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21.
根据家兔基因密码子使用偏好性,对引自GenBank的秀丽隐杆线虫fat-1基因编码序列进行密码子优化,通过全基因合成的方法获得优化后的fat-1基因(命名为opfat-1);从秀丽隐杆线虫中RT-PCR扩增获得fat-1.将扩增的fat-1和合成的opfat-1基因分别构建到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1中.采用脂质体LipofectamineTM转染法将fat-1和opfat-1基因转入家兔胎儿成纤维细胞(Rabbit fetal fibroblast cells,rFFCs)中.对比不同DNA和转染试剂用量以及细胞暴露于DNA、转染试剂中作用时间探讨影响rFFCs转染效率的参数,经过优化,最优的rFFCs转染条件为:LipofectamineTM用量2~3μl,DNA量0.8~1.0μg,LipofectamineTM与DNA、细胞共培养时间为8 h.通过绿色荧光标记和RT-PCR检测转染细胞中融合蛋白和目的基因的表达.密码子优化的opfat-1与fat-1相比,体外瞬时表达效率有极为显著的提高;G418抗性筛选获得转基因单克隆细胞,RT-PCR初步验证fat-1和opfat-1基因均在家兔胎儿成纤维细胞中稳定转录表达. 相似文献
22.
今年,河南省继续实施花生良种补贴试点项目。6月8日,记者从省农业厅获悉,今年中央下达河南省花生良种补贴资金9700万元,加上2010年结余资金885万元,共投入补贴资金1.0585亿元。补贴范围:在河南省花生主产区,从最大县开始选择25个县,集中连片安排项目。补贴标准:大田生产每亩补贴10元,共补贴资金7760万元;良种繁育每亩补贴50元,共补贴资金2825万元。 相似文献
23.
秀丽隐杆线虫fat-1基因密码子优化、克隆及家兔表达载体构建 总被引:1,自引:0,他引:1
提取秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)总RNA,采用RT-PCR法扩增出fat-1基因cDNA全长.根据家兔基因密码子使用偏好性,对引自GenBank的fat-1 cDNA序列进行密码子优化,通过全基因合成的方法获得优化后的fat-1基因(命名为opfat-1).将扩增的fat-1 cDNA和opfat-1基因分别与pGEM-T Easy和pUC57载体连接,转化大肠杆菌DH5α,获得2种重组克隆子.2种重组子经双酶切后获得的目的片段分别定向克隆入绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1中,构建重组表达载体,并对其进行PCR、限制性内切酶酶切分析和测序鉴定,结果表明,成功构建了fat-1基因家兔表达载体pEGFP-opfat-1和pEGFP-fat-1,且读码框正确. 相似文献
24.
不同耕作方式对农田环境及冬小麦生产的影响 总被引:2,自引:1,他引:1
为明确不同耕作方式对农田环境及小麦生产的影响,通过田间定位试验,研究了5种耕作方式对冬小麦田土壤物理特性、杂草、小麦产量及其构成因素的影响。结果表明,小麦拔节期以前,免耕及覆盖秸秆可显著提高表层土壤含水量,覆盖秸秆处理可显著降低土壤温度;小麦拔节后,作物覆盖度增加,处理间土壤含水量、温度差异减小。与旋耕(RT)相比,小麦收获后,免耕及覆盖秸秆可显著增加0~5 cm表土层容重、降低15~20 cm土层容重,可显著降低麦家公、播娘蒿的发生密度、株高及鲜重,显著增加荠菜的发生密度、株高及鲜重,旋耕秸秆还田(RTS)对荠菜的影响不显著,可降低麦家公、播娘蒿的发生密度,但有使其单株平均株高、鲜重增加的趋势。与RT相比,免耕覆盖秸秆3000 kg/hm2(NTS3000)、免耕不覆盖秸秆(NT)区小麦产量分别增加13.0%、8.3%,RTS、免耕覆盖秸秆6000 kg/hm2(NTS6000)区小麦产量分别降低9.1%和17.4%。NTS3000处理区农田环境有利于作物的生长发育,是较适合黄淮海地区的冬小麦保护性耕作方式。 相似文献
25.
