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脂质体法是一种传统的向哺乳动物细胞导入外源基因的方法,然而其转染效率受多种因素影响。本研究将从脂质体和质粒DNA量、转染暴露时间以及混合孵育时间等四方面进行探索,以寻找最佳的转染体系。试验结果表明最佳转染体系为:脂质体1.25μL、DNA 0.7μg、脂质体-DNA混合孵育0 min以及转染暴露6 h。随后我们用优化过的转染体系对新生广西巴马小型猪肾脏成纤维细胞进行转绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)操作,获得了(26.45±2.11)%的转染率,并以此为核供体经体细胞核移植技术成功构建表达GFP的广西巴马小型猪克隆胚胎,同时证实转基因克隆胚的体外发育能力比得上非转基因克隆胚。这为我们构建用于人类疾病研究的基因修饰广西巴马小型猪奠定了基础。 相似文献
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适应市场经济新形势做活行业思想政治工作盘宗能,何光辉行业思想政治工作必须结合行业的生产经营活动实践,为行业的生产经营服务,这是它的一项基本原则。当前,我国的林业经济管理体制正由计划向市场转变,林业企业的生存和发展面临着由于机制转换而带来的一系列新情况... 相似文献
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温室条件下巨龙竹和马来甜龙竹的早期生长表现 总被引:1,自引:1,他引:0
于温室内移植巨龙竹和马来甜龙竹实生苗进行培育,调查实生苗的保存率和发笋率,以及实生苗和新笋的高度、叶片数、健康状况和枝条的生长表现。结果表明,巨龙竹和马来甜龙竹的保存率分别为7.3%和38.5%,差异极显著;发笋率分别为66.7%和8.1%,差异也达显著水平。实生苗的高度、叶片数分别为11.3cm、3.1片和11.6cm、3.4片,差异不显著,但2竹种的健康状况之间(2.9级和4.7级)差异显著。新笋的高度、叶片数和健康状况分别为10.1~16.1cm、3.9~4.4片和4.8级,枝条的长度、叶片数和健康状况分别7.3~8.8cm、2.6~2.7片和4.7~4.8级,所有调查指标2竹种间均不存在显著差异。 相似文献
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粘附素蛋白是金黄色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子,研究根据金黄色葡萄球菌聚集因子A(c1fa A)基因,设计合成特异性引物,以国内奶牛乳腺炎临床分离株金黄色葡萄球菌基因组为PCR模板,进行c1fa A基因的克隆,并连接入pMD18-T载体进行测序和序列分析,然后经BamH I和Xba I双酶切后构建真核表达载体并进行鉴定。结果表明,以金黄色葡萄球菌标准株为对照,国内分离株多数在990bp处扩增到特异性条带,经测序鉴定,与Genebank发表的金黄色葡萄球菌c1fa A序列同源性为99%;构建的真核表达质粒通过PCR和双酶切鉴定证明构建成功,为研究核酸疫苗奠定基础。 相似文献