牛结核杆菌MPB64蛋白的真核表达

利用PCR技术扩增出牛结核杆菌mpb64基因片段,克隆到真核载体pcDNA3.1(+)上,构建重组质粒pCM64,将该重组质粒转染SP2/0细胞,间接免疫荧光试验和Western blotting检测目的基因的表达情况.结果表明,在转染了重组质粒pCM64的SP2/0细胞中出现绿色荧光,转染的SP2/0细胞泳道23 kDa处出现特异条带,说明mpb64基因在SP2/0细胞中成功进行了瞬时表达.     

山羊源伪结核棒状杆菌的分离鉴定及其毒力评价

为了确定齐齐哈尔市某山羊养殖场疑似患有伪结核病病羊的病原及其毒力,试验从不同病羊的皮下脓包中采集脓汁病料3份,通过细菌的分离与纯化、生化鉴定、16S rDNA基因的PCR扩增与序列分析确定病原,并通过致病性试验对分离株的毒力进行评价。结果表明：共得到3株分离株,其菌落形态和生化特性菌与伪结核棒状杆菌相符,分别命名为CP045、CP073、CP969;分离株CP045、CP073、CP969的16S rDNA基因序列与伪结核棒状杆菌参考株的相似性分别高达98.8%、100%、99.8%,进一步确定3株分离株均为伪结核棒状杆菌。注射分离株CP073的3只小鼠中有2只于注射后36～48 h陆续死亡,1只精神极度沉郁、食欲不振;注射分离株CP045、CP969的3只小鼠于注射后5 d内均未见死亡,但状态不佳。注射分离株CP045、CP073、CP969的小鼠肝脏均不同程度出血、肿大,脾脏轻微出血;注射分离株CP073的小鼠皮肤表面有黄色脓汁渗出,皮下有黄白色玉米粒大小的结核样脓肿;注射分离株CP045和CP969的小鼠皮下未见明显脓肿。说明该山羊养殖场疑似患有伪结核病的病羊感染了伪结核棒状杆菌...     

半胱胺对仔鹅体内活性巯基含量的影响

选用3周龄的东北大白鹅14只,随机分为对照组和半胱胺(CS)组。日粮中添加CS100mg·kg-1BW,饲喂5周后,检测肌肉、肝脏中活性巯基(-SH)的含量。结果表明,CS组肌肉中-SH比对照组升高7.14%;肝脏中-SH比对照组升高2.67%(P>0.05)。另选装置翅静脉血管瘘的9周龄东北大白鹅6只,采用与上一试验相同的分组和饲喂方法。分别于第64,66,68日龄定时采血4次,检测其中-SH的含量及动态变化。结果表明,饲喂CS后,血液中-SH升高13.01%,较对照组差异不显著(P>0.05)。一周内,CS组血液中-SH的变化趋势为先上升后下降。第三天达最高值,比对照组高42.30%(P<0.05)。表明,半胱胺对仔鹅的肌肉、肝脏及血液中活性巯基含量无显著影响。     

禽源多杀性巴氏杆菌ompH基因序列分析

根据NCBI登录的序列(PMU50907)合成1对引物,用PCR方法扩增了郎德鹅多杀性巴氏杆菌ompH基因,预计扩增片段大小为1544 bp（ORF 1062 bp）,但是分离菌实际测序片段大小为1537 bp（ORF 1056 bp）。结果分离株与参考株外膜蛋白的ORF存在6个碱基的缺失,蛋白质序列有变化。     

鸡传染性支气管炎病毒地方-分离株S1基因克隆和基因型鉴定

利用ＩＢＶ全长Ｓ１基因特异性引物,以纯化的３个标准株Ｍ４１、Ｈ５２、Ｔ和６个地方分离株（ＱＤ、ＺＺ、ＧＺ、ＧＪ、ＤＬ和ＹＣ）的基因组ＲＮＡ为模板,用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出预期大小约１．７３ｋｂｃＤＮＡ片段,经ＢＡＭＨＩ和ＨｉｎｄⅢ酶切插入到质粒ｐＵＣ１８中,并在大肠杆菌ＪＭ８３中实现了克隆。对６个分离株的Ｓ１基因ＰＣＲ产物进行ＨａｅⅢＲＦＬＰ分析,表明ＱＤ、ＴＪ属于Ｍ４１基因型,ＺＺ和ＧＺ与Ｔ基因     

