西藏牦牛血清乳酸脱氢酶H亚基的遗传变异体

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析西藏嘉黎和亚东地区８５头牦牛血清乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶。结果显示，牦牛血清ＬＤＨ同工酶具有ＬＤＨ１￣ＬＤＨ５五种形式，ＬＤＨ的Ｈ亚基存在Ａ、Ｂ、Ｃ三种遗传变异体，Ｃ型遗传变异体平均占８２．３５％。值得注意的是，嘉黎地区具有Ａ或Ｂ型Ｈ亚型的牦牛血清中ＬＤＨ２的相对活力显著低于具有Ｃ型Ｈ亚基的牦牛，其机制和意义有待进一步研究。     

藏系绵羊MSTN基因在不同年龄不同组织的表达定量研究

Dermatophyte infection or ringworm is a superficial cutaneous infection with one or more of the fungal species of the keratinophilic genera Microsporum, Trichophyton, or Epidermophyton and is a zoonosis with a great impact on public health. Dermatophytes were identified from rabbit sample cultures submitted to mycological examination in the Laboratory of Microbiology of the University of Tr~-os-Montes e Alto Douro, Vila Real, Portugal. All samples were collected from suspected clinical cases. Dermatophytes were cultured from 4 of the 55 specimens （7.3%）. The dermatophytes isolated were Trichophyton mentagrophytes var. mentagrophytes （1.8%） and Microsporum gypseum （5.5%）. Microscopic examination was negative in all specimens. In this work, Scopulariopsis spp., a contaminant mould, was identified in 13 specimens （23.6%）. The proportion of positive samples in relation to the number of samples examined from cases suspected was very low. As all samples were collected from rabbits with compatible signs, we presume that the low prevalence of isolation was due to laboratory constraints on dermatophytes diagnosis.     

牦牛解偶联蛋白 3基因的克隆测序和肌肉表达谱

为了比较高原牦牛和低海拔地区黄牛解偶联蛋白-3(UCP3)基因序列及其在骨骼肌中的表达水平,采用RT-PCR方法从牦牛背最长肌中克隆UCP3基因,所获得的cDNA序列编码区及推导的氨基酸序列与GenBank中黄牛相应序列相比相似度均为99.04%,编码区有9个碱基差异,并导致3个氨基酸的改变。实时定量RT-PCR分析显示,牦牛背最长肌中UCP2 mRNA水平显著高于黄牛,而背最长肌中UCP3 mRNA及股二头肌中UCP2、UCP3 mRNA水平均显著低于黄牛。另外,牦牛背最长肌中Mn-SOD活力显著高于黄牛。这些特征可能与牦牛肌肉在低氧环境中的能量代谢有关。     

青海藏系绵羊BMP2基因的克隆及其序列分析

从青海藏系绵羊的皮肤中提取总RNA,根据其他物种BMP2基因的保守序列设计特异性引物,采用RT-PCR技术首次扩增出藏系绵羊BMP2DNA序列,提交至GenBank,并已取得序列号HM066200.将此片段克隆到pMD18-T载体中,经菌落PCR鉴定和DNA序列测定分析验证.结果显示,该DNA序列为356 bp的部分CDS区,编码118个氨基酸.证实所克隆序列为BMP2,符合BMP2基因的特征.     

荷斯坦奶牛乳中上皮粘蛋白MUC1的多态性研究

本实验采用十二烷基硫酸钠——聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)研究了50头荷斯坦牛乳的MUC1的生化遗传特性。实验结果表明:荷斯坦牛乳MUC1呈现多态性,呈现出一条或两条迁移率不同的区带,从中共发现5种分子量分别为196kd、190kd、183kd、176kd、156kd的复等位基因的MUC1区带。由此可知,荷斯坦牛乳MUC1基因座受A、B、C、D、E5个复等位基因支配,表现出6种基因型。     

青蒿鲨烯合酶cDNA的克隆与序列分析

[目的]对青蒿鲨烯合酶进行cDNA克隆,并进行序列分析。[方法]根据GenBank上已发表的鲨烯合酶cDNA基因序列设计1对特异性引物,提取青蒿细胞总RNA,运用RT-PCR扩增出鲨烯合酶基因。将其与pMD19-T载体连接,并对克隆片段序列进行分析。[结果]SS基因全长1257bp,编码418个氨基酸;同源性分析表明,青蒿SS基因序列与人参、积雪草、金铁锁、大豆、辣椒、百脉根、远志、玉米、褐家鼠、小鼠以及人相应序列的同源性分别为77.21%、76.11%、75.66%、74.62%、73.83%、74.46%、73.03%、64.39%、52.22%、50.51%和50.12%;氨基酸同源性分别为79.43%、79.00%、75.84%、79.43%、77.27%、77.27%、77.03%、66.03%、40.65%、40.19%和40.09%。[结论]青蒿鲨烯合酶cDNA的成功克隆,为进一步研究SS基因结构、基因表达与调控提供了重要依据。     

