凡纳滨对虾的脂肪营养需求

脂肪在凡纳滨对虾的生命活动中有着重要的作用,主要用于能量代谢和生长发育。虾类的脂肪来源一部分来自于体内的三大营养物质转化,另外主要的来源还是来自于饲料的供给。凡纳滨虾饲料中脂肪和脂肪酸的种类以及含量的不同,直接影响凡纳滨对虾的机体的生长和养殖效益。研究发现凡纳滨对虾幼虾饲料C18:3n-3/C18:2n-6比值为0.44,凡纳滨对虾饲料中脂肪添加量在8.5%~9%之间的效果最好。     

对虾对糖的利用

对虾对单糖的利用能力很差,高含量的单糖对对虾的生长有抑制作用,饲料中葡萄糖的含量超过10%时将会抑制对虾的生长.虽然低聚糖如蔗糖、海藻糖显示出良好的生长效果,但是在工业中的应用还不普遍.通过对各种淀粉进行的研究结果表明对虾对小麦淀粉的吸收和利用较好,而在淀粉含量高的面粉中,也是小麦面粉有较好的表观消化率.     

家禽副产物酶解肽对凡纳滨对虾生长性能、消化指标和非特异性免疫指标的影响

本试验通过评估凡纳滨对虾的生长性能、消化指标和非特异性免疫指标,来研究家禽副产物酶解肽作为蛋白质源替代凡纳滨对虾饲料中部分鱼粉的可行性。以预混家禽副产物酶解肽(在家禽副产物酶解肽基础上添加包膜蛋氨酸,使其蛋氨酸含量与国产鱼粉相当)分别替代基础饲料中0(对照)、2%、4%、6%、8%的鱼粉,共制成5种试验饲料。选取900尾平均体重(0.31±0.01)g的凡纳滨对虾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复60尾,进行为期8周的室内养殖试验。结果表明:家禽副产物酶解肽替代鱼粉水平为2%~6%时,对虾的增重率、特定生长率、蛋白质效率、饲料系数与对照组无显著差异(P0.05)。家禽副产物酶解肽替代鱼粉水平超过2%时,全虾粗脂肪含量显著低于对照组(P0.05),全虾粗灰分含量显著高于对照组(P0.05)。家禽副产物酶解肽替代鱼粉水平为2%时,肝胰腺中脂肪酶活性最高,并可显著降低血浆中葡萄糖和甘油三酯的含量(P0.05),显著提高血浆中溶菌酶的活性(P0.05)。家禽副产物酶解肽替代鱼粉水平超过2%时,血浆中过氧化物酶的活性显著低于对照组(P0.05)。各组粗蛋白质表观消化率、粗脂肪表观消化率以及肝胰腺中溶菌酶、过氧化物酶活性与总抗氧化能力均无显著差异(P0.05)。由此得出,在本试验条件下,以生长性能为基础,综合考虑消化、非特异性免疫等指标,家禽副产物酶解肽替代凡纳滨对虾饲料中鱼粉的适宜水平为2%。     

虹鳟鱼trapd基因cDNA的克隆与序列特征分析

易位子相关蛋白δ(translocon associated protein delta,TRAPD)是作为内质网膜蛋白参与细胞内信号序列识别、新生肽链的修饰、转运通道的形成等过程.以虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)为研究材料,采用RT-PCR和RACE法分离和克隆虹鳟鱼trapd基因cDNA的全长序列(GenBank登录号:FJ591154),序列全长949 bp,其中5'端非翻译区(UTR)长109 bp,3'端非翻译区(UTR)长336 bp,开放性阅读框(ORF)长504 bp,编码167个氨基酸,存在1个跨膜区.虹鳟TRAPD蛋白序列与斑马鱼、黑青斑河豚、大西洋鲑、斑点叉尾鲴、热带爪蟾、人和小鼠等脊椎动物的同源性均在80%左右,表明trapd基因在进化过程中是高度保守的.     

