猪繁殖与呼吸综合征病毒(平谷株)的分离和鉴定

2010年10月,北京某猪场发生以流产、呼吸困难、全身发紫、死亡为特征的流行性传染疾病,采集发病猪的肺脏、脾脏、淋巴结等研磨成组织混悬液,接种Marcl45细胞,该分离物能在Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变(CPE)。收取细胞病毒液并提取总RNA,采用RT-PCR方法,利用PRRSV引物扩增出了目的基因片段,经过测序分析证实具有PRRSV特征。根据流行病学、临床特征、病毒分离、RT-PCR等,最终确定该分离株为猪繁殖与呼吸综合征病毒。     

重组绵羊pEGFP-PRNP质粒构建及真核细胞转染

构建了携带绵羊朊蛋白基因（PRNP）的重组真核转染质粒,通过脂质体转染试剂将其转染至神经胶质瘤细胞（C6）,以期为进一步研究绵羊朊蛋白的生理功能和从细胞水平研究朊蛋白疾病的发病机制奠定基础。采用PCR扩增目的基因序列,纯化后将其克隆到带有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因的真核表达载体pEGFP-N1中,对重组质粒pEGFP-PRNP做酶切鉴定。而后采用阳离子脂质体转染法将重组质粒转染到C6细胞,荧光显微镜观察。经鉴定,绵羊PRNP基因已克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,成功地构建了重组pEGFP-PRNP质粒,并可稳定地在C6细胞中表达。本研究为外源朊蛋白在细胞中表达提供了平台,为进一步在细胞水平研究朊病毒疾病奠定了基础。     

牦牛新鲜囊胚与玻璃化冻融囊胚转录组的比较分析

旨在探讨牦牛在囊胚玻璃化冷冻前后转录组差异表达,明确玻璃化冷冻对牦牛囊胚基因表达谱的影响。采用体外受精生产的牦牛新鲜囊胚和玻璃化冻融囊胚为研究对象,分别提取总RNA,使用Smart-seq2方法进行扩增、构建文库、转录组测序(RNA-seq),以|log2(冻胚/鲜胚)|≥1和Q0.05为阈值筛选差异表达基因(DEG),并对DEGs进行GO功能富集和KEGG分析。结果表明,冷冻前后牦牛囊胚中分别检测到9 827和13 567个转录本。在两个文库共筛选出11 174个DEGs,其中有7 037个在冻融囊胚上调,4 137个下调。有10 538个DEGs显著富集(P0.05)到479条GO terms上,共涉及318条通路,其中真核生物的核糖体合成、剪接体和神经活性配体-受体互作等8条通路显著富集(P0.05)。本研究利用RNA-seq技术分析了牦牛囊胚在玻璃化冷冻前后转录组变化,为探讨牦牛囊胚冷冻损伤机制及进一步完善冷冻方法提供理论依据。     

抓质量 抓销售 降耗增收度困境——南部玛钢管件厂困境之中谋发展

南部盘龙玛钢管件厂是生产玛钢水暖管件的专业厂家。年产水暖管线连接件500万(套)件。产品远销海南、青海、北京等15个省、市,1989年产值达到185万元,销售165万元,税利18万元。分别比1988年增长29%、31%、16%。今年创税利20万元左右。几年来,厂内添置设备百多台(套),扩大生产能力5倍多,扩大生产场地500多平方米,建宿舍2700平方米;培训专业技术人才14个,职工平均收入增加2倍多;该厂生产的玛钢管件1988年获地区优秀产品和省乡镇企业龙年优秀产品称号,连续两年受到地县表影奖励;厂长陈帮文还当选为省农民企业家研究协会理事。     

谈谈肉鸡猝死综合症

家禽猝死综合症（SuddenDeathSyn-drome,SDS）除普遍发生于肉鸡外,蛋用型鸡和重型火鸡中也有发生。对发生于各种家禽的猝死综合症,尽管目前还不甚清楚,但许多学者都发现,它们在死亡前后的很短时间内,有许多相似特征,如突然死亡、死前翻跳、死后两脚朝天等,因此,群众多把此病简单地称为“暴死症”、“翻跳病”、“两脚朝天症’等。肉鸡SDS首次于1986年大群发生于德尔马瓦半岛,随后,世界许多地区都有了关于本病的报道,我国江苏海门也正式报道过。因其发病急、死亡快,且主要损害生长速度较快,体况良好的个体,往往对肉鸡饲养…     