石河子地区奶牛蹄叶炎的发病调查与综合防治

对石河子地区5个规模化奶牛场蹄叶炎进行了调查、治疗和综合预防。调查发现春季和冬季蹄叶炎的发病率最高,一胎、二胎牛的发病率较高,分别为35.89%和31.97%,发病时间主要集中在产犊后的2～3周内,分别为34.28%和37.04%。治疗试验结果表明,早期使用抗组胺组疗效显著高于消炎激素组、静脉放血组、封闭组（P<0.05）,实施综合预防措施效果明显。     

鸡传染性支气管炎病毒的遗传与变异(二)

S蛋白与IBV的血凝性有关。冠状病毒根据凝集红细胞的能力分为两大类。一类具有很强的凝血活性,如BCV、MHV、HCV和HEV等,其病毒表面除S蛋白外还存在一种具有受体酶活性的蛋白HE,能从细胞受体Neut、9AC（N-乙酰基-9-0-乙酰基神经氨酸）的-9位碳原子上去掉乙酰基后为S蛋白识别粘附。另一类冠状病毒如IBV、TGEV和FIPV等则不具HE蛋白,因而血凝活性极弱。HE蛋白的结构功能与C型流感病毒中的HEF极为相似,因而推测前一类冠状病毒可能在进化中通过异源重组获得了HE基因。采用粗制的细菌卵磷脂酶C处理可以移去IBV表面通过a-2…     

猪源肠球菌林克酰胺、截短侧耳素及链阳菌素A类耐药基因lsa(E)的检测及传播方式

为研究lsa(E)在猪源肠球菌中的流行情况及传播方式,本研究从广西某猪场分离的56株肠球菌中检测到15株携带多重耐药外排泵基因lsa(E)的肠球菌,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对lsa(E)基因阳性的肠球菌进行亲缘关系分析,并对不同克隆型的菌株进行耐药表型和相关耐药基因型检测,通过Southem杂交定位lsa(E)基因在不同菌株中的位置.PFGE结果显示15株lsa(E)基因阳性的肠球菌共有7种不同的PFGE谱型,表明携带lsa(E)基因的肠球菌在同一猪场存在垂直传播的现象.药物敏感性试验结果显示,7株分离株除对红霉素、四环素、庆大霉素和环丙沙星100％耐药外,对利奈唑胺、氟苯尼考、利福平和左氧氟沙星也具有较高的耐药率,分别为57.1％、85.7％、71.4％和85.7％.耐药基因erm(B),aac(6')-Ⅰe-aph(2")-Ⅰa和aph(3")-Ⅲa的检出率分别为:100％、85.7％和72.4％;Southern杂交结果显示,lsa(E)基因在6株菌中定位于质粒22 kb～54 kb,而在1株菌中定位于染色体.本研究为临床制定合理措施控制lsa(E)快速传播提供依据.     

鸡β-防御素-9的融合表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

为制备鸡β-防御素-9(AvBD9)多克隆抗体,本试验将AvBD9基因插入pGEX-6 P-1载体,构建重组基因pGEX6 P-AvBD9大肠杆菌表达质粒。将通过切胶纯化获得的表达产物包涵体谷胱甘肽转移酶-AvBD9(GST-AvBD9)融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗AvBD9血清,并检测抗体效价。结果表明,经间接酶联免疫分析(ELISA)及蛋白质免疫印迹(Western blot)方法证实,获得的融合蛋白免疫新西兰大白兔得到了特异性的多克隆抗体,抗体效价为1∶38 400。