虹鳟脑型肌酸激酶基因cDNA全长的克隆与序列分析

肌酸激酶(Creatine kinase, CK)能够催化磷酸基团在二磷酸腺苷(ADP)和磷酸肌酸间的可逆性转移, 在细胞能量代谢过程中发挥重要作用.以虹鳟(Oncorhynchus mykiss)为研究材料, 使用RT-PCR和RACE法分离和克隆了虹鳟脑型肌酸激酶(CKB)基因cDNA的全长序列(GenBank登录号:FJ548753). 序列全长1 493 bp,其中5′端非翻译区81 bp, 3′端非翻译区266 bp, 开放性阅读框1 146 bp, 编码381个氨基酸.虹鳟鱼CKB蛋白存在两个重要功能结构域,分别为EF-hand结构域和ATP:guanido 磷酸转移酶结构域.构建的系统进化树证实所克隆的肌酸激酶CK基因属于脑型肌酸激酶基因CKB.虹鳟鱼CKB蛋白序列与大西洋鲑(Salmo salar)的CKB在进化树上最先聚为一支,这与两者同属鲑科鱼类这一事实是一致的.虹鳟鱼CKB蛋白序列与大西洋鲑的CKB蛋白同源性高达99%,与已报道的哺乳动物的CKB蛋白同源性均在80%以上相符,表明CKB基因在进化过程中是高度保守的,在细胞能量发生与转移过程中发挥着重要作用.     

饲料中高浓度黄曲霉毒素B_1在凡纳滨对虾幼虾体内的残留及其影响

为了考察饲料中高浓度黄曲霉毒素B1(AFB1)对凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei幼虾肝胰腺的影响,在水温为(28.06±0.09)℃的条件下,给体质量为(0.30±0.02)g的凡纳滨对虾幼虾投喂每千克饲料中含黄曲霉毒素B1(AFB1)为1600μg的饲料,对照组饲喂正常配合饲料,每组设3个平行,饲喂8周后取样,测定AFB1及其代谢产物黄曲霉毒素M1(AFM1)在幼虾肝胰腺、肠道、肌肉中的残留量,以及肝胰腺和血淋巴中的生化指标,并观察肝小管的显微结构。结果表明:幼虾持续8周摄入含高浓度AFB1的饲料时,肝胰腺中AFB1的残留量(2.11μg/kg)高于肠道残留量(0.11μg/kg),肌肉中未检测到残留量;同样,肝胰腺中AFM1的残留量(0.32μg/kg)高于肠道残留量(0.05μg/kg),肌肉中未检测到残留量;试验组幼虾肝胰腺中丙二醛(MDA)含量(62.60 nmol/mg)显著高于对照组(21.38 nmol/mg)(P0.05),但两组血淋巴中MDA含量无显著性差异(P0.05);试验组幼虾肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)活性(26.25 U/mg)显著低于对照组(36.70 U/mg)(P0.05),但两组血淋巴中SOD活性无显著性差异(P0.05);对照组幼虾肝胰腺中活性氧(ROS)含量显著高于试验组(P0.05);试验组幼虾血淋巴中酚氧化酶(PO)活性显著高于对照组(P0.05)。从切片显微结构观察可见,幼虾肝胰腺细胞受到损伤,损伤规律为近消化道损伤严重,逐渐向肝胰腺边缘扩散,表现为肝胰腺细胞紧缩,出现空泡区,食道周围肝细胞消失,严重的仅残留肝小管,甚至肝小管消失。研究表明,长时间投喂含有高浓度AFB1的饲料,凡纳滨对虾幼虾的肝胰腺受损且某些代谢生化指标受到不同程度的影响,同时在肝胰腺和肠道有黄曲霉毒素残留。     

利用转基因番茄表达血管内皮生长因子的研究

【目的】应用基因工程技术,获得表达血管内皮生长因子（VEGF）的转基因番茄植株,为以番茄作为生物反应器生产药用蛋白奠定基础。【方法】利用植物偏好的密码子改造合成VEGF基因全长,构建植物表达载体p1390RVEGF,通过农杆菌菌株EHA105介导将其T-DNA区转入到番茄细胞中,再生后获得转基因番茄植株,对其进行分子和蛋白水平检测。【结果】成功构建了植物整株表达载体p1390R-VEGF,建立了高频的番茄再生培养体系;PCR检测、Southern blot和Western blot检测结果表明,VEGF基因已经转入番茄中,并成功得到了表达。【结论】得到了转基因番茄植株和果实,且VEGF蛋白有良好的抗原性。     

