猪葡萄球菌脱落毒素多重PCR检测方法的建立与初步应用

根据GenBank已发表的猪葡萄球菌的6种脱落毒素基因序列,设计合成了6对相应的特异性引物,通过特异性、敏感性和重复性试验建立了可行的多重PCR检测方法。用该方法对临床分离到的9株猪葡萄球菌进行检测,均扩增出了与预期大小相符的23SrDNA（662bp）条带;同时,其中6株分别扩增出了EXHA（316bp,2株）、EXHC（525bp,2株）和Shet-A（814bp,2株）基因特异性条带;另外3株均未扩增出任何毒素基因特异性条带,鉴定为无毒力菌株,以上结果与生化鉴定及单一PCR检测测序结果一致。结果表明,本试验所建立的多重PCR方法不仅操作快速方便、节约试验成本,而且具有高度特异性、敏感性和良好的重复性,可用于仔猪渗出性皮炎的诊断和猪葡萄球菌的快速鉴定。     

猪瘟病毒囊膜蛋白E2的锚定序列部分缺失对其在细胞内表达的影响

为了将猪瘟病毒(CFSV)的囊膜蛋白表达在细胞表面,本研究根据与CSFV同属的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的囊膜蛋白E2锚定序列,推测出CSFV的E2锚定序列。利用生物信息学软件对CSFV的E2锚定序列进行分析、建模与部分缺失,构建成4种不同的表达CSFV囊膜蛋白EmsE1E2的片段。将以上4种片段分别连接到真核表达载体pCAGGS中,转染幼仓鼠肾(BHK21)细胞,利用抗E2蛋白的单克隆抗体对表达蛋白进行westernblot检测与间接免疫荧光(IFA)检测,研究结果表明:跨膜区中锚定序列的部分缺失会降低E2在细胞内的表达,为猪瘟伪型病毒的研制提供了实验依据。     

发酵马铃薯渣代替麸皮饲喂生长肥育猪试验

选用２２头大约克夏（♂）×北京花猪Ⅱ系（♂）杂交猪设３组。分别词喂以发酵马铃薯渣代替等量鼓皮的饲粮。试验Ⅰ组（体重３０～６０ｋｇ）添加４％，后期（６０～９０ｋｇ）添加８％；试验Ⅱ组（体重３０～６０ｋｇ）添加６％，后期（６０～９０ｋｇ）添加１２％；对照组不加发酵马铃薯渣。３组平均日增重分别为６０１．３３、５３７，７０、５３１．００ｇ，饲料报酬分别为３．５０：１，３．６５：１、３．５１：１，各组间平均日增重和饲料报酬差异均不显著。结果表明，发酵马铃薯渣加入饲粮中代替部分麸皮是可行的，可明显降低饲料成本。     

日粮锌缺乏继发的生长限制对肉仔鸡维生素A代谢影响的研究

以玉米淀粉和低锌豆粕为主要原料构成含锌4．67mg／kg的半纯合低锌基础日粮，将150只1日龄艾维茵肉仔鸡随机分为3个自由采食组与2个限制采食组。其中．自由采食组日粮是在低锌基础日粮中分别添加0、5、80mg／kg的锌，各组的VA添加水平均为3000 IU／kg日粮。2个限制采食组的日粮锌添加水平为80mg／kg，其它营养成分及采食量控制到与相应的低锌组一致的水平。结果表明，日粮锌水平低于9．67mg／kg时，可引起肉仔鸡血清VA浓度的明显下降。日粮锌含量为4．67mg／kg时，血清VA浓度的下降既与缺锌本身有关，又与因缺锌继发的采食量下降有关；日粮锌含量为9．67mg／kg时，血清VA浓度的下降主要是由缺锌继发的采食量下降引起的。限制采食也可引起肉仔鸡血清VA浓度的下降，但对血清锌浓摩无明显的影响。     

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌FnbpB-D基因的表达及其抗血清活性

纤维素结合蛋白B(FnbpB)是金黄色葡萄球菌(S.aureus)最主要的黏附因子之一,它能够介导S.aureus结合于细胞表面的纤维连结素(Fn)和纤维蛋白原(Fg)。FnbpB基因中D区为主要活性部位。本实验利用pET-32a表达载体表达了S.aureus FnbpB-D重组蛋白(34.7ku),并通过动物实验对重组FnbpB-D蛋白的抗血清活性进行了初步研究。采用ELISA对抗血清进行抗粘附性检测,结果显示实验组与对照组差异极显著(p0.01),抗血清具有较强的抑制S.aureus黏附纤维连结素的作用。此外,调理吞噬实验结果显示,免疫兔全血对S.aureus有较强的调理作用。这些实验结果将为制备奶牛乳房炎S.aureus黏附素疫苗的研制提供参考。     

瘤胃内分解纤维素细菌的分离与鉴定

<正>纤维素是自然界中最丰富的可再生自然资源,它的降解是自然界碳素循环的中心环节。我国的纤维素资源极为丰富,每年农作物秸杆的产量达到5.7×108t,约相当于我国北方草原年打草量的50倍。目前这部     

华南地区猪圆环病毒1型与2型感染情况调查及相互关系

根据已发表的猪圆环病毒1型(PCV-1)与猪圆环病毒2型(PCV-2)的全基因组序列,设计4对特异性引物,用套式PCR方法对广东地区的规模养猪场或个体养殖户送检的144份猪血清进行了PCV-1与PCV-2病毒检测.结果显示PCV-1阳性血清21份,PCV-2阳性血清40份,PCV-1与PCV-2均为阳性的血清7份,PCV-1阳性率为14.6%,PCV-2阳性率为27.8%;PCV-1与PCV-2均为阳性的阳性率为4.9%,从数据上的比较可知PCV-2的感染率高于PCV-1的感染率.说明PCV-2感染比较普遍,患病猪群中也存在一定比例的PCV-1病毒感染.     

甘草多糖对小鼠血红蛋白和巨噬细胞的影响

将从甘草根中提取的多糖(GPS)给小鼠腹腔注射,测其对小鼠血红蛋白(Hb)及巨噬细胞(ΜΦ)吞噬功能的影响。结果表明GPS对机体Hb和ΜΦ吞噬功能均无显著影响。