猪传染性胸膜肺炎PCR诊断方法的建立

根据已发表的猪胸膜肺炎放线杆菌APXIV毒素的基因序列，自行设计和合成了二对可扩增448bp和365bp目的片段的引物，成功的建立了检测APP的套式PCR方法。通过对猪肺疫巴氏杆菌、猪链球菌、大肠杆菌、猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体和猪丹毒杆菌的DNA进行了PCR检测，结果均为阴性；对猪胸膜肺炎放线杆菌的1、2、5、6、7、9国际标准血清型均扩增出448bp和365bp的特异性条带；检测的敏感度一步PCR可达到5OO个细菌，最低检出DNA浓度可达到0．585ng／mL；套式PCR可达到50个细菌，最低检出DNA浓度可达到58．5pg／mL。另外，对5株从病猪体内分离的猪胸膜肺炎放线杆菌进行了检测，5株均成阳性反应；对10只屠宰猪的肺脏分离物进行了检测，结果1份为阳性。结果表明此法特异性和敏感性均很高，可做为猪传染性胸膜肺炎的快速诊断和流行病学调查的手段。     

猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白单抗的制备及其抗原表位的初步分析

应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病毒 E2蛋白单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞株。它们的腹水效价在 1∶ 80 0～ 1∶ 2 10 0 0 0之间。抗体类型鉴定结果表明 ,A11、E3、H6、D5和 D8为 Ig M类型 ,B2为 Ig G类型。随后用蛋白 A凝胶层析法和 PEG沉淀法分别纯化了 Ig G和 Ig M单抗。对纯化单抗进行的抗原识别表位研究结果初步表明 ,6株单抗可能识别 3种不同的E2抗原表位。     

牛结核病研究进展

牛结核病(bovine tuberculosis)是由牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)和结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)所引起的一种人畜共患的慢性消耗性传染病,可通过病畜传染给人类或其他动物。牛结核病在世界各国均有发生,在我国依然是最常见的多发性疾病,牛结核病有众多的宿主谱,几乎可以感染所有的温血脊椎动物。牛结核病的传染流行严重地影响到畜牧业的持续健康发展,不仅造成奶牛乳房炎、结核性胸膜炎等疾病,还造成牛奶产乳率和乳质下降,更严重威胁着人类的身心健康。     

食品中单核细胞增生性李斯特菌的污染及耐药现状

单核细胞增生性李斯特菌作为一种重要的食源性致病菌已引起世界各国的广泛关注.文章主要综述了近些年来该菌对食品的污染状况和该菌耐药性的发展趋势,以便人们更好地了解和掌握该菌对人类健康存在的潜在威胁,进而为制订行之有效的公共卫生政策奠定基础.     

牛分枝杆菌分枝菌酸环丙烷合酶PCAA的表达与鉴定

以牛分枝杆菌Vallee株基因组为模板,利用PCR方法扩增该菌株的环丙烷一分枝茵酸合酶pcaA基因,并克隆到原核表达载体pET-32a（＋）中,通过大肠杆菌BL21（DE3）表达重组融合蛋白,并利用Ni-亲和层析的方法纯化出重组蛋白。通过鉴定其免疫活性。试验结果表明,成功扩增出了牛分枝杆菌中pcaA基因并纯化出了重组的融合蛋白,通过免疫印记发现,重组蛋白可与牛结核阳性血清发生特异性反应,为进一步研究牛分枝杆菌的致病机理奠定基础。     

直接从粪便中提取副结核分枝杆菌DNA的方法及其应用

分枝杆菌病是严重危害畜禽的主要传染病。长期以来,对该病的诊断一直是人们感到棘手的问题,由于分枝杆菌之间存在许多共同抗原,故使常规的诊断方法均存在着假阳性和敏感性不高的缺点。为此,急需寻求一种特导的诊断方法。核酸探针诊断技术是近年     

结核分枝杆菌rv3036c基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

为制备结核分枝杆菌(Mtb) rv3036c基因的多克隆抗体,本研究以Mtb强毒株H37Rv基因组DNA为模板,扩增rv3036c基因,克隆至表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-rv3036c,并转化大肠杆菌BL21(DE3),经1 mmol/L IPTG诱导表达组氨酸标签融合蛋白Rv3036c,采用Ni-NTA His-Bind Resin纯化目的蛋白,经western blot验证纯化蛋白.将Rv3036c蛋白纯化产物免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.SDS-PAGE和western blot分析结果表明,Rv3036c以可溶形式表达,蛋白分子量大小为28 ku,并且具有良好的免疫原性.以上结果为进一步研究rv3036c基因在Mtb的致病性作用奠定了基础.     

鸡传染性鼻炎追踪调查

鸡传染性鼻炎是肉鸡副嗜血杆菌引起的先急后慢疫病。本病在新疆石河子很少发病。１９９８年８月后，在新疆石河子５家大型鸡场相继发病，经治疗控制疫情，出现反复发病，病程长达６０天至９０天，造成较大损失。笔者参加本次鸡传染性鼻炎发病情况调查、诊断、治疗、病因调...     

鸡传染性支气管炎病毒的遗传与变异(一)

鸡传染性支气管炎（ａｖｉａｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉ－ｔｉｓ，ＩＢ）已成为养禽业中危害最大的病毒性传染病之一。鸡传染性支气管炎病毒（ａｖｉａｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎ－ｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓ，ＩＢＶ）基因组ＲＮＡ的点突变、缺失、插入和不同毒株基因组间的同源重组是造成病毒临诊表现、病理变化、血清型、基因型、病毒复制、结构蛋白免疫原性及其免疫机制变异的主要分子基础。本文从以上几个方面系统综述ＩＢＶ遗传变异的特性及其分子基础。一、临诊表现ＩＢ的临诊表现差异极大，主要取决于鸡体免疫状态、鸡群…     

花生网斑病研究进展

花生网斑病 (ＰｈｏｍａａｒａｃｈｉｄｉｃｏｌａＭａｒａｓａｓ,Ｐａｕｅｒ＆Ｂｏｅｒｅｍａ) ,又称云斑病、污斑病 ,是我国近年来新发生的一种叶部病害[1 7] 。 1 972年 ,美国德克萨斯州首先发现花生网斑病。 1 982年在我国山东、辽宁等省花生主产区首次发现花生网斑病 ,此后在陕西、河南等省相继发生[3 ,8] 。花生网斑病能导致花生生长后期大量落叶 ,影响产量 ,一般可减产 1 0 %～ 2 0 % ;严重的达 30 %以上[3 ,6 ,8,1 0 ,1 9] 。为了控制该病的发生与危害 ,国内外学者对花生网斑病进行了系统的研究 ,明确了病原菌的分类地位 ,摸清了病…