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为建立快速区分3种猪圆环病毒(PCV2、PCV3和PCV4)的现场检测方法,采用微流控芯片环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),收集3种猪圆环病毒临床阳性样本进行核酸提取,与市场上3种猪圆环病毒荧光探针法检测试剂盒进行灵敏度、特异性和重复性同步比对。结果显示:微流控芯片LAMP法在3种猪圆环病毒联检测试中具有非常高的灵敏度,可以在30 min内,实现不低于荧光定量PCR法的敏感性;与非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒临床阳性样本均无交叉反应,特异性好;测试3种猪圆环病毒重复性Ct值变异系数(CV)均在2%以下,稳定性好。结果表明:3种猪圆环病毒微流控芯片快速联检技术特异性好、灵敏度高、重复性强,检测速度快,环境要求低,可以满足现场检测的要求,适用于养猪场等场所的猪圆环病毒现场快速检测。本方法的建立为猪相关病原体的现场快速核酸检测提供了有力工具。 相似文献
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为了解四川省部分规模猪场伪狂犬病病毒(PRV)感染情况和疫苗免疫状况,采用ELISA方法,对四川省川东、川南、川西、川北、川中5个片区的17个规模猪场进行PRV血清流行病学调查。结果显示:采集的1 388份血清样品中,PRV-gB抗体总阳性率为84.51%,PRV-gE抗体总阳性率为15.63%;17个规模猪场中,PRV-g B抗体场阳性率为100%,PRV-g E抗体阳性猪场10个,场阳性率为58.82%;哺乳仔猪、保育猪、育肥猪、经产母猪、种公猪、后备猪PRV-gB抗体阳性率分别为79.52%、71.98%、77.58%、94.29%、88.33%、86.27%,PRV-g E抗体阳性率分别为30.12%、13.74%、21.71%、15.53%、1.67%、10.78%。结果表明,四川省规模猪场伪狂犬病总体免疫效果较好,但部分猪场免疫抗体水平不高,野毒感染情况也较严重,尤其是哺乳仔猪、育肥猪和经产母猪群。结果提示,四川省猪伪狂犬病流行形势仍然严峻,需要继续加强猪伪狂犬病的系统性防控,有计划开展猪群PRV净化。 相似文献
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为评估四川省规模场猪伪狂犬病(PR)发生风险,通过问卷调查了解省内种猪场、扩繁猪场、商品猪场的生产管理情况,用情景树法描述PR发生的风险路径,在世界动物卫生组织(OIE)风险评估框架下构建评估模型。根据问卷调查结果和本底调查数据,采用定性风险评估方式,用矩阵法估算各风险路径的风险值。结果显示,四川省规模场发生PR的高风险路径为引种、使用精液、未有效控制鼠害、未有效控制犬猫以及地理位置和饮水控制。近年来由于生物安全管理水平提高,经人、车、物、料等传统途径释放PR的风险大大降低,在各类型规模场开展PR净化的条件已较为成熟。在PR净化的同时开展风险评估,能帮助猪场找出风险漏洞,便于提出针对性的防控建议,为PR净化提供有力的技术支撑。 相似文献
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细菌性传染病是生猪养殖业的严重威胁之一,近年来其发病情况呈现出新变化,对动物产品质量和公共卫生安全造成严重危害。对病原进行快速、准确的检测,是预防和控制猪病的有效手段,对养猪业发展和人畜健康具有重要意义。伴随生命科学技术的发展和学科间的交叉融合,传统的病原菌分离培养、普通PCR方法和早期免疫学等检测技术均朝着精确高效的方向不断发展革新,并以传统方法为基础建立了多种新型检测技术。文章重点介绍了猪细菌性传染病病原检测的几种新技术:以核酸分子生物学为基础的实时荧光定量PCR法(qPCR)、环介导等温扩增法(LAMP)、夹心DNA杂交(DNAH)等;以免疫学为基础的免疫胶体金标记技术、时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)、免疫磁珠分离法(IMS)等;以蛋白质分子生物学为基础的细菌质谱鉴定技术;以及适用于现场快速诊断的即时检测(POCT)技术,并分析了这几种新技术的优缺点,为不同条件的检测机构和研究部门在开展猪细菌性传染病检测和研究时选择相应的方法提供一定的参考,以期在猪病预防控制中发挥更加积极的作用。 相似文献