遵义市奶牛布鲁氏菌病流行病学调查

对遵义市奶牛布鲁氏菌病进行了紧急流行病学调查,为奶牛布鲁氏菌病的防治提供了参考。     

正交实验法优选藏药三果汤中没食子酸水提取工艺研究

本研究优化藏药三果汤中没食子酸的最佳水提取工艺。以没食子酸的溶出量作为评价指标，通过单因素试验和L(943)正交试验法，考察加水量、浸泡时间、煎煮时间及煎煮次数对藏药三果汤水提取效果的影响。藏药三果汤的最佳水提取工艺为加30倍量水浸泡10 min，煎煮40 min，煎煮3次。该方法优选的藏药三果汤水提取工艺合理、稳定可行，可为日后工业化生产提供科学依据。     

猪肠黏膜保护因子HO-1的短小芽孢杆菌表达系统建立与分析

【目的】 对猪黏膜保护因子——血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）基因进行克隆及原核表达，为研究高表达HO-1在肠黏膜损伤中的保护作用提供技术支持。【方法】 根据GenBank中公布的HO-1序列（登录号：NM_001004027.1），利用Primer Premier 6.0设计1对特异性引物，利用RT-PCR方法扩增HO-1基因片段，将其与pMD19-T克隆载体连接，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆进行PCR鉴定；将载体pNCMO2与重组载体pMD19-T-HO-1进行Sal Ⅰ和Kpn Ⅰ双酶切，使用T4 DNA连接酶连接，利用电击转化技术将重组表达载体pNCMO2-HO-1转入感受态短小芽孢杆菌，使用IPTG进行诱导表达，应用SDS-PAGE和Western blotting分析HO-1在短小芽孢杆菌中的融合表达情况。【结果】 猪HO-1基因全长897 bp，编码298个氨基酸。双酶切后在约5 200和897 bp处分别观察到pNCMO2载体片段和HO-1基因片段，证明成功构建基因表达载体pNCMO2-HO-1；电转后的双酶切结果表明，在相同的位置观察到pNCMO2和HO-1片段，证明重组表达载体pNCMO2-HO-1成功导入短小芽孢杆菌。SDS-PAGE和Western blotting鉴定结果发现，在36.5 ku处出现了明显的蛋白印迹，表明成功表达了HO-1的重组蛋白，且为胞外分泌。【结论】 本研究成功构建了HO-1的重组原核表达载体，pNCMO2-HO-1重组载体可以在短小芽孢杆菌中诱导表达。     

玉米穗部性状QTL定位与候选基因分析

本研究以热带玉米骨干自交系T32和QR273为亲本构建的150份F₂、F_2∶3分离家系为材料，利用简化基因组测序技术(GBS)对F₂单株的基因型鉴定，同时分别在甘肃张掖和贵州贵阳两环境条件下对F_2∶3家系的穗长、穗粗、穗行数、行粒数和秃尖长等5个穗部相关性状进行表型评价，采用完备区间作图法进行QTL定位。结果表明，两个环境下共检测到46个穗部相关性状QTL,分布于10条染色体上，可分别解释表型变异范围为1.89%～17.18%,可解释穗部性状表型变异大于10%的QTL有6个。结合公共数据库，利用生物信息学分析策略，预测出6个控制穗部性状变异的候选基因(Zm00001d041072,Zm00001d053048,Zm00001d011355,Zm00001d041073,Zm00001d030086,Zm00001d030088),这些基因所编码的蛋白具有植物生长发育、激素合成、营养成分转运和其他许多生物学功能，可作为后续基因图位克隆和分子辅助育种的候选靶标。     

疏调气机汤水提取工艺正交优化及其对桥本甲状腺炎大鼠治疗作用的研究

优化疏调气机汤最佳水提取工艺及对桥本甲状腺炎大鼠的治疗作用。以5种成分的总溶出量为指标,通过单因素试验和正交试验法,优选加水量、浸泡时间、煎煮时间等工艺参数;建立桥本甲状腺炎大鼠模型,ELISA法检测大鼠血清中TSH、FT3、IgG4、IFN-γ、TG-Ab、TPO-Ab和TGF-β1水平,HE染色观察大鼠甲状腺病理学形态变化。最佳水提取工艺为加20倍量水,浸泡20 min,煎煮10 min;与模型组比较,疏调气机汤工艺提取物可明显减轻桥本甲状腺炎大鼠的炎性细胞与改善甲状腺滤泡形态,降低血清TSH、IgG4、IFN-γ、TG-Ab、TPO-Ab、TGF-β1和升高FT3水平差异有统计学意义(P<0.05)。优选的疏调气机汤水提取工艺合理、稳定可行,对桥本甲状腺炎大鼠有一定的治疗作用。