姬菇杂交菌株的ISSR分析

采用ISSR标记技术对40个姬菇杂交菌株及2个亲本菌株进行分析,使用NTSYSpc2.1生物软件对42个供试菌株进行聚类分析,构建系统树.试验筛选出了11个扩增谱带清晰、多态性好的ISSR引物,共扩增出81条清晰易辨的多态性谱带.聚类分析结果表明,42个供试菌株遗传相似系数变异范围为0.4286～0.8537,在相似系数0.6680时,42个菌株聚为7类,两亲本各聚一类,杂交菌株与亲本菌株遗传差异较大.     

玉米杂交种天丞288的制种及高效安全生产技术集成研究

摘要：玉米新品种天丞288是集产量高,品质优,抗病能力强。适应范围广、配合力高于一体的玉米单交种．2009年3月通过陕西省农作物品种审定委员会审定．审定编号：陕市玉2009021号。为了配合该品种的应用推广．研究总结了天丞288杂交种及自交系培育制种过程中的关键技术要领、品种特征特性及大面积高效安全生产技术集成等。     

华南坡耕地土地利用问题以及对策探讨

坡耕地治理和保护是当今热门话题,自然因素和经济制度因素对坡地农业土地利用影响巨大.华南地区光、热、水资源丰富,但山地丘陵多耕地少,人地矛盾突出.就华南地区坡耕地概况、自然背景、利用现状以及存在的水土流失、土壤退化、土地浪费问题进行探讨,提出该区坡耕地资源要引导开展耕地改造、调整种植制度和种植结构、发展丘陵立体农业等措施进行可持续开发利用.     

光散射技术在4.5%高效氯氰菊酯水乳剂物理稳定性研究中的应用

证明了将光散射技术用于评价水乳剂稳定性的可行性。通过4.5%高效氯氰菊酯水乳剂配方的研制,证明了来自Turbiscan Lab分散稳定性分析仪的稳定性参数(SI)可以作为水乳剂稳定性判定的量化指标,其结果与传统的热贮稳定性和冻融稳定性试验结果一致,SI<4.0的4.5%高效氯氰菊酯水乳体系具有稳定性。此外,正交试验结果表明,乳化剂配比对体系的稳定性影响最大,水质和共乳化剂用量的影响相对较小且差异不显著。选定乳化剂配比后,水质和共乳化剂对体系物理稳定性的影响是协同作用的结果,水质可以在较宽的范围内选择,因而可用自来水配制合格的4.5%高效氯氰菊酯水乳剂。     

川贝中生物碱提取工艺优化

为优化川贝中生物碱的提取工艺,采用超声辅助酸性醇提取法,选取pH值、乙醇体积分数、超声时间、料液比作为考察条件进行单因素试验,并进行L9(34)正交试验。结果表明,pH值、乙醇体积分数对生物碱提取的影响较大。川贝中总生物碱的最优提取组合为A1B2C3D1,即pH值为1,乙醇体积分数50%,超声时间75min,料液比1:10。     

促黄体素对牛卵母细胞体外核成熟的影响

为了研究促黄体素(luteinizing hormone,LH)在牛卵母细胞成熟培养体系中的时间依从性,试验通过向牛卵母细胞体外成熟培养的不同时间段添加LH来观察其核成熟的情况。首先用无LH的基础成熟液I和添加LH的成熟液Ⅱ分别培养,在成熟的不同时间点(3、6、9h)用醋酸地衣红染色观察各自的生发泡破裂率。然后在体外成熟培养的不同时间段(0～3、0～6、0～9、0～24h)添加LH,24h后统计各自的第一极体率。结果表明,添加LH组在6h的生发泡破裂率显著低于对照1组(P0.05),24h添加LH组的第一极体率显著高于对照2组(P0.05)。因此,添加LH能延迟牛卵母细胞的核成熟,成熟培养中24h全程添加LH较不添加组能显著提高核成熟率。     

利用CTC染色进行猪精子不同体外获能方法的比较

为了探讨不同方法对猪精子体外获能的影响,本试验以猪的新鲜精液为研究对象,分别经肝素上游法、钙离子载体诱导法和咖啡因诱导法进行精子不同获能时间的处理,并利用金霉素荧光染色法（chlortetracycline,CTC）对其获能效果进行检验。结果表明,采用肝素上游法孵育40 min处理后,精子的获能比例显著高于其他各处理组（P<0.05）,说明肝素上游法可以较好地诱发猪精子在体外获能。     

犬常规冷冻稀释液中添加谷胱甘肽的研究

随着中国国民经济的迅速发展,军、警犬得到广泛应用的同时,肉用犬的饲养已经形成规模,宠物犬进入百姓家庭,犬的数量日益增加。为适应国内军、警、生物医学用犬的特点和宠物犬品质提高的需要,人们已经采用犬的人工授精技术提高种公犬的利用率,使优良公犬能充分发挥高产的遗传性。如今养犬业发达的国家,在犬的繁殖生产中大部分采用冷冻精液技术对犬进行人工授精,这种技术的关键在于精液的稀释处理。为提高犬冷冻精液的质量,人们向稀释液中添加各种物质以保护精液。本实验在稀释液中添加谷胱甘肽(GSH),利用其作为过氧化-还原酶系统的作用物,能及时保护精子免遭氧化及过氧化反应终结产物的伤害,使精子脂膜结构保持稳定,提高精液质量。实验将冷冻稀释液与犬精液按1︰1稀释,平均分成6组,依次向每组添加1、5、10、15、20mmol/L不同浓度的谷胱甘肽,设最后1组为对照组。冷冻后,从每次试验的各浓度组随机抽取3支细管进行解冻,镜检精子活力,记录数据。再经姬姆萨染色法染色,观察顶体完整率和畸形率。试验结束后,采用方差分析法对数据进行分析。实验结果表明:添加5mmol/L谷胱甘肽的冷冻精液解冻后,精子活力、顶体完整率均优于对照组,畸形率低于对照组,5mmol/L为最优添加浓度。     

野生香蘑属菌株的ITS序列分析

以6个野生香蘑属菌株为研究材料,进行ITS测序,并以10个GenBank香蘑属菌株ITS序列为参照,应用DNA—MAN、MEGA4软件构建系统发育树状图。研究结果表明,No．1、2、4、5、6与GenBank花脸香蘑菌株聚为一类,应视为花脸香蘑菌株,而No．3菌株与肉色香蘑及GenBank中3个水粉杯伞AY521248、DQ149727、DQ149728都具有0．308的遗传距离,其分类地位有待予进一步研究。     

利用脂质体法建立转Toll样受体4基因大尾寒羊胎儿成纤维细胞株的研究

利用脂质体转染法获得转Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)基因的成纤维细胞,将其作为供体细胞,再通过体细胞核移植技术构建重构胚,最终生产出转TLR4基因且性别可控的大尾寒羊。本研究通过原代培养大尾寒羊胎儿皮肤成纤维细胞,并进行SRY基因性别鉴定,利用脂质体转染法转入TLR4基因,然后分别从形态学与分子水平检测TLR4基因的表达,将稳定表达转TLR4的成纤维细胞核移植入绵羊去核卵母细胞中构建重构胚。最终获得5个稳定表达TLR4的阳性细胞克隆,经SRY基因性别鉴定为雌性细胞株,通过实时荧光定量PCR分析,在第4代转染的细胞中TLR4表达量最高,比未转染细胞高出7.4816倍(P<0.01),卵裂的重构胚中有EGFP的表达。试验成功构建出含TLR4基因的重构胚,为今后生产出性别可控的抗病转基因绵羊地方新品种奠定基础。