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从鸡B淋巴DT40细胞系中克隆β-actin启动子,替换pCDNA3.1(+)载体中的SV40启动子,构建β-octin启动子驱动的Neomycin抗性基因表达框.将克隆的slgM λ轻链基因两侧各约2 kb的序列插入到抗性表达框的两侧作为同源臂.PCR、酶切以及测序结果表明成功构建了靶向slgM λ轻链基因的置换型打靶载体pCDNA-act-neo-HR.为建立slgM λ轻链基因敲除的DT40细胞模型,探究slgM λ轻链在IBDV感染DT40细胞过程中的作用奠定了基础. 相似文献
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从鸡B淋巴DT40细胞系中克隆-βactin启动子,替换pCDNA3.1(+)载体中的SV40启动子,构建-βactin启动子驱动的Neomycin抗性基因表达框。将克隆的sIgMλ轻链基因两侧各约2 kb的序列插入到抗性表达框的两侧作为同源臂。PCR、酶切以及测序结果表明成功构建了靶向sIgMλ轻链基因的置换型打靶载体pCDNA-act-neo-HR。为建立sIgMλ轻链基因敲除的DT40细胞模型,探究sIgMλ轻链在IBDV感染DT40细胞过程中的作用奠定了基础。 相似文献
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为在分子水平解析牙鲆(Paralichthys olivaceus)抗淋巴囊肿病的机理,本研究克隆牙鲆淋巴囊肿抗病免疫相关基因efhd2和tbc1d25的c DNA全序列,运用生物信息学方法对基因序列进行了详细分析;同时,采用荧光定量PCR分析了efhd2和tbc1d25基因在牙鲆胚胎发育不同阶段、淋巴囊肿抗病和患病个体不同组织的表达特征。结果显示,efhd2基因c DNA全长为5231 bp,开放阅读框(ORF)长为699 bp,编码232个氨基酸。tbc1d25基因c DNA全长为3173 bp,ORF长为2601 bp,编码866个氨基酸。定量结果显示,efhd2和tbc1d25基因在胚胎发育的各个时期均有不同程度的表达,其中,efhd2在出膜仔鱼期表达量最高,而tbc1d25在受精卵中的表达量显著高于其他时期(P0.05)。在所研究的淋巴囊肿抗病和患病个体不同组织中,efhd2和tbc1d25基因均有不同程度的表达,抗病个体的血液中,这2个基因的表达量均显著高于患病个体(P0.05)。本研究结果为深入探讨efhd2和tbc1d25基因功能和解析牙鲆淋巴囊肿抗病机理提供了基础资料。 相似文献
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试验选用5个不同世代(F1~F5世代)的静原鸡进行鸡新城疫病毒La Sota株,禽流感H9亚型F株灭活疫苗的免疫,采用血凝抑制试验测定新城疫和禽流感抗体水平。结果表明:静原鸡F1代新城疫抗体合格率为68.9%,F5代新城疫抗体合格率达到82.2%,比F1代提高13.3%;F1代禽流感抗体合格率为100%,F5代禽流感合格率仍高达97.8%。不同世代间新城疫和禽流感的免疫效果不同,其中F1、F2、F3世代对禽流感的免疫效果没有显著变化(P0.05),但对新城疫免疫效果逐渐增强。F4和F5世代对禽流感的免疫效果相比于其他世代显著降低(P0.05);而对于新城疫的免疫效果,F4世代最高;同一世代不同群体的静原鸡免疫效果也存在差异,黑羽比白羽和麻羽效果差。 相似文献
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为探寻适用于宁夏回族自治区奶牛胎衣不下产前的生化预警指标,本实验以宁夏回族自治区某规模化奶牛场36头奶牛为研究对象,监测奶牛产前第21天~产后第21天的19项血清生化指标变化情况.结果显示:在产前第21天,胎衣不下组奶牛血液中直接胆红素和尿酸浓度显著低于胎衣正常组(P<0.05);在产前第7天,胎衣不下组奶牛血液中肌酸... 相似文献
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为了摸清宁夏地区肉牛和奶牛牛支原体(Mycoplasma bovis)感染情况及流行趋势,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2013年-2015年采集自宁夏地区肉牛主要养殖区的57个肉牛场886份血清和奶牛主要养殖区的39个奶牛场1 088份血清进行检测.结果发现,2013年抽检的16个奶牛场阳性率为32.17%(148/460),场群阳性率100%(16/16);2014年抽检的银川地区12个奶牛场,阳性率为26.52%(61/230),场群阳性率100%(12/12);2015年抽检的11个奶牛场,阳性率为44.97%(179/398),场群阳性率100%(11/11);2014年阳性率较2013年和2015年低,2015年最高,2013年与2014年阳性率差异不显著(P>0.05),2015年与2013年和2014年的阳性率差异极显著(P<0.01).2013年抽检的19个肉牛场,阳性率为7.26%(18/248),场群阳性率为26.32%(5/19);2014年抽检的38个肉牛场,阳性率为5.02%(32/638),场群阳性率为50%(19/38);2014年较2013年的阳性率低,但差异不显著(P>0.05),而且部分地区和肉牛场未检测到牛支原体阳性血清.上述结果表明,宁夏地区奶牛养殖场牛支原体感染状况较为严重,应引起养殖场的高度重视. 相似文献