胸膜肺炎放线杆菌菌毛研究进展

胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleurop—neumoniae，APP）是引起猪传染性胸膜肺炎的致病菌，能够引起各个年龄阶段的猪发生急性或慢性感染。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxⅢA基因的克隆和表达

以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型参考株基因组DNA为模板，PCR方法扩增出apx ，ⅢA基因3．1kb的片段，扩增产物克隆于pMD18-T中，重组质粒经酶切鉴定后进行核苷酸序列测定，并与GenBank中不同血清型胸膜肺炎放线杆菌apx11A基因进行比较，结果显示核苷酸同源性均在96％以上。将该基因片段亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1的BamHⅠ／Sal Ⅰ位点，成功构建了重组表达载体pGEX—apx ⅢA，转化大肠杆菌BL-21（DE3）中并获得表达。SDS—PAGE结果显示，表达的融合蛋白分子量约为140Ku，与预测相符，Western blot证明该融合蛋白具有免疫学活性。该融合蛋白的成功表达为猪传染性胸膜肺炎亚单位疫苗的研制奠定了基础。     

肉中两种致病菌的双重PCR检测方法的建立

为了建立肉中单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的双重PCR检测方法,以金黄色葡萄球菌nuc基因和单增李斯特菌hly基因为靶基因设计引物,通过优化退火温度和PCR反应体系,建立这两种菌的双重PCR检测方法,并分析其反应特异性和敏感性。进一步将该方法应用到人工模拟肉样中,并分析其敏感性。结果表明,建立的单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌双重PCR检测方法应用于人工模拟肉样中具有较高敏感性,其中金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌最低检测限分别为102和103 cfu.mL-1。该方法的建立为食品中多种致病菌的同时检测奠定了基础。     

胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ毒素的基因序列特征

为了深入地了解胸膜肺炎放线杆菌（APP）分泌的ApxⅡ毒素的分子结构及序列特征，本实验以一株APP7型现地分离株L25-4株为实验材料，对其分泌的ApxⅡ毒素的结构基因apxⅡA及其上游启动子区进行了PCR扩增和测序。结果表明APP7型L25-4株apxⅡA基因与其它血清型apxⅡA基因核苷酸序列同源性达99．5％以上，氨基酸序列同源性达98．5％以上。在ApxⅡA蛋白的N末端有3个大的疏水结构域，分布在240422位氨基酸之间。在ApxⅡA蛋白的C末端有富含甘氨酸（Gly）和天门冬氨酸（Asp）的九肽（nonapeptides）重复序列Leu／I1e／Phe-Xaa-Gly—Gly-Xaa-Gly-Asm／Ssp-Asp-Xaa，串连重复9次。这些结构域的起始氨基酸的位置分别为374、503、630、735、753、762、771、780和802。推定的赖氨酸酰基化作用位点为557位氨基酸，与E．coil的H1yA相比，在688位氨基酸处少了一个赖氨酸酰基化作用位点。apxⅡA基因启动子-10区序列为AATAAT，-35区序列为TTAAT，-10区与-35区间隔序列为11个碱基。     

趋磁细菌磁小体合成相关蛋白的研究进展

趋磁细菌是一类能够沿着磁场方向运动的革兰氏阴性细菌的总称,其最显著的特征是能够在胞内合成特殊的原核细胞器——磁小体。磁小体是具有外膜包被、纳米级、在胞内成链状排列的Fe3O4或Fe3S4磁性颗粒,并且具有专属的形态、大小和排列。正是因为磁小体的这些特性使不同领域的科研工作者开发着趋磁细菌的应用。另外,磁小体可以作为生物矿化和原核生物形成膜细胞器的理想模型。趋磁细菌磁小体合成相关蛋白在磁小体囊泡的形成、铁的转运、成晶的控制以及胞内磁性颗粒的排列等过程中发挥作用。文中重点介绍了近年来发现的和趋磁细菌磁小体合成相关的蛋白,并对未来磁小体蛋白的研究进行了展望。     

