鸡传染性支气管炎病毒SY毒株S1基因的RT-PCR扩增与克隆

利用 ＩＢＶ Ｓ１基因特异性寡聚核苷酸引物,经 ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增鸡传染性支气管炎病毒 ＳＹ毒株 Ｓ１基因,得到预期的１．７ｋｂ片段。并将扩增所得ｃＤＮＡ插入克隆质粒载体ｐＵＣ１９的ＥｃｏＲⅠ／ＢａｍＨⅠ酶切位点,在大肠杆菌ＤＨ_(5a)中实现目的基因的克隆,获得ＳＹ毒株Ｓ１基因重组质粒。     

结核分枝杆菌rv0199基因在耻垢分枝杆菌中的表达及检测

为研究结核分枝杆菌（M.tb）rv0199基因在该病原致病性中可能发挥的作用,本研究克隆了rv0199基因,在耻垢分枝杆菌（Ms）中异源表达,并对其表达进行检测。将大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV261进行改造,向载体中引入常用的6His和Strep Ⅱ重组蛋白标签,命名为pMV262。使用Ms/pMV262表达系统对rv0199基因进行超表达,用抗6His标签抗体和抗Strep Ⅱ标签抗体均能特异的检测到重组蛋白。本试验改造的pMV262穿梭表达载体可很方便的检测M.tb的基因在Ms中的异源表达,不用制备针对蛋白的多克隆抗体或单克隆抗体。构建的重组菌Ms/262-99为进一步研究rv0199基因的功能提供了材料,奠定了基础。     

抗牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的制备

为了制备抗牛γ-干扰素(IFN-γ)的单克隆抗体(McAb),并对其部分生物学特性进行初步研究,试验用重组牛IFN-γ蛋白免疫小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术和间接ELISA方法进行试验.结果表明:共获得5株抗IFN-γ的单克隆抗体,Ig亚类鉴定均为IgGI,轻链为k链;经Weatern-blot试验证实5株McAb均能与IFN-γ发生特异性反应,而与其他蛋白不发生反应,特异性好;以5株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株制备腹水,效价均达到1:50 000以上.     

禽源多杀性巴氏杆菌ompH基因序列分析

根据NCBI登录的序列(PMU50907)合成1对引物,用PCR方法扩增了郎德鹅多杀性巴氏杆菌ompH基因,预计扩增片段大小为1544 bp(ORF 1062 bp),但是分离菌实际测序片段大小为1537 bp(ORF 1056 bp)。结果分离株与参考株外膜蛋白的ORF存在6个碱基的缺失,蛋白质序列有变化。     

产蛋鸡大肠杆菌病的诊治

新疆石河子148团某个体养鸡户,笼养2568羽海兰商品蛋鸡,前期生长情况良好.6月龄时开始发病,到就诊时已发病7天,累计发病鸡126羽,累计死亡35羽,发病率为4.91%,致死率为27.78%.综合诊断为产蛋鸡大肠杆菌病,经合理用药,控制疫情.现报告如下.     

DNA探针,粪检菌和ELISA三种方法在诊断副结核病中的比较研究

本研究已在构建的副结核分枝杆菌Ｃ２株ＤＮＡ基因文库的基础上升应用正，反向杂交试验从基因文库中筛出选出特异性片段ＰＴＰ３１，以光敏生物素标记制成ＤＮＡ探针。用此ＤＮＡ探针以及粪检菌和ＥＬＩＳＡ三种方法分别对３２份副结核菌素（ＰＰＤ）变态反应阳性牛粪便及相应血清样品进行检测，其检出率分别为４７％（１５／３２），５６％（１８／３２）和３４％（１１／３２），对随机采集的２７６份牛粪便及血清样品，３种方法的     

Ⅱ系疫苗二次点眼引发新城疫

1991年5月27日对新疆石河子某鸡场的8800只10日龄依沙鸡,用鸡新城疫Ⅱ系疫苗点眼,共用12600羽份,接种后雏鸡生长良好.32日龄又用Ⅱ系苗点眼,共用9500羽份,次日早上隔离饲养的200只鸡发病,发病率100%,致死率96.5%.剖检病死鸡,见腺胃乳头出血,盲肠扁