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鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Dot—ELISA诊断法的建立及应用 总被引:3,自引:1,他引:3
以醋酸纤维素膜作为固相载体,辣根过氧化物酶标记鸡抗传染性法氏囊病病毒抗体,饱和二氨基联苯胺为底物显色,建立了鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Dot-ELISA诊断法,经方阵实验确定最佳反应条件为:IgG的包被液为0.05mol/L(PH9.6)碳酸盐缓冲液,包被浓度为1、50;酶标抗体的工作浓度为1;100;洗涤液为含0.05%吐温-80的0.02mol/L(PH7.4)磷酸盐缓冲液;封闭液为含0.2% 相似文献
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本研究以醋酸纤维素膜作为固相载体、辣根过氧化物酶标记鸡抗传染性囊病病毒抗体(IBD—IgG)、饱和联苯胺为底物显色建立了一种简便、快速、敏感的鸡传染性囊病双抗体夹心Dot—ELISA诊断法。经方阵实验确定最佳反应条件为:IgG的包被液为0.05MpH9.6碳酸缓冲液,包被浓度为1:50;酶标抗体的工作浓度为1:100;洗涤液为含0.05%吐温—80的0.02MpH7.4磷酸缓冲液,封闭液为含0.2%明胶的洗涤液,封闭时间,抗原及酶标抗体的作用时间均为37℃30分钟。应用本方法和琼扩试验一同检测20份已知阳性病料,120份待检病料和胚毒尿囊液、10份正常鸡样品进行对比试验,结果表明Dot—ELISA阳性率为90%,而AGP只有40%;凡AGP阳性者,Dot-ELISA匀呈强阳性,而在Dot—ELISA阳性样品中,只有44%AGP阳性,其敏感度比AGP高100倍。 相似文献
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分别应用传染性喉气管炎(ILT)细胞苗(CA)和非细胞苗(CF)免疫接种鸡,在其血清中可检测到中和抗体、IgG和IgM—ELISA抗体,而在气管冲洗物中均未检测到任何抗体。经比较发现,接种CA苗的鸡比接种CF苗的鸡获得了较高的保护性免疫力,且前者比后者产生了较强的抗体应答反应,但抗体滴度的高低与保护力之间的相关性较差。无论经皮下接种CA苗还是CT苗,在接种后6天内,均可在肝、脾、胸腺、肺脏及其他器官中分离到ILT病毒。病毒分离率的高低与接种CA苗或CF苗没有直接关系。 相似文献
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根据已发表的减蛋综合征病毒(EDSV)核苷酸序列设计了1对扩增长度为1.1kb左右的引物,采取降落PCR对EDSV-gDNA进行扩增。结果,从2份EDSV鸭胚尿囊液、3份人工感染鸡输卵管组织液的核酸抽提物中,均扩增出与设计大小完全一致的目的片段,而对照样品的扩增均为阴性,该方法最低可检测到32Pg的EDSV-gDNA。表明该降落PCR用于检测EDSV特异性和敏感性均较强,可用于减蛋综合征的诊断。 相似文献
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本研究以鸡减蛋综合征(EDS—76)当地流行毒株做为种毒培养病毒,配以油佐剂制奋了鸡减蛋综合征油乳灭活苗。经实验室免疫试验和大田免疫试验证明,该苗在免疫后第10天即可产生坚强的免疫力(HI效价为8.5log2),到第30天血清中HI效价达到高峰(11.25log2),直到第150天,其HI效价仍为(7.5log2)。对所有用苗鸡群(10万余只)跟踪调查10个月,未发现有发病鸡群,免疫效果普遍反映良好。保存期试验证明,该苗在4℃可保存18个月以上,室温阴暗处可保存10个月以上,这些均证明该苗产生免疫力快,强而且持久,可以有效地控制鸡减蛋综合征在本地区的流行,应进行大面积的推广应用。 相似文献
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鸡传染性法氏囊病油乳剂组织灭活苗的研制与免疫效果测定 总被引:1,自引:0,他引:1
选择自然发病鸡有典型病变之法氏囊.研制了油乳剂组织灭活苗,试验接种健康雏鸡第10、20、30、60、90和120天后,其血清AGP抗体阳性率分别为20%、50%、100%、100%、100%和70%。免疫后第60天攻击IBD强毒,保护率为100%,对鸡无毒副作用,室温保存12个月不影响免疫效果。 相似文献