万寿菊组织培养体系的建立

以万寿菊为试材,采用叶片和茎段作为外植体,研究其组织培养不同阶段的最佳培养基,以建立万寿菊组织培养技术体系。结果表明:叶片是诱导愈伤组织的良好材料,适合叶片诱导愈伤组织的培养基是MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L;适合愈伤组织分化不定芽的培养基是MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;适合生根的培养基是1/2MS+IAA 0.8mg/L+IBA 1.0mg/L。     

不同土地利用方式对土壤氮磷和重金属含量的影响

以贵州威宁草海流域为研究对象,采用现场采样及室内分析测试方法,研究了流域不同土地利用方式对土壤氮磷和重金属的影响及土壤氮磷与重金属之间的相关性。结果表明:土壤总氮、总磷含量均表现为梯平地城镇用地坡耕地草地林地,梯平地和城镇用地显著高于草地和林地(P0.05),坡耕地显著高于林地(P0.05),梯平地、城镇用地和坡耕地,草地和林地均差异不显著(P0.05);镉含量表现为城镇用地(3.44 mg·kg~(-1))梯平地(3.16 mg·kg~(-1))坡耕地(2.72 mg·kg~(-1))草地(1.81 mg·kg~(-1))林地(1.56 mg·kg~(-1)),锌含量表现为城镇用地(210.10 mg·kg~(-1))梯平地(203.67 mg·kg~(-1))坡耕地(198.86 mg·kg~(-1))林地(125.53 mg·kg~(-1))草地(110.49 mg·kg~(-1)),土壤镉、锌含量在城镇用地、梯平地和坡耕地中差异不显著(P0.05),但均显著高于草地和林地(P0.05),草地与林地差异不显著(P0.05);总氮、总磷、镉和锌两两之间均呈显著或极显著的正相关关系。综上所述,不同土地利用方式影响着土壤氮磷和土壤重金属含量,与草地和林地相比,城镇用地、梯平地和坡耕地含量较高,土壤总氮、总磷、镉和锌的输入具有一定的同源性。     

基于ISE的湿土硝态氮检测方法研究

分析了含水率对离子选择电极（ISE）湿土硝态氮直测的影响,建立了一种融合土壤含水率的ISE湿土直测方〖JP2〗法。结果表明：未修正含水率影响的ISE湿土直测结果与光学检测方法结果间的绝对偏差范围为3.79~44.81mg/L,〖JP〗均方根误差大于17.00mg/L,无法满足应用需求;湿土质量含水率、浸提液添加量及干土折算量间存在线性函数关系,融合湿土质量含水率的ISE湿土硝态氮直测结果与光学检测方法结果之间具有较好的一致性,与光学检测结果回归方程的调整决定系数为0.97,绝对偏差范围为0.17~17.95mg/L,均方根误差小于7.05mg/L,检测精度和稳定性与实验室ISE干土测定性能相近,比未修正含水率影响前有明显提高。     

剩余电流动作保护器现场测试程序

按照《剩余电流动作保护器农村安装运行规程》的规定，每月对总剩余电流动作保护器（本文简称保护器）至少检查接地试跳1次。为保障测试人员及电气设备的安全，在现场测试保护器剩余动作电流值和分断时间时，应使用专用测试仪。我们依据M9000型剩余电流动作保护器测试仪的应用实践经验，编制了总保护现场测试程序，介绍给读者借鉴。     

对“观察水的沸腾”实验的改进

一、本实验过程中存在的问题一是酒精灯的火焰太弱,加热时间过长,浪费时间,课堂任务不能完成。二是一根温度计只能观察到水的温度上升特点,不能呈现、观察出沸腾前水的上、下不同部分的温度差异。三是水量选取不当,太多或太少,实验中现象