疫保护试验

构建捻转血矛线虫Hc38保守结构域原核表达重组质粒pPROEXHTa-Hc38,在DH5a中经诱导表达约17ku的蛋白,表达产物通过Westem blot鉴定,然后将其产物纯化,复性后制备油佐剂疫苗免疫4月龄绵羊,结果表明：对照组与实验组比较,虽然雌虫数量未见减少,但两者荷虫量差异显著（P〈0．05）。     

牛病毒性腹泻病毒与宿主细胞的相互作用研究

自1946年Olafson等首次在美国纽约州发现牛病毒性腹泻病毒(BVDV)以来,该病毒在世界各地广泛流行和传播,尤其对一些畜牧业发达国家的奶业和牛肉业造成了巨大损失.了解牛病毒性腹泻病的致病机理,研制出更加安全可靠有效的疫苗,对控制该病的发生和蔓延尤为重要.对BVDV的病原学、生物学特性以及对宿主细胞的相互作用等进行了阐述,以期为BVDV的预防及治疗奠定基础.