半奶牦牛泌乳生理生化特点的研究

 对两种泌乳类型的牦牛 ,即全奶牦牛和半奶牦牛乳的生化组成、凝乳特点以及血浆中 3种激素、血糖、蛋白质的含量等进行了比较研究。结果显示 ,半奶麦洼牦牛和半奶九龙牦牛乳中的蛋白质、乳脂含量以及碱性磷酸酶、γ 谷氨酰转肽酶的活力均显著高于相应品种的全奶牦牛 ,挤乳量显著降低 ,乳糖含量和乳蛋白主要组分未见明显差异。半奶牦牛乳的生化组成与处于泌乳后期牦牛的乳相比有相似之处 ,但也有一些明显的差异 ,提示半奶牦牛处于特殊的泌乳阶段。全奶和半奶麦洼牦牛乳中加入凝乳酶均能较好地凝乳 ,两者的凝乳时间差异不显著。半奶牦牛血浆中催乳素、孕酮浓度与全奶牦牛相比未见明显差异 ,而 17β 雌二醇含量则显著低于全奶牦牛     

藏山羊及其杂交后代乳中矿物质含量的分析

测定了藏山羊及其同安哥拉山羊杂交一代乳中Ｋ、Ｎａ、Ｃａ、Ｐ、Ｍｇ的含量。结果显示：藏山羊及其杂交后代乳中的Ｃａ含量显著高于牛乳，其它元素的含量接近牛乳。同藏山羊相比，杂交一代乳中Ｃａ含量高，Ｐ含量罗低。还发现，藏山羊初乳中Ｎａ、Ｍｇ的含一显著高于常乳，而Ｋ的含鞭工于常乳，反映了乳腺在初期期矿物质的分泌特点，该结果为山羊乳的研究利用及羔羊的饲养提供了一定依据。     

四川4个地方山羊品种(群体)MHC-DRB3外显子2的多态性

采用TaqⅠ、PstⅠ和HaeⅢ限制性内切酶对四川4个地方山羊品种(群体)GoLA-DRB3基因第二外显子的特异性扩增产物进行消化。结果表明:山羊GoLADRB3第二外显子多态性极丰富,在122,154,168,220,241位点的碱基且为多碱基突变;X2适合性检验表明金堂黑山羊和富顺黑山羊GoLADRB3基因的第二外显子第122位点的碱基突变未达到HardyWeinberg平衡状态;4个山羊品种(群体)在第241位点的碱基突变均已达到HardyWeinberg平衡状态;金堂黑山羊、成都麻羊和乐至黑山羊在HaeⅢ酶切位点均未达到HardyWeinberg平衡状态。     

成都地区猫传性腹膜炎病毒ORF3、7b以及S基因七肽重复区1序列的分析

猫传性腹膜炎(FIP)是由猫冠状病毒引起的猫科常见致死性传染病。为分析成都地区猫传性腹膜炎病毒(FIPV)部分基因的序列特征,本研究从11只FIP患猫的腹水中提取总RNA,采用普通PCR或套式PCR对FIPV的非结构蛋白基因ORF3 (3a、3b和3c)、7b以及S基因七肽重复区1 (HR1)序列进行PCR扩增并测序。结果显示:检测到FIRV的上述几个基因均呈遗传多样性,序列存在很大的个体间差异。3a和3b基因主要表现为氨基酸突变,3c基因在约89%的样品中存在截短。7b基因有7个位点的氨基酸被完全替换。S基因HR1序列融合肽的1045位甲硫氨酸被亮氨酸替换,其下游的1057位丝氨酸被丙氨酸替换。遗传进化树显示,本实验扩增的FIRV 7b及S基因HR1序列与GenBank中国外FIPV相应基因序列亲缘性较高。推测3c基因的截短和/或某些氨基酸的替换的共同作用与病毒的致病性有关。本研究结果为FIP的临床确诊提供了分子诊断依据,增加了临床诊断结果的可靠性。