变量筛选在茶叶咖啡碱近红外光谱定量分析模型中的应用

研究利用近红外光谱分析技术定量测定茶叶中咖啡碱的含量,目的是通过变量筛选简化模型并提高预测精度.试验中以135个来自大闽食品公司的茶叶作为研究对象,利用基于小波系数蒙特卡罗无信息变量消除法(WT-MC-UVE)进行变量筛选并结合偏最小二乘法(PLS)建立咖啡碱定量分析模型,选择交互验证均方根误差(RMSECV)和预测集均方根误差(RMSEP)以及预测相关系数(Rp)作为模型的评价指标.应用 WT-MC-UVE筛选的90个变量所建立的模型,交互验证均方根误差,预测卷均方根误差,预测相关系数分别为0.1248、0.1611和0.9574.结果表明,该方法有效可行.     

茶鲜叶的荧光光谱特征与叶绿素含量之间的关系研究

采集的65份茶鲜叶样本中45份用来建模,另外20份用来进行模型验证,研究茶鲜叶的荧光光谱特性与叶绿索含量之间的定量关系.结果表明:叶绿素含量与685nm处的荧光强度之间具有显著的相关性;同时发现叶片含水率对建模预测精度有影响.不考虑叶片含水率时,模型的决定系数r2=0.9195,模型预测的相关系数r=0.8956.考虑叶片含水率修正后,模型的决定系数和模型预测的相关系数都提高了,分别为r2=0.9632和r=0.9260.说明基于荧光反射光谱技术可以实现茶鲜叶叶绿素含量的快速无损检测.     

食品中单核细胞增生性李斯特菌的污染及耐药现状

单核细胞增生性李斯特菌作为一种重要的食源性致病菌已引起世界各国的广泛关注.文章主要综述了近些年来该菌对食品的污染状况和该菌耐药性的发展趋势,以便人们更好地了解和掌握该菌对人类健康存在的潜在威胁,进而为制订行之有效的公共卫生政策奠定基础.     

大豆黄酮及其复合制剂对绒山羊绒毛性状和血液中激素水平的影响

本试验选用6月龄雄性辽宁绒山羊9只,随机分为3组,采用3×3拉丁方设计,研究试验基础日粮中添加大豆黄酮(3 mg/kg)及大豆黄酮与半胱胺协同应用(3 mg/Kg+100 mg/kg Bw)对绒山羊绒毛性状和血液中激素水平的影响.结果表明:大豆黄酮组血液中T3和Ins水平分别较对照组提高29.82%和9.76%(P<0.05);协同组血液中T3和Ins水平分别较对照组提高35.77%和11.18%(P<0.05).且两试验组均明显改善绒山羊绒毛品质,使绒纤维、毛纤维长度明显增长,绒纤维明显变细、毛纤维明显变粗,且协同组作用效果优于大豆黄酮组.提示大豆黄酮及其与半胱胺协同应用可通过影响神经内分泌来改善绒山羊绒毛品质.     

TaqMan探针实时定量PCR检测肉中单增李斯特菌的研究

根据GenBank公布的单增李斯特菌的hlyA基因序列设计一对引物和一条TaqMan探,在分析特异性基础上,构建阳性重组质粒进行荧光定量PCR扩增,制备标准曲线,分析敏感度.进一步将该方法应用到人工染菌肉样中,分析其最低检出限.结果表明,该方法对10株单增李斯特菌均可产生特异性扩增曲线,其他6株非单增李斯特菌不产生扩增曲线,表明该方法具有较强的特异性.对阳性重组质粒定量扩增所建立标准曲线的相关系数为0.998,敏感度为19.5 copies· μL-1.该法对人工染菌肉样中单增李斯特菌的最低检出限为2.8×102cfu·g-1.该方法特异性强、敏感性高,可为肉中单增李斯特菌的快速、准确的定量检测奠定基础.