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丁达尔效应定位伪狂犬病病毒密度梯度离心区带 总被引:1,自引:0,他引:1
在病毒密度梯度离心纯化过程中,利用光对不同大小粒子发生散射的强弱,即丁达尔效应,定位超速离心后形成的离心区带;以伪狂犬病毒为研究对象,以不连续梯度蔗糖为介质,超速离心后,通过光束对离心区带生的丁达尔效应进行精确分层取样,并对处理后的离心区带样品分别进行透射电镜观察,发现区带3中存在大量符合伪狂犬病病毒形态学特征的病毒颗粒。本研究将光学物理现象与经典病毒纯化方法相结合,大大提高了病毒纯化成功率,对密度梯度离心法提纯各种病毒或者蛋白的实验操作均有指导意义。 相似文献
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为控制在我国流行的H5N1高致病性禽流感(Avian influenza virus,AIV)和筛选具有标记的疫苗毒株,用流行的H5N1亚型AIV的HA基因和H9N2亚型AIV的NA基因及H1N1亚型AIV(A/PR/8/34毒株)的6个内部基因通过流感8质粒反向遗传操作系统拯救了重组病毒rH5N2/PR8株。为了降低重组病毒的毒力,对H5N1亚型AIV的HA基因进行了修饰,使其裂解模式由PLRERRRKR↓GL修饰为PLIETR↓GL。将获得的rH5N2/PR8株在9日龄SPF鸡胚上连续传10代。该重组病毒的血凝效价稳定在1:2048,其半数感染量(EID50)可达10-8.77/0.1 mL。该病毒的毒力显著降低,对鸡胚的半数致死量(ELD50)为10-5/0.1 mL。将该病毒灭活与油佐剂乳化,制成灭活疫苗,给6周龄SFP鸡接种不同剂量,接种21 d后,用H5N1流行野毒A/Chicken/SD/2010(H5N1)攻击,结果显示:接种剂量为0.1 mL/只的试验组,10只鸡中有5只获得保护;接种0.3 mL/只的试验组可获得100%保护。以上说明,本实验获得的重组病毒具有疫苗标记、繁殖滴度高、毒力低、免疫原性好等特点,非常适合作为"标记疫苗"候选株,为AIV(H5N1)的标记疫苗研发奠定了坚实基础。 相似文献
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为分离鉴定流产犬的致病病原及其生物学特性,本研究从重庆某宠物医院无菌采集流产犬全血2份,将其涂布于布鲁氏菌选择培养基,分别在不含CO2和含7.5%CO2条件下37℃培养72 h,观察菌落形态,并经结晶紫染色,观察细菌类型。按照国家标准鉴定分离菌的生化特性。细菌分离结果显示,在不含CO2和含7.5%CO2的培养箱中2份流产犬全血样品在布鲁氏菌选择培养基上均长出边缘整齐、光滑的圆形菌落,透射光下,菌落呈浅黄色且有光泽;结晶紫染色结果显示分离菌为典型的粗糙型细菌;生化鉴定结果显示,分离株在TSA中的生长不依赖于CO2,且不产生H2S,氧化酶和脲酶试验均为强阳性。上述结果表明分离到一株犬种布鲁氏菌,命名为B. canis CQ3。对分离菌进行全基因组测序,利用MAUVE对分离株与GenBank中38株不同种的布鲁氏菌基因组进行比对,并构建分离菌全基因组的进化树。将不同种布鲁氏菌及分离株分别接种于TSB培养基中,通过测定不同时间的OD450nm值绘制各菌株的生长曲线。将各菌株及B. canis CQ3株分别以MOI 100感染小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,在感染后的不同时间(1 h、24 h... 相似文献
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禽流感是由正粘病毒科中的H5亚型禽流感病毒(AIV)引起的一种烈性传染病,一旦爆发会给养禽业带来毁灭性的危害.近年来,由于国内外时有从活禽市场检出H5亚型禽流感病毒或发生禽流感等情况,故加强对禽流感的防制工作极为重要.本试验采用长沙拜特生物科技研究所生产的拜特灭毒威对H5亚型禽流感病毒进行灭毒试验.结果表明,拜特灭毒威在1∶4000至1∶15000或1∶4000至1∶20000的浓度范围内与AIV作用5min或10min,对AIV的杀灭率可达99.9%以上;稀释度在1∶8000以下作用5min或1∶10000以下作用10min,杀灭率均为100%. 相似文献
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细胞因子(Cytokine)是一类主要由免疫细胞产生的、极微量的、具有广谱生物学活性的小分子肽。它既不属于免疫球蛋白,也不属于激素。细胞因子是免疫系统的重要调节分子,病原感染或疫苗接种诱导产生的细胞因子决定免疫反应的类型和程度。细胞因子作为佐剂用于疫苗的研制,即采用将抗原基因与细胞因子质粒联合注射或融合表达的方法,来提高诱导机体免疫应答效率,增强免疫效果。 相似文献
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AIV F株HA和NA全基因的扩增及序列比较 总被引:1,自引:2,他引:1
根据禽流感病毒(AIV)各基因片段两端保守区序列设计锚引物,应用cDNA末端快速扩增法获得了AIV分离株A/Chichen/Shanghai/F/98(N9N2)的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)全长基因。15个毒株的HA和NA序列比较结果表明:F株与Chicken/Beijing/1/94、Duck/HongKong/Y280/97同源率较高,为94.4%~97.4%,但与香港人流感病毒HongKong/1073/99、HongKong/1074/99及Quail/HongKong/G1/97同源率较低,为90.3%~91.9%。F株与Duck/HongKong/Y280/97的NA基因不但同源率高达97.4%,而且均在205位核苷酸之后缺失9个核苷酸。另外,30个毒株的HA基因cDNA比较结果显示,最后46个氨基酸的编码序列高度保守。 相似文献
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