绵羊痘的诊断与防控

绵羊痘在羊养殖生产中颇为常见,常引发皮肤和黏膜痘疹,使育肥羊生长发育受阻,妊娠羊流产,羔羊死亡,严重影响养殖经济效益。目前,做好免疫预防是防控绵羊痘发生的主要措施。介绍了绵羊痘的诊断和防控方法,以期为羊养殖生产中防控羊痘提供理论依据。     

鸡病毒性关节炎的防治要点

鸡病毒性关节炎是由禽呼肠孤病毒引起的一种以腱鞘炎、关节炎及吸收障碍为特征的病毒性疾病,该病一年四季均可发生,临床上主要以跗（趾）关节肿大、腱鞘和心肌发炎、生长发育受阻等症状为特征,常给养鸡企业及养鸡户造成巨大经济损失。根据多年临床经验,就该病的流行特点、临床症状、病理变化等方面进行详细阐述,针对存在的问题,提出有效的防治措施,以期对该病防控提供参考。     

表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白基因的新城疫病毒感染性克隆的构建及病毒拯救

应用反向遗传技术对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota株感染性克隆PBRN-FL质粒进行操作,构建插入欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF5基因的重组质粒LaSota-ORF5并进行病毒拯救及鉴定。依据GenBank所发表的欧洲型PRRSV LV株ORF5序列,设计引物扩增ORF5片段,通过PBRN-FL质粒上P和M基因间的PmeⅠ酶切位点插入目的片段,构建重组质粒LaSota-ORF5。采用磷酸钙转染法将重组质粒和PCI-NP、PCI-P、PCI-L等3种辅助质粒共转染BSR-T7/5/细胞拯救病毒并对其分别进行RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)和Western blot(WB)试验鉴定。结果显示:拯救病毒的RT-PCR产物测序结果正确,IFA出现绿色荧光,WB试验条带大小符合预期,证明GP5蛋白有效表达。结果表明:成功构建并拯救得到重组病毒rLaSota-GP5,为制备表达PRRSV GP5蛋白的重组NDV疫苗奠定基础。     

矮小型黄羽肉鸡配套杂交组合研究(二)二级杂交组合肉用性能测试(优质型)

通过对二级杂交16个组合早期生长测试结果的综合评定,同时考虑到一、二级杂交中需相互兼顾的一些生产性状,再根据羽色、肤色、体型和肉质等进行综合评估,筛选出C·BC和C·BR为最佳配套组合。其父母代66周龄入会母鸡产蛋量分别为170．0、153．5枚,提供苗鸡1303、114．4羽;商品代肉鸡90日龄公母平均体重分别为1882．9、2046对克,饲料报酬2．941和2．89：1,成活率963％和950％。     

H5亚型禽流感病毒HA基因在重组杆状病毒中的表达及检测

利用杆状病毒表达系统对H5亚型禽流感病毒HA基因在sf9细胞中的表达进行了研究。首先将pUCm—T—H5HA质粒用BamHⅠ及NotⅠ酶切，获得HA基因片段，同时杆状病毒转座载体质粒pFastBacⅠ也用BamHⅠ及NotⅠ酶切，然后用T4DNA连接酶连接，构建了重组质粒pFastBac—H5HA。再将该重组质粒转化DH10Bac感受态细菌，在体内进行重组，并经三重抗性与蓝白斑筛选，得到杆状病毒重组质粒Bacmid—H5HA。将Bacmid—H5HA转染sf9细胞，获得重组杆状病毒，经SDS—PAGE和Western blotting检测表明，HA蛋白在重组杆状病毒中获得表达。     

大肠艾希氏杆菌K_(99)抗原菌株的分析鉴定

大肠艾希氏杆菌的K_(99)抗原和菌株的肠病原性有着密切关系,这种抗原最早是由Sojka所发现,他观察了许多牛、羊的病原菌株,虽然其“O”抗原不同,但具有一个发生交互反应的共同K抗原,标记为“KCO”     

应用套式PCR分段扩增犬瘟热病毒融合蛋白的全基因

为研究犬瘟热病毒（ＣＤＶ）融合蛋白各段功能,根据ＣＤＶＯｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株的融合蛋白基因序列,设计合成了１０条寡聚核苷酸引物。对此１０条引物进行不同的配对,将１株犬瘟热疫苗弱毒株细胞培养物的总ＲＮＡ进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增,利用１次ＰＣＲ扩增得到了７个基因片段,最长的达１６６９ｂｐ,最短的为３１４ｂｐ;应用套式或半套式ＰＣＲ,扩增得到了能覆盖整个融合蛋白基因的８个片段     

一株新城疫病毒弱毒株的分离鉴定

于１９９６年８月从长春地区－－养鸡场分离到一株新城疫病毒,该毒株经过鸡胚传代培养,病毒形态学观察,血凝谱测定、鸡胚平均致死时间试验、鸡脑内致病指数试验、脉致病指数试验及１入毒试验等生物学特性结果表明该新城商株为弱毒株。     

RHDV VP60“通用型”T细胞表位预测

兔病毒性出血症核衣壳蛋白VP60是兔出血症病毒的主要结构蛋白,具有很强的抗原性和免疫原性,可诱导细胞免疫,在抗病毒免疫中起着关键作用.确定T细胞所识别抗原分子上的短肽序列对T细胞表位进行定位,对于研究特异性免疫应答有着重要意义.本研究应用T细胞抗原表位分析的研究方法,预测VP60T细胞蛋白质抗原表位,为后期试验奠定了基础.