家禽副产物酶解肽部分替代鱼粉对大菱鲆生长性能、消化指标和特异性免疫指标的影响

本试验旨在研究家禽副产物酶解肽部分替代鱼粉对大菱鲆生长性能、消化指标和特异性免疫指标的影响。选取初始体重(10.32±0.26) g、大小均匀、体质健壮的大菱鲆450尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复30尾。首先配制含50%鱼粉的基础饲料,然后用家禽副产物酶解肽分别替代基础饲料中0(对照)、8%、16%、24%和32%的鱼粉,配制5种等氮等能的试验饲料,分别记为D0、D8、D16、D24、D32组。试验期为56 d。结果显示:家禽副产物酶解肽替代8%和16%的鱼粉对大菱鲆的增重率、存活率、特定生长率、饲料系数、肝体比、肥满度、脏体比等生长性能指标均无显著影响(P>0.05)。家禽副产物酶解肽替代鱼粉比例超过8%时,全鱼粗脂肪含量显著低于对照组(P<0.05)。D0、D8、D16组干物质表观消化率、粗蛋白质表观消化率和粗脂肪表观消化率显著高于D24、D32组(P<0.05)。D0、D8组肝脏中胃蛋白酶、胰蛋白酶活性显著高于D16、D24、D32组(P<0.05)。D0、D8组的血浆和肝脏中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性显著低于D24、D32组(P<0.05)。D8组血浆中补体3、补体4含量显著高于D24、D32组(P<0.05)。D0、D8组血浆中尿素氮、丙二醛含量显著低于D24、D32组(P<0.05)。D0、D8组的血浆中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性以及总蛋白、甘油三酯、总胆固醇、葡萄糖含量显著高于D32组(P<0.05)。由此可见,在本试验条件下,以生长性能为基础,综合考虑消化、代谢、特异性免疫等指标,家禽副产物酶解肽替代大菱鲆饲料中鱼粉的适宜比例为8%。     

黏质沙雷氏菌Ha1培养条件优化及其与化学除草剂复配研究

为了寻找高效安全的微生物除草剂,来减少或代替部分化学除草剂的使用,本研究优化了黏质沙雷氏菌Ha1的培养条件,并采用颗粒剂填埋法结合除草剂土壤封闭法测定了Ha1颗粒剂与化学除草剂复配的除草活性。结果显示,Ha1菌株培养的最优碳源、氮源和无机盐及其配比为蔗糖10 g/L、蛋白胨20 g/L、氯化钙1 mol/L;最优培养条件:pH值为7、温度为20℃、转速为200 r/min。添加助剂比未添加助剂的Ha1颗粒剂的活菌数多0.9×10⁹ CFU/g。当Ha1颗粒剂与70%推荐剂量的莠去津、精异丙甲草胺和扑草净复配使用时,对马唐的鲜重抑制率分别为96.35%、94.47%、97.61%,对稗草的鲜重抑制率分别为89.81%、86.50%、85.68%,对苘麻的鲜重抑制率分别为86.92%、79.53%、53.03%。表明添加助剂有助于菌株生长,化学除草剂与Ha1颗粒剂复配使用能够明显提高单独使用除草剂或者Ha1颗粒剂的防除效果。     

4种阿魏酸端链衍生物的合成及除草活性的初步测定

为了从天然产物中获得新的除草活性物质,通过酰胺化和缩合反应,得到4个阿魏酸端链衍生物,以反枝苋、稗草、马唐、油菜为供试植物,以莠去津为阳性对照,将化合物的浓度设置为200mg/L,利用小杯法和茎叶喷雾法对这4种化合物的除草活性进行了测定。小杯法的结果表明化合物1对油菜的根茎均有抑制效果,对根的抑制率为87.32%。对马唐的茎抑制率为67.48%。化合物2抑制反枝苋根生长,抑制率为62.02%,对油菜的根抑制率达到90.74%。化合物3对反枝苋根的抑制率为54.11%,对油菜根的抑制率为88.68%。化合物4对稗草、马唐和油菜根的抑制效果明显,抑制率均达到50%以上,对油菜根的抑制率为84.24%。茎叶处理结果表明,化合物1和化合物4对稗草地上部抑制率为61.46%和60.55%。