白鹤梁题刻原址水下保护工程交通廊道变形缝、施工缝、接头缝的防水不仅要考虑结构沉降、伸缩以及金属板与混凝土间的收缩等变形,而且在充分变形的情况下,保证其水密性。其止水连接设计采用了外贴橡胶止水带、中埋可注浆式钢边橡胶止水带、内装可卸式Ω橡胶止水带及聚胺脂密封胶、遇水膨胀腻子止水条、SM胶等辅助防水措施。既满足廊道承受水压和接缝变形要求,又提高了止水结构的安全可靠性能,可为其他类似工程接缝止水结构设计与施工提供参考。 相似文献
26.
为解决青柠檬采后易变黄的问题,使用300、600、900μL/L 1-甲基环丙烯(1-MCP)分别处理青柠檬后于8℃下贮藏,筛选最佳延缓青柠檬变黄的1-MCP处理浓度,并利用电子鼻分析不同浓度1-MCP处理对青柠檬品质的影响。结果表明:300μL/L 1-MCP处理能有效减缓青柠檬转黄,抑制可溶性固形物含量的降低和可滴定酸含量的上升;在电子鼻分析中,线性判别分析(LDA)更能准确判别出青柠檬不同贮藏期之间挥发性气体的差别;300μL/L 1-MCP处理能明显抑制青柠檬果实部分挥发性气体的生成,从而延缓果实后熟。 相似文献
27.
20%烟嘧磺隆·氰草津油悬浮剂的生物活性评价 总被引:4,自引:0,他引:4
在温室盆栽条件下,以马唐、反枝苋为试材,采用Gowing法测定了烟嘧磺隆与氰草津复配的联合作用,并对实验室制得的20%烟嘧磺隆·氰草津油悬浮剂进行了大田生物活性评价试验。结果表明,烟嘧磺隆与氰草津复配后对马唐有增效作用,对反枝苋属于相加作用,两者适宜复配,配比为1~4∶12.5。于玉米3~5叶期、杂草2~5叶期喷施20%烟嘧磺隆·氰草津油悬浮剂180~300 g/hm2,药后30 d的杂草总株防效及鲜重防效分别为83.6%~94.3%、92.7%~99.2%,对玉米安全性较好,玉米株高、产量均大于人工除草处理;在玉米7叶期及杂草5叶期以后施用该药剂,玉米的安全性及杂草株防效均出现下降。 相似文献
28.
29.
指出了枪马金矿位于河南灵宝小秦岭地区,其矿脉严格受断裂构造控制,构造产状沿走向发生改变和构造缓倾区是最有利的构造成矿位置.探讨了利用suffer软件的绘图功能,简单、快捷地识别和判断构造产状变化趋势和构造缓倾地段即有利于成矿部位. 相似文献
30.
以金华猪(40头)、皮特兰猪(30头)及其杂交产生的金皮F2代资源猪群(126头)为材料,对钙离子通道主亚基α1的编码基因(CACNA1S)第44外显子A187G突变、第37内含子A37G突变、T179C突变作PCR—RFLP检测(内切酶依次为Cfr42Ⅰ、XbaⅠ、Eco72Ⅰ),分析其对胴体及肉质性状的遗传效应。结果表明:酶切位点Eeo72J的AA基因型对眼肌面积和肉色(L)存在极显著影响(P〈0.01),BB基因型对后腿肌肉重存在极显著影响(P〈0.01)和大腿pH存在显著影响(0.01〈P〈0.05);位点Xba Ⅰ对背膘厚(中)存在显著影响(0.01〈P〈0.05),但AA、AB、BB基因型间效应差异不显著(P〉0.05);位点Cfr 42Ⅰ仅在金华、皮特兰纯种猪群中存在多态性,而在屠宰猪群金皮F2代则表现为BB单态型。 相似文献