产蛋鸡脑脊髓炎的诊断

１９９８年１０月份,洛阳市郊区某鸡场的产蛋高峰期鸡群突然出现无任何病症的产蛋率下降,在１０天内产蛋率由９５％下降到５０％左右,之后逐渐回升,１个月后产蛋率又恢复到９０％以上。为弄清原因,我们对此现象进行初步的研究,最终确定该群鸡患的是成年鸡脑脊髓炎,...     

鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Dot—ELISA诊断法的建立及应用

以醋酸纤维素膜作为固相载体，辣根过氧化物酶标记鸡抗传染性法氏囊病病毒抗体，饱和二氨基联苯胺为底物显色，建立了鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断法，经方阵实验确定最佳反应条件为：ＩｇＧ的包被液为０．０５ｍｏｌ／Ｌ（ＰＨ９．６）碳酸盐缓冲液，包被浓度为１、５０；酶标抗体的工作浓度为１；１００；洗涤液为含０．０５％吐温－８０的０．０２ｍｏｌ／Ｌ（ＰＨ７．４）磷酸盐缓冲液；封闭液为含０．２％     

鸡传染性囊病双抗体夹心Dot-ELISA诊断法的建立及应用

本研究以醋酸纤维素膜作为固相载体、辣根过氧化物酶标记鸡抗传染性囊病病毒抗体(IBD—IgG)、饱和联苯胺为底物显色建立了一种简便、快速、敏感的鸡传染性囊病双抗体夹心Dot—ELISA诊断法。经方阵实验确定最佳反应条件为:IgG的包被液为0.05MpH9.6碳酸缓冲液,包被浓度为1:50;酶标抗体的工作浓度为1:100;洗涤液为含0.05％吐温—80的0.02MpH7.4磷酸缓冲液,封闭液为含0.2％明胶的洗涤液,封闭时间,抗原及酶标抗体的作用时间均为37℃30分钟。应用本方法和琼扩试验一同检测20份已知阳性病料,120份待检病料和胚毒尿囊液、10份正常鸡样品进行对比试验,结果表明Dot—ELISA阳性率为90％,而AGP只有40％;凡AGP阳性者,Dot-ELISA匀呈强阳性,而在Dot—ELISA阳性样品中,只有44％AGP阳性,其敏感度比AGP高100倍。     

接种传染性喉气管炎细胞弱毒菌鸡的免疫反应及体内的病毒分布

分别应用传染性喉气管炎(ILT)细胞苗(CA)和非细胞苗(CF)免疫接种鸡,在其血清中可检测到中和抗体、IgG和IgM—ELISA抗体,而在气管冲洗物中均未检测到任何抗体。经比较发现,接种CA苗的鸡比接种CF苗的鸡获得了较高的保护性免疫力,且前者比后者产生了较强的抗体应答反应,但抗体滴度的高低与保护力之间的相关性较差。无论经皮下接种CA苗还是CT苗,在接种后6天内,均可在肝、脾、胸腺、肺脏及其他器官中分离到ILT病毒。病毒分离率的高低与接种CA苗或CF苗没有直接关系。     

应用降落PCR检测减蛋综合征病毒的研究

根据已发表的减蛋综合征病毒(EDSV)核苷酸序列设计了1对扩增长度为1．1kb左右的引物，采取降落PCR对EDSV-gDNA进行扩增。结果，从2份EDSV鸭胚尿囊液、3份人工感染鸡输卵管组织液的核酸抽提物中，均扩增出与设计大小完全一致的目的片段，而对照样品的扩增均为阴性，该方法最低可检测到32Pg的EDSV-gDNA。表明该降落PCR用于检测EDSV特异性和敏感性均较强，可用于减蛋综合征的诊断。     

鸡减蛋综合征油乳灭活苗的制备及其免疫效果的测定

本研究以鸡减蛋综合征(EDS—76)当地流行毒株做为种毒培养病毒,配以油佐剂制奋了鸡减蛋综合征油乳灭活苗。经实验室免疫试验和大田免疫试验证明,该苗在免疫后第10天即可产生坚强的免疫力(HI效价为8.5log2),到第30天血清中HI效价达到高峰(11.25log2),直到第150天,其HI效价仍为(7.5log2)。对所有用苗鸡群(10万余只)跟踪调查10个月,未发现有发病鸡群,免疫效果普遍反映良好。保存期试验证明,该苗在4℃可保存18个月以上,室温阴暗处可保存10个月以上,这些均证明该苗产生免疫力快,强而且持久,可以有效地控制鸡减蛋综合征在本地区的流行,应进行大面积的推广应用。     

鸡传染性法氏囊病油乳剂组织灭活苗的研制与免疫效果测定

选择自然发病鸡有典型病变之法氏囊．研制了油乳剂组织灭活苗,试验接种健康雏鸡第10、20、30、60、90和120天后,其血清AGP抗体阳性率分别为20％、50％、100％、100％、100％和70％。免疫后第60天攻击IBD强毒,保护率为100％,对鸡无毒副作用,室温保存12个月不影响